Brayan Alejandro Saldaña ZuñigaCarlos Javier Simental Godoy Luis Enrique Ramírez Silva
Microbial Rhamnolipid Production — Pseudomonas aeruginosa BM02
Upstream
PROCESS
Esquema interactivo del proceso de elaboración del inóculo y producción en matraz.
1° SELECCIÓN DE CEPA
4° CULTIVO DE MATRAZ
2° PREPARACIÓN DEL INÓCULO
5° MONITOREO Y MUESTREO
6° EXTRACCIÓN DEL BIOSURFACTANTE
3° MEDIO Y CONDICIONES
7° ESCALAMIENTO
Cerqueira dos Santos, S., et al. (2024). Production and characterization of rhamnolipids by Pseudomonas aeruginosa ... Scientific Reports, 14, 4629. https://doi.org/10.1038/s41598-024-54828-w
Hacia biorreactor
Mantener proporción de inóculo 5 % v/v Control automático: pH, temperatura, aireación Monitorear espuma (usar antiespumante) Evaluar modo batch → fed-batch
Método de recuperación
- Ajustar sobrenadante a pH 2
- Reposar 24 h a 4 °C
- Centrifugar y recoger precipitado
- Extraer con cloroformo:etanol (2:1
- Evaporar solvente
- Pesar rhamnolípidos (mg/mL)
Seguimiento de crecimiento y producción
- OD600 cada 24 h - Prueba de emulsificación (E24) - Muestreo estéril diario - Centrifugación: 4 000 rpm · 20 min · 4 °C
Medio Mineral Salino (MSM):K₂HPO₄ 4.0 g/L Na₂HPO₄ 1.5 g/L NaNO₃ 1.0 g/L MgSO₄·7H₂O 0.2 g/L CaCl₂·2H₂O 0.02 g/L FeCl₃·6H₂O 0.02 g/L Fuente de carbono: Glicerol 1 % v/vCondiciones óptimas:25 °C pH 5 180 rpm 5 días
Medio de cultivo (MSM) y parámetroS
Etapa de cultivo
Matraz Erlenmeyer 250 mL Volumen de trabajo: 100 mL MSM Tapón permeable a gas Agitación: 180 rpm Incubación: 5 días a 25 °C
Selección y origen de cepa
Cepa utilizada: Pseudomonas aeruginosa BM02 Aislada en: suelo de mina de bauxita (Amazonas, Brasil) Conservación: glicerol a −20 °C Confirmación taxonómica: 16S rRNA, secuencia depositada en GenBank (OP410927.1)
Elaboración del inóculo
- Datos clave del artículo:Recuperación de cepa desde criovialPreinóculo en caldo (fase log) Ajuste de densidad celular Inoculación al matraz Densidad final usada: 1.5×10⁸ UFC·mL⁻¹ Volumen de inóculo: 5 mL Inóculo en cultivo final: 5 % v/v
- Descongelar criovial y estriar en agar nutritivo.
- Incubar a 25–30 °C: 18–24 h.
- Tomar colonia aislada y sembrar en 10 mL de caldo.
- Incubar hasta OD600 ≈ 0.6–0.8.
- Ajustar densidad a 1.5×10⁸ UFC/mL (turbidímetro o curva OD).
- Transferir 5 mL de este cultivo a 100 mL de medio MSM estéril.
Microbial Rhamnolipid Production — Pseudomonas aeruginosa BM02
LUIS ENRIQUE RAMIREZ SILVA
Created on November 1, 2025
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Brayan Alejandro Saldaña ZuñigaCarlos Javier Simental Godoy Luis Enrique Ramírez Silva
Microbial Rhamnolipid Production — Pseudomonas aeruginosa BM02
Upstream
PROCESS
Esquema interactivo del proceso de elaboración del inóculo y producción en matraz.
1° SELECCIÓN DE CEPA
4° CULTIVO DE MATRAZ
2° PREPARACIÓN DEL INÓCULO
5° MONITOREO Y MUESTREO
6° EXTRACCIÓN DEL BIOSURFACTANTE
3° MEDIO Y CONDICIONES
7° ESCALAMIENTO
Cerqueira dos Santos, S., et al. (2024). Production and characterization of rhamnolipids by Pseudomonas aeruginosa ... Scientific Reports, 14, 4629. https://doi.org/10.1038/s41598-024-54828-w
Hacia biorreactor
Mantener proporción de inóculo 5 % v/v Control automático: pH, temperatura, aireación Monitorear espuma (usar antiespumante) Evaluar modo batch → fed-batch
Método de recuperación
Seguimiento de crecimiento y producción
- OD600 cada 24 h - Prueba de emulsificación (E24) - Muestreo estéril diario - Centrifugación: 4 000 rpm · 20 min · 4 °C
Medio Mineral Salino (MSM):K₂HPO₄ 4.0 g/L Na₂HPO₄ 1.5 g/L NaNO₃ 1.0 g/L MgSO₄·7H₂O 0.2 g/L CaCl₂·2H₂O 0.02 g/L FeCl₃·6H₂O 0.02 g/L Fuente de carbono: Glicerol 1 % v/vCondiciones óptimas:25 °C pH 5 180 rpm 5 días
Medio de cultivo (MSM) y parámetroS
Etapa de cultivo
Matraz Erlenmeyer 250 mL Volumen de trabajo: 100 mL MSM Tapón permeable a gas Agitación: 180 rpm Incubación: 5 días a 25 °C
Selección y origen de cepa
Cepa utilizada: Pseudomonas aeruginosa BM02 Aislada en: suelo de mina de bauxita (Amazonas, Brasil) Conservación: glicerol a −20 °C Confirmación taxonómica: 16S rRNA, secuencia depositada en GenBank (OP410927.1)
Elaboración del inóculo
- Datos clave del artículo:Recuperación de cepa desde criovialPreinóculo en caldo (fase log) Ajuste de densidad celular Inoculación al matraz Densidad final usada: 1.5×10⁸ UFC·mL⁻¹ Volumen de inóculo: 5 mL Inóculo en cultivo final: 5 % v/v