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Resultados: Control Ambiental y de Superficies

Silvia Burguete

Created on November 4, 2025

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Transcript

UP.2. Equipamiento del laboratorio de cultivos Laboratorio de Cultivos Celulares

Resultados: Control Ambiental y de Superficies

Objetivo: Verificar la limpieza, asepsia o nivel de contaminación ambiental en laboratorios, áreas clínicas, salas blancas, etc.

Medio de cultivo: TSA Es un medio de cultivo sólido de uso general que proporciona nutrientes para el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, incluyendo bacterias aeróbicas y anaeróbicas, así como hongos y levaduras.

Grupo 1: Lectura 24 horas: 31/10/2025

Control Ambiental Placa control Punto 1: Cabina 1 Punto 2: Cabina 2

Control Superficies Placa control Punto 1: Superficie cabina 1 Punto 2: Superficie cabina 2 Punto 2: Superficie mesa izquierda Punto 2: Superficie bancada

Grupo 2: Lectura 24 horas: 31/10/2025

Control Superficies Placa control Punto 1: Mesa trabajo 1 Punto 2: Mesa trabajo 2 Punto 3: Mesa trabajo 3 Punto 4: Microscopio

Control Ambiental Placa control Punto 1: Mesa trabajo 1 Punto 2: Mesa trabajo 2 Punto 3: Mesa trabajo 3 Punto 4: Microscopio

Grupo 3: Lectura 24 horas: 31/10/2025

Control Ambiental Placa control Punto 1: Lavamanos Punto 2: Armario Punto 3: Bayeta

Control Superficies Placa control Punto 1: Lavamanos Punto 2: Armario Punto 3: Bayeta

Grupo 1

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Control Ambiental

Control de superficies

Grupo 2

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Control Ambiental

Control de superficies

Grupo 3

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Control Ambiental

Control de superficies

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 1

Control Ambiental Punto 1: Cabina 1 Punto 2: Cabina 2

<10 UFC/placa/30 min

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 1

Control Superficies Punto 1: Superficie cabina 1 Punto 2: Superficie cabina 2

<2 UFC/cm2

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 1

Control Superficies Punto 3: Superficie mesa izquierda Punto 4: Superficie bancada

<5 UFC/cm2

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 2

Control Ambiental Punto 1: Mesa trabajo 1 Punto 2: Mesa trabajo 2

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 2

Control Ambiental Punto 3: Mesa trabajo 3 Punto 4: Microscopio

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 2

Control Superficies Punto 1: Mesa trabajo 1 Punto 2: Mesa trabajo 2

<5 UFC/cm2

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 2

Control Superficies Punto 3: Mesa trabajo 3 Punto 4: Microscopio

<5 UFC/cm2

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 3

Control Ambiental Punto 1: Lavamanos Punto 2: Armario Punto 3: Bayeta

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 4 días: 03/11/2025 Placas de blanco control

Grupo 3

Control Superficies Punto 1: Lavamanos Punto 2: Armario Punto 3: Bayeta

<5 UFC/cm2

>5 UFC/cm2

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Ejemplo de resultado y cálculo:

Interpretación de resultados:

Interpretación Esta placa es claramente <10 UFC Así que el resultado sería: Control ambiental satisfactorio Nivel microbiano bajo, sin riesgo aparente.

Interpretación: Se observan pocas colonias bien definidas, lo que sugiere un aislamiento puro o con baja carga bacteriana. Las colonias son circulares, convexas, lisas y opacas, con un tono amarillo claro o beige, este aspecto es típico de bacterias Gram positivas no hemolíticas. No hay halo de inhibición ni cambio de color en el agar, por lo que no hay evidencia de hemólisis ni reacción bioquímica visible.

Interpretación:

  • El hecho de que haya muchas colonias (de diferentes morfologías, tamaños y colores) indica una alta carga microbiana total en la superficie muestreada.
  • En la placa aparecen:
-Colonias blanquecinas, opacas y grandes-Colonias amarillentas, redondas y lisas -Algunas zonas algodonosas o difusas, posible presencia de hongos o moho.
  • La placa está altamente contaminada con microorganismos ambientales y cutáneos.
  • No sería apta para reutilización en zonas que requieran condiciones higiénicas (por ejemplo, áreas sanitarias o de manipulación de alimentos).
  • Se recomienda reemplazarla o desinfectarla con un método eficaz (lejía, autoclave o lavado a alta temperatura con desinfectante).

Interpretación: Las UFC visibles individuales están marcadas con círculos rojos y las zonas de crecimiento confluente, donde ya no se pueden contar las colonias separadas, aparecen sombreadas en naranja.

>5 UFC/cm2

Medio de cultivo: Potato Glucose El término "medio de cultivo glucosa potato" se refiere al Agar de Dextrosa y Papa (PDA), un medio de cultivo sólido utilizado para el crecimiento de levaduras y mohos. Su fórmula, que contiene infusión de patata como fuente de nutrientes y dextrosa (glucosa) como fuente de carbono, junto con un bajo pH que inhibe las bacterias, lo hace ideal para detectar y enumerar hongos en alimentos, cosméticos y otras muestras.

Lectura a los 5 días: 04/11/2025

Grupo 1

Control Ambiental Placa control Punto 1: Cabina 1 Punto 2: Cabina 2

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 5 días: 04/11/2025

Grupo 2

Control Ambiental Blanco

Lectura a los 5 días: 04/11/2025

Grupo 2

Control Ambiental Punto 1: Mesa 1

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 5 días: 04/11/2025

Grupo 2

Control Ambiental Punto 2: Mesa 2

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 5 días: 04/11/2025

Grupo 2

Control Ambiental Punto 3: Mesa 3

>50 UFC/placa/30 min

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 5 días: 04/11/2025

Control Ambiental Punto 4: Microscopio

Grupo 2

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Lectura a los 5 días: 04/11/2025

Control Ambiental Placa control Punto 1: Armario

Grupo 3

<50 UFC/placa/30 min

(criterios de aceptación punto 11 PNT)

Hoy en día, los laboratorios de cultivos celulares, especialmente los de biotecnología, farmacéutica o investigación biomédica

Aplican métodos más modernos, rápidos y cuantitativos para garantizar la asepsia

Protocolo Control Ambiental por Detección de ATP por bioluminiscencia

La técnica de detección de ATP por bioluminiscencia es el método más utilizado para el control ambiental y de superficies en laboratorios de cultivos celulares. Permite verificar la eficacia de limpieza y desinfección mediante la detección de residuos biológicos (ATP) presentes en superficies, líquidos o equipos.

Principio del método:

El ATP (adenosín trifosfato) es un marcador universal de materia orgánica viva. En esta técnica, el ATP reacciona con la enzima luciferasa-luciferina, produciendo luz proporcional a la cantidad de ATP presente. La intensidad luminosa se mide con un luminómetro portátil, expresada en RLU. (Relative Light Units).

Equipos y materiales:

ElementoLuminómetroHisopos reactivosSuperficies de pruebaGuantes y EPP

Descripción3M Clean-Trace NGi (portátil, pantalla digital y software de registro)Contienen reactivo luciferina-luciferasa en el bulbo inferiorMesas, cabinas de flujo laminar, incubadoras, material reutilizableUso obligatorio para evitar contaminación cruzada

Los resultados se expresan en unidades relativas de luz (RLU). Cada laboratorio establece suspropios límites de aceptación según el tipo de superficie y riesgo biológico. Valores bajos indicanuna correcta limpieza y desinfección. Valores altos sugieren contaminación o residuos orgánicos.

Tipo de superficie

Límite aceptable (RLU)

Protocolo Control Ambiental por Detección de ATP por bioluminiscencia

4️⃣ Activación del bulbo con el reactivo. 5️⃣ Mezcla del reactivo con la muestra. 6️⃣ Inserción del hisopo en el luminómetro, lectura y registro del resultado.

1️⃣ Encendido y calibración del luminómetro. 2️⃣ Preparación del hisopo Clean-Trace. 3️⃣ Muestreo de la superficie (frotado).

Los resultados se expresan en unidades relativas de luz (RLU). Cada laboratorio establece suspropios límites de aceptación según el tipo de superficie y riesgo biológico. Valores bajos indicanuna correcta limpieza y desinfección. Valores altos sugieren contaminación o residuos orgánicos.

Tipo de superficie

Límite aceptable (RLU)

Interpretación de resultados:

Superficies críticas (cabinas, incubadores)Superficies no críticas (mesas, carros)Superficies generales o de apoyo

< 100 RLU< 250 RLU< 500 RLU

Ventajas y limitaciones:

Ventajas:• Resultado inmediato (menor a 1 minuto).• Método cuantitativo y sensible.• Permite control rutinario y trazabilidad digital.• No requiere incubación ni medios de cultivo.

Limitaciones:• No distingue entre microorganismos y residuos orgánicos.• Requiere calibración periódica y control de calidad.• Coste inicial moderado del equipo.

¿Que es y para que se utiliza?