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LOGOS

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Transcript

colorazione apici radicali di cipolla

obbiettivo:

01

materiali:

02

preparazione soluzione istologiche:

03

procedimento:

04

osservazioni:

05

conclusioni:

06

1. evidenziare le fasi della mitosi degli apici radicali 2. comprendere il funzionamento dei coloranti istologici 3. prendere manualità con il microscopio

procedimento:

  1. sciogliere 10g di safranina in polvere in 100 ml di alcol etilico assoluto (soluzione madre)
  2. filtrare con la carte da filtro
  3. diluizione 1:10 (10 ml di soluzione madre + 90 ml di H2O distillata)

preparazaione safranina 1%

preparazaione HCl 5 M

procedimento:

  1. prelevare 52,1 ml dalla soluzione gia esistente in laboratorio al 35%
  2. inserirla in un matraccio
  3. aggiungere acqua, lentamente per portare a volume.

video laboratorio

video laboratorio

calcoli

soluzione iniziale di HCl 35% in massa obbiettivo: 100 ml di soluzione HCl 5M n = 5 M / 0,1 l = 0,5 mol MM (HCl) = 36,358 g/mol m (HCl) = 36,45 * 0,5 = 18,225 g X = (100 * 18,225) / 35 = 52,01 ml

  1. mettere a radicare una cipolla prima dell' eseperimento
  2. tagliare gli apici radicali (circa 2 cm) con il bisturi
  3. trasferire gli apici in una piastra petri a aggiungere HCl 5M nella piastra. poi aspettare 10-15 minuti
  4. lavare gli apici in H2O distillata, ultilizzando un altra piastra Petri
  5. prelevare gli apici e e posizionarli su un vetrino porta oggetti tagiando le parti eccedenti a 5mm circa dall'apice
  6. schiacciare delicatamente con una pipetta Pasteur
  7. coprire gli apici con la safranina e attendere 5 - 7- 10 minuti
  8. versare poche gocce di H2O distillata e tamponare con carta assorbente
  9. coprire con il vetrino coprioggetto ed eliminare eventuale colorante in eccesso con carta assorbente
  10. osservare a 4x, 10x, 40x

procedimento:

video:

conclusioni

Tempo esperimento: 45m con soluzioni preparate 1.30 h con soluzioni da preparare

A fine esperimento, l'osservazioni della mitosi è avvenuta in parte. nei campioni preparati ci sono stati diversi errori che ne hanno offuscato la visione completa, ovvero:

  • schiacciare troppo poco l'apice dopo averlo posto sul vetrino
  • poco tempo trascorso, per alcuni apici, nelle diverse soluzioni istologiche

Osservazioni al microscopio

osserviamo al microscopio tutti i campioni creati, con i diversi tipi di obbiettivo 4X 10X 40Xqui riportiamo i risultati migliori:

Obbiettivo: 4x nessun risultato visibile

Obiettivo: 10x nessun risultato visibile

Obbiettivo: 40x risultato parzialmente visibile, alcuni errori ne hanno compromesso la visibilità

  • cipolla
  • becher
  • piastra Petri
  • pinzette
  • bisturi
  • carta da filtro
  • matracci e pipette
  • vetrini porta oggetti
  • vetrini coprioggetti

materiali:

reagenti:

strumentazione:

  • safranina 1%
  • HCl 5M
  • Etanolo assoluto

  • microscopio ottico

Tempo stimato: 60 minuti