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“El brote del agua del parque Boreal”

MARIAEDUVIGES BURROL

Created on October 23, 2025

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Transcript

Dra. M.Eduviges Burrola Barraza Dra. Maria Carmern Elizabeth Delgado Gardea

“El brote del agua del parque Boreal”

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Escenario del problema

En la zona del Parque Boreal, en la ciudad de Chihuahua, 18 personas presentan diarrea acuosa, dolor abdominal, náusea y febrícula entre 24 y 48 horas después de asistir a la Kermés anual. La mayoría consumió alimentos de los diferentes puestos (enchiladas, elotes, taquitos), pero todas bebieron agua de alguno de los 4 bebederos del parque.Tras la notificación de los síntomas, los organizadores deciden mandar analizar el agua de los bebederos para determinar su calidad microbiológica.

Siguiente

Distribución de los casos y fuentes de exposición

Los pines muestran: Hogares afectados Bebederos (azules) Parque Central Bóreal

Siguiente

De click en los iconos para que ubique el número del bebedero y de los pacientes en los hogares afectados

¿Qué tan segura era el agua de los bebederos?

Tu laboratorio recibe cuatro muestras de agua (una por bebedero). Tu equipo debe realizar tres técnicas básicas de análisis microbiológico del agua:

Número Más Probable (NMP)

Diseminación en placa

Vaciado en placa

Con los resultados, deberás decidir si el agua cumple con los criterios microbiológicos de potabilidad.

Siguiente

Técnica de vaciado en placa

descripción

El vaciado en placa se utiliza para cuantificar el número total de bacterias viables en una muestra de agua y evaluar la posible contaminación coliforme y, al mismo tiempo, observar el tipo de crecimiento (aerobio o anaerobio facultativo). En esta técnica se emplean dos medios de cultivo:

  • Agar cuenta estándar (PCA): para determinar la carga microbiana total (todas las bacterias viables).
  • Agar rojo bilis violeta (VRBA): medio selectivo para coliformes, útil para identificar contaminación de origen fecal.

Siguiente

Técnica de diseminación en placa (siembra por extensión)

descripción

La diseminación en placa permite observar colonias aisladas y su morfología en la superficie del agar, favoreciendo el estudio cualitativo de los microorganismos presentes. Las bacterias que crecen son principalmente aerobias estrictas y facultativas, porque están expuestas al oxígeno. En esta práctica se utiliza agar nutritivo como medio no selectivo.

Siguiente

Técnica del Número Más Probable (NMP)

descripción

El método del Número Más Probable (NMP) estima la presencia de bacterias coliformes en el agua mediante diluciones seriadas y observación de crecimiento en tubos con caldo lactosado y caldo brillante con tubode Durham.

Siguente

Antes de hacer cualquier técnica deberás hacer una dilución seriada

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Elige la mejor forma de hacer una dilución seriada

Haz clic en la opción correcta:

Transferir 1 mL del tubo anterior al siguiente con 9 mL de diluyente, mezclar, y repetir sucesivamente hasta 10⁻⁴.

Tomar 1 mL del tubo original y colocarlo directamente en la placa sin diluir.

Tomar 1 mL del tubo 10⁻¹ y volverlo a colocar en el tubo original.

Siguiente

“Sin diluir, las bacterias serán demasiadas: las placas quedarán saturadas y no podrás contar ni aislar colonias.”

Siguiente

“¡Cuidado! Eso contamina la muestra original. Las diluciones siempre van de más concentrada a más diluida.”

Siguiente

“¡Correcto! Cada paso diluye la muestra diez veces (1:10). Así se obtiene una serie de diluciones limpias y progresivas.”

Siguiente

Ahora que ya tienes tus diluciones seriadas, contesta lo siguiente:

¿Por qué es importante agitar suavemente cada tubo antes de hacer la siguiente dilución?

A) Para eliminar bacterias B) Para homogeneizar la muestra C) Para aumentar el volumen

INCORRECTO

Siguiente

CORRECTO

“Homogeneizar garantiza que cada tubo tenga una distribución uniforme de microorganismos.”

Siguiente

¡Ya tienes listas tus diluciones seriadas!

Ahora es momento de comenzar el análisis microbiológico del agua. La primera técnica que aplicarás será el vaciado en placa, con la que podrás contar las bacterias viables presentes en cada dilución y observar su patrón de crecimiento dentro y fuera del agar.

Siguiente

¿Cuál es la forma correcta de hacer el vaciado en placa?

Haz clic en la opción correcta:

Se coloca 1 mL de la muestra o dilución en una caja Petri estéril y se vierte sobre ella el agar cuenta estándar o agar rojo bilis violeta aún fundido (≈45 °C). Se mezcla suavemente y se deja solidificar.

Se colocan 5 mL de la muestra directamente sobre una placa con agar nutritivo sólido y se distribuye con un asa en “L”

Se toma una muestra de agua y se inocula en tubos con caldo lactosado, observando producción de gas.

Siguiente

No es correcto. En el vaciado en placa el agar debe estar fundido y aún líquido (≈45 °C) para mezclar la muestra antes de solidificar. Además, el volumen utilizado es 1 mL, no 5 mL.

Siguiente

CORRECTO

“Así las bacterias quedan distribuidas dentro y sobre el agar, permitiendo crecer tanto aerobias (en la superficie) como anaerobias facultativas (dentro del medio).”

Siguiente

Esa descripción corresponde al método del Número Más Probable (NMP), no al vaciado en placa.

Siguiente

¡Muy bien! Ahora sigue la técnica de diseminación en placa

Una vez realizado el vaciado en placa y determinado el número aproximado de bacterias viables, es momento de observar con mayor detalle las características de las colonias. La diseminación en placa permite aislar bacterias individuales y analizar su morfología: color, forma, borde y textura. Esta técnica se realiza sobre la superficie del agar nutritivo, un medio no selectivo que permite el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos.

Siguiente

¿Cuál es la forma correcta de hacer la diseminación en placa?

Haz clic en la opción correcta:

Se colocan 1 mL de la muestra en una caja Petri vacía y se agrega agar fundido a 45 °C, mezclando suavemente antes de solidificar.

Se toma 0.1 mL de la dilución seleccionada y se coloca sobre la superficie del agar nutritivo ya solidificado.

Se inocula 1 mL de la muestra en tubos con caldo lactosado y se observa si se forma gas después de 24 h..

Siguiente

Esa descripción es del vaciado en placa, donde el agar se mezcla con la muestra.En la diseminación, el agar ya está solidificado y solo se extiende la muestra sobre su superficie.

Siguiente

Esa descripción corresponde al método del Número Más Probable (NMP), no al vaciado en placa.

Siguiente

CORRECTO

“Esta técnica permite que las bacterias queden separadas unas de otras y formen colonias individuales. Solo crecen las bacterias aerobias o facultativas, ya que están en contacto con el oxígeno.”

Siguiente

Por último, sigue la técnica del Número Más Probable (NMP)

Después de observar el crecimiento de bacterias en las placas, llega el momento de comprobar si el agua contiene coliformes, bacterias indicadoras de contaminación fecal. El método del Número Más Probable (NMP) no se hace en placas, sino en tubos con caldo lactosado , donde se observa la producción de gas y turbidez después de la incubación.

Siguiente

¿Cuál es la forma correcta de de realizar la técnica del NMP?

Haz clic en la opción correcta:

Se preparan diluciones seriadas (10⁻¹, 10⁻², 10⁻³) y se inocula 1 mL de cada dilución en tres tubos con caldo lactosado Los tubos se incuban a 35 °C por 24–48 h, y se observan los tubos con gas y turbidez para consultar la tabla de NMP/100 mL.

Se colocan 0.1 mL de la muestra sobre la superficie del agar nutritivo y se distribuye con una asa en “L”.

Se mezcla la muestra con agar rojo bilis violeta fundido y se vierte en una placa Petri para contar colonias coliformes.

Siguiente

Esta descripción es de la diseminación en placa, donde se busca aislar colonias, no estimar coliformes.El NMP se realiza en tubos con caldo lactosado, no en placas.

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CORRECTO

“Así se estima la probabilidad estadística de presencia de coliformes en el agua. La formación de gas indica fermentación de lactosa, característica típica de coliformes.”

Siguiente

Esa descripción corresponde al vaciado en placa, no al método NMP.El NMP no usa agar, sino caldos líquidos en tubos y una tabla estadística para estimar resultados

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¡Ya aplicaste todas las técnicas!

Ahora llega el momento de analizar tus resultados

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¡Felicidades, has completado el análisis microbiológico del agua!

Has recorrido paso a paso el proceso que sigue un laboratorio de microbiología para determinar la calidad sanitaria del agua. Aplicaste las tres técnicas fundamentales: Vaciado en placa → cuantificaste la carga bacteriana total. Diseminación en placa → observaste la diversidad y morfología de las bacterias. Número Más Probable (NMP) → estimaste la presencia de coliformes fecales.

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A partir de los resultados, concluimos que:

  • Los bebederos 1 y 4 están contaminados y no son potables.
  • El bebedero 2 presenta riesgo moderado.
  • El bebedero 3 cumple con la NOM-127-SSA1-2021 y puede considerarse seguro.

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FIN