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Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
El siguiente artículo se expone un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas.
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Alberto trabaja en una empresa biotecnológica desarrollando una línea celular CHO para producir un anticuerpo monoclonal terapéutico.
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Tras la transfección estable y selección con G418, obtiene 96 clones individuales. Cultiva cada clon en placas de 24 pocillos durante 5 días y cuantifica el anticuerpo secretado mediante ELISA, observando productividades entre 5 y 180 mg/L. Selecciona los 10 clones más productivos y los expande en frascos T-25 para caracterización detallada. Mediante citometría de flujo confirma que más del 95% de las células expresan el anticuerpo de forma homogénea, y con Western blot verifica la integridad de las cadenas pesada y ligera. Para evaluar estabilidad, cultiva el clon más productivo durante 60 días con y sin G418, constatando que mantiene más del 90% de productividad bajo presión selectiva, pero cae un 45% sin antibiótico. Finalmente, Alberto establece un banco celular maestro en el pase 8, criopreservando 50 viales con 5 × 10⁶ células en medio con 10% DMSO, caracterizando el banco mediante ELISA, Western blot, citometría y controles de esterilidad y micoplasma. Este banco asegura la trazabilidad y reproducibilidad de futuros lotes de producción.
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