1. Siglare una provetta da 1,5 ml con il codice identificativo
2. Aggiungere 500 ul di tampone di estrazione: Soluzione A (Saccarosio, Tris-HCI 1M pH8,EDTA 0,5M pH8, Triton X-100) + proteinasi K.
3. Strofinare un cotton fioc sulle gengive e su entrambe le guance (la quantità di cellule che si ottiene è importante per una buona riuscita del test).
4. Mettere il cotton fioc all'interno della provetta contenente la Soluzione A
5. Tagliare il bastoncino lasciando nella provetta solo la parte assorbente utilizzata
5. Incubare a 50 °C in un termostato per 10 minuti.
6. Togliere la parte assorbente del cotton fioc dalla provetta.7. Centrifugare per 7 minuti a 13000 rpm, per far depositare i detriti cellulari.
8. Trasferire 200 ul di surnatante in una nuova provetta da 1,5 ml facendo attenzione a non prelevare il pellet formatosi sul fondo.
9. Aggiungere 20 ul di NaCI 5M e picchiettare con il dito. 10. Aggiungere 450 ul di EtOH assoluto (100%).
11. Miscelare invertendo le provetta (almeno 5x).12. Centrifugare per 7 minuti a 13000 rpm. 13.Eliminare il surnatante facendo attenzione a non perdere il pellet.
14. Lavare il pellet addizionando 200 ul di EtOH 70%.15. Centrifugare per 7 minuti a 13000 rpm ed eliminare tutto il surnatante.
16. Lasciare asciugare il pellet nel termostato a 60°C lasciando la provetta aperta finché tutto l'etanolo è evaporato.17. Quando il pellet è secco, risospenderlo in 50 ul di acqua e incubare a 60°C per 2 min.
Estrazione del dna
Matilde MOTTURA
Created on April 24, 2026
Start designing with a free template
Discover more than 1500 professional designs like these:
View
Winter Presentation
View
Hanukkah Presentation
View
Vintage Photo Album
View
Nature Presentation
View
Halloween Presentation
View
Tarot Presentation
View
Vaporwave presentation
Explore all templates
Transcript
Estrazione del dna
Da cellule di sfaldamento della mucosa boccale
START
Strumenti e materiali necessari
1. Siglare una provetta da 1,5 ml con il codice identificativo
2. Aggiungere 500 ul di tampone di estrazione: Soluzione A (Saccarosio, Tris-HCI 1M pH8,EDTA 0,5M pH8, Triton X-100) + proteinasi K.
3. Strofinare un cotton fioc sulle gengive e su entrambe le guance (la quantità di cellule che si ottiene è importante per una buona riuscita del test).
4. Mettere il cotton fioc all'interno della provetta contenente la Soluzione A
5. Tagliare il bastoncino lasciando nella provetta solo la parte assorbente utilizzata
5. Incubare a 50 °C in un termostato per 10 minuti.
6. Togliere la parte assorbente del cotton fioc dalla provetta.7. Centrifugare per 7 minuti a 13000 rpm, per far depositare i detriti cellulari.
8. Trasferire 200 ul di surnatante in una nuova provetta da 1,5 ml facendo attenzione a non prelevare il pellet formatosi sul fondo.
9. Aggiungere 20 ul di NaCI 5M e picchiettare con il dito. 10. Aggiungere 450 ul di EtOH assoluto (100%).
11. Miscelare invertendo le provetta (almeno 5x).12. Centrifugare per 7 minuti a 13000 rpm. 13.Eliminare il surnatante facendo attenzione a non perdere il pellet.
14. Lavare il pellet addizionando 200 ul di EtOH 70%.15. Centrifugare per 7 minuti a 13000 rpm ed eliminare tutto il surnatante.
16. Lasciare asciugare il pellet nel termostato a 60°C lasciando la provetta aperta finché tutto l'etanolo è evaporato.17. Quando il pellet è secco, risospenderlo in 50 ul di acqua e incubare a 60°C per 2 min.
ESTRAZIONE DEL DNA COMPLETATA!