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Détermination du coefficient de partage de sulfamides
Introduction
La lipophilie représente une mesure de la tendance relative d’un soluté à préférer un environnement non-aqueux à un environnement aqueux.
La lipophilie d’une molécule peut se mesurer par son aptitude à se distribuer dans un système biphasique liquide-liquide. Le coefficient de partage dans le système n-octanol / eau est un des paramètres physico-chimiques quantitatifs qui reflète la lipophilie d’une substance.
Le coefficient de partage n-octanol / eau joue un rôle important dans :
leur passage à travers les membranes
la solubilité
les interactions enzyme-inhibiteur ou ligand-récepteur de nature hydrophobe
le transport
les paramètres pharmacocinétiques (ADME)
l’activité pharmacologique
la formulation
l’accumulation dans des tissus
pour certains leur fixation sur les protéines plasmatiques
la toxicité des médicaments
A ce titre, la lipophilie des molécules constitue un descripteur physico-chimique de première importance dans la conception de substances actives. Le logP est par ailleurs un des paramètres des règles de Lipinski (règle des 5) permettant d’évaluer la biodisponibilité par voie orale des médicaments.
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale
2. Etablissement de la courbe étalon
3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Préparation de la solution mère : vous devez peser 15 ou 30 mg de sulfamide...
Quelles sont les bonnes pratiques pour peser ?
regarder la vidéo
A partir de la masse pesée précédemment, réaliser une solution de concentration précise à l'aide d'une fiole jaugée.
Voyons ce qu'il pourrait se passer si vous utilisez le sabot de pesée dans le mauvais sens =>
Play
Conséquences du scénario catastrophe
Trait de jauge très largement dépassé :volume et concentration erronés
Mauvaise solubilisation de la substance active dans la fiole
Paillasse inondée, perte de substance active (concentration erronée)
Trait de jauge
Comment préparer la solution de sulfamide dans une fiole jaugée dans de bonnes conditions...
regarder la vidéo
Points de vigilance lors de la préparation de la solution mère
récupérer la totalité de la substance active
manipuler proprement
agiter rigoureusement afin d'assurer une bonne solubilisation de la solution mère
être vigilant et rigoureux pour ajuster le trait de jauge
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale
Une fois la solution mère préparée (et sa concentration réelle déterminée), il reste à enregistrer la courbe spectrale de 220 nm à 360 nm) sur le spectrophotomètre UV. Déterminer le ou les maxima d'absorption
Réalisation de la courbe spectrale
Au niveau de sa paillasse, remplir deux cuves :
- l'une avec le tampon (blanc)
- l'autre avec la solution mère
Les cuves sont remplies aux trois quarts puis essuyées sur toutes les faces.
Se déplacer vers le spectrophotomètre avec le support en plastique et les deux cuves précédemment remplies
Réalisation du "blanc" à l'aide du tampon
Appuyer sur "zero blank"
Introduire la cuve Fermer le capot
Le blanc est scanné
Choisir la cuve de tampon
Nb : si la cuve possède deux faces dépolies, mettre les faces transparentes perpendiculaires au faisceau
Scan de la solution mère
Appuyer sur "start-enter"
Introduire la cuve Fermer le capot
Choisir la cuve de solution mère
Noter λ max et la DO
Valider OK avec "start-enter", la courbe spectrale tracée
Nb : si la cuve possède deux faces dépolies, mettre les faces transparentes perpendiculaires au faisceau
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale
2. Etablissement de la courbe étalon
3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 2. Etablissement de la courbe étalon
Préparer à l’aide de la solution mère A en la diluant avec de la solution tampon phtalate pH = 5.2, une série de 8 solutions étalons.
Déterminer à l’aide d’un spectrophotomètre et d'une cuve de 1 cm, les densités optiques de ces solutions à la longueur d’onde correspondant au maximum d’absorption de la substance active étudiée.
Sur un tableur, tracer la courbe de corrélation et établir l’équation de la droite.
Quelles sont les bonnes pratiques pour réaliser une dilution?
regarder la vidéo
En cas d'erreur, n'hésitez pas à consulter la ressource sur les calculs de dilutions dans la partie "méthodologies de calculs"
En cas d'erreur, n'hésitez pas à consulter la ressource sur les calculs de dilutions dans la partie "méthodologies de calculs"
Il est important de préparer les calculs de chacune des dilutions dans votre fascicule de TP
Etape 2. Etablissement de la courbe étalon
Préparer à l’aide de la solution mère A en la diluant avec de la solution tampon phtalate pH = 5.2, une série de 8 solutions étalons.
Déterminer à l’aide d’un spectrophotomètre et d'une cuve de 1 cm, les densités optiques de ces solutions à la longueur d’onde correspondant au maximum d’absorption de la substance active étudiée.
Sur un tableur, tracer la courbe de corrélation et établir l’équation de la droite.
Réalisation de la courbe étalon
Au niveau de sa paillasse, remplir deux cuves :
- l'une avec le tampon (blanc)
- l'autre avec la dilution, une fois le tube vortexé
Les cuves sont remplies aux trois quarts puis essuyées sur toutes les faces.
Réglages préliminaires
Appuyer sur "zero blank"
Introduire le blanc
Rentrer la valeur + "start-enter"
Choisir "absorption"
Régler à la λ max
Scan d'une dilution
Appuyer sur "start - enter"
Noter l'absorbance
Introduire la dilution
Etape 2. Etablissement de la courbe étalon
Préparer à l’aide de la solution mère A en la diluant avec de la solution tampon phtalate pH = 5.2, une série de 8 solutions étalons.
Déterminer à l’aide d’un spectrophotomètre et d'une cuve de 1 cm, les densités optiques de ces solutions à la longueur d’onde correspondant au maximum d’absorption de la substance active étudiée.
Sur un tableur, tracer la courbe de corrélation et établir l’équation de la droite.
Noter bien les valeurs de la pente, de l'ordonnée à l'origine et du coefficient de corrélation.
Tracer une courbe étalon sur un tableur
Soit avec Calc sur OpenOffice Soit avec Excel sur Microsoft Office
2. Sélectionner le tableau et cliquer sur l’icône « Diagramme ».
1. Remplir le tableau avec les valeurs qui nous intéressent :
- La 1re colonne « A » correspond aux concentrations réelles.
- La 2de colonne « B » correspond aux DO mesurées.
4. Cliquer avec un clic-droit sur un point de la courbe puis sélectionner : « Insérer une courbe de tendance… ».
3. Choisir « dispersion » de points puis cliquer sur « Terminer ».
6. Sélectionner le cadre dans lequel est noté l’équation de la droite.
Clic droit puis : « Formater l’équation de la courbe de tendance… ».
5. Choisir « Linéaire » puis demander d’afficher l’équation et le coefficient de corrélation (R2).
7. Sélectionner « Nombre », ensuite choisissez 4 décimales puis cliquer sur « OK ».
8. Vous obtenez une droite avec son équation et son coefficient de corrélation dans le format attendu.
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale2. Etablissement de la courbe étalon
3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Prélever 6 mL de la solution mère A dans un erlenmeyer. Après addition de 6 mL d’octanol (sous la hotte), les deux phases sont mises en contact à 20°C par agitation mécanique durant 45 minutes dans l'erlen bouché.
Sous la hotte
voir vidéo
Agitateur mécanique
Testez-vous
Préparer ces calculs avant le TP
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Prélever la phase aqueuse puis la centrifuger à 3000 tours/minute pendant 15 minutes.
Testez-vous
Centrifugeuse
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Phase aqueuse
Autre exercice
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Mesurer au spectrophotomètre l’absorbance de la solution aqueuse tamponnée.
Calculer la concentration du composé dissout dans la solution aqueuse tamponnée en se référant à la courbe étalon : [C] solution aqueuse
Calculer la concentration du composé dissout dans l’octanol : [C] octanol Quelle formule utiliser ?
Préparer ces calculs avant le TP
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Calculer le log P app : [C] octanolLog Papp = Log [C] solution aqueuse
Préparer ces calculs avant le TP
Compte rendu
Dans votre compte-rendu de TP, il vous est demandé de classer les trois sulfamides par lipophilie croissante d'après leurs structures chimiques.
A vous d'y réfléchir...
2025 - sulfaméthazine VF
UCA
Created on September 15, 2025
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Détermination du coefficient de partage de sulfamides
Introduction
La lipophilie représente une mesure de la tendance relative d’un soluté à préférer un environnement non-aqueux à un environnement aqueux. La lipophilie d’une molécule peut se mesurer par son aptitude à se distribuer dans un système biphasique liquide-liquide. Le coefficient de partage dans le système n-octanol / eau est un des paramètres physico-chimiques quantitatifs qui reflète la lipophilie d’une substance.
Le coefficient de partage n-octanol / eau joue un rôle important dans :
leur passage à travers les membranes
la solubilité
les interactions enzyme-inhibiteur ou ligand-récepteur de nature hydrophobe
le transport
les paramètres pharmacocinétiques (ADME)
l’activité pharmacologique
la formulation
l’accumulation dans des tissus
pour certains leur fixation sur les protéines plasmatiques
la toxicité des médicaments
A ce titre, la lipophilie des molécules constitue un descripteur physico-chimique de première importance dans la conception de substances actives. Le logP est par ailleurs un des paramètres des règles de Lipinski (règle des 5) permettant d’évaluer la biodisponibilité par voie orale des médicaments.
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale
2. Etablissement de la courbe étalon 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Préparation de la solution mère : vous devez peser 15 ou 30 mg de sulfamide...
Quelles sont les bonnes pratiques pour peser ?
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A partir de la masse pesée précédemment, réaliser une solution de concentration précise à l'aide d'une fiole jaugée.
Voyons ce qu'il pourrait se passer si vous utilisez le sabot de pesée dans le mauvais sens =>
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Conséquences du scénario catastrophe
Trait de jauge très largement dépassé :volume et concentration erronés
Mauvaise solubilisation de la substance active dans la fiole
Paillasse inondée, perte de substance active (concentration erronée)
Trait de jauge
Comment préparer la solution de sulfamide dans une fiole jaugée dans de bonnes conditions...
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Points de vigilance lors de la préparation de la solution mère
récupérer la totalité de la substance active
manipuler proprement
agiter rigoureusement afin d'assurer une bonne solubilisation de la solution mère
être vigilant et rigoureux pour ajuster le trait de jauge
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale
Une fois la solution mère préparée (et sa concentration réelle déterminée), il reste à enregistrer la courbe spectrale de 220 nm à 360 nm) sur le spectrophotomètre UV. Déterminer le ou les maxima d'absorption
Réalisation de la courbe spectrale
Au niveau de sa paillasse, remplir deux cuves :
Les cuves sont remplies aux trois quarts puis essuyées sur toutes les faces.
Se déplacer vers le spectrophotomètre avec le support en plastique et les deux cuves précédemment remplies
Réalisation du "blanc" à l'aide du tampon
Appuyer sur "zero blank"
Introduire la cuve Fermer le capot
Le blanc est scanné
Choisir la cuve de tampon
Nb : si la cuve possède deux faces dépolies, mettre les faces transparentes perpendiculaires au faisceau
Scan de la solution mère
Appuyer sur "start-enter"
Introduire la cuve Fermer le capot
Choisir la cuve de solution mère
Noter λ max et la DO
Valider OK avec "start-enter", la courbe spectrale tracée
Nb : si la cuve possède deux faces dépolies, mettre les faces transparentes perpendiculaires au faisceau
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale
2. Etablissement de la courbe étalon 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 2. Etablissement de la courbe étalon
Préparer à l’aide de la solution mère A en la diluant avec de la solution tampon phtalate pH = 5.2, une série de 8 solutions étalons.
Déterminer à l’aide d’un spectrophotomètre et d'une cuve de 1 cm, les densités optiques de ces solutions à la longueur d’onde correspondant au maximum d’absorption de la substance active étudiée.
Sur un tableur, tracer la courbe de corrélation et établir l’équation de la droite.
Quelles sont les bonnes pratiques pour réaliser une dilution?
regarder la vidéo
En cas d'erreur, n'hésitez pas à consulter la ressource sur les calculs de dilutions dans la partie "méthodologies de calculs"
En cas d'erreur, n'hésitez pas à consulter la ressource sur les calculs de dilutions dans la partie "méthodologies de calculs"
Il est important de préparer les calculs de chacune des dilutions dans votre fascicule de TP
Etape 2. Etablissement de la courbe étalon
Préparer à l’aide de la solution mère A en la diluant avec de la solution tampon phtalate pH = 5.2, une série de 8 solutions étalons.
Déterminer à l’aide d’un spectrophotomètre et d'une cuve de 1 cm, les densités optiques de ces solutions à la longueur d’onde correspondant au maximum d’absorption de la substance active étudiée.
Sur un tableur, tracer la courbe de corrélation et établir l’équation de la droite.
Réalisation de la courbe étalon
Au niveau de sa paillasse, remplir deux cuves :
Les cuves sont remplies aux trois quarts puis essuyées sur toutes les faces.
Réglages préliminaires
Appuyer sur "zero blank"
Introduire le blanc
Rentrer la valeur + "start-enter"
Choisir "absorption"
Régler à la λ max
Scan d'une dilution
Appuyer sur "start - enter"
Noter l'absorbance
Introduire la dilution
Etape 2. Etablissement de la courbe étalon
Préparer à l’aide de la solution mère A en la diluant avec de la solution tampon phtalate pH = 5.2, une série de 8 solutions étalons.
Déterminer à l’aide d’un spectrophotomètre et d'une cuve de 1 cm, les densités optiques de ces solutions à la longueur d’onde correspondant au maximum d’absorption de la substance active étudiée.
Sur un tableur, tracer la courbe de corrélation et établir l’équation de la droite.
Noter bien les valeurs de la pente, de l'ordonnée à l'origine et du coefficient de corrélation.
Tracer une courbe étalon sur un tableur
Soit avec Calc sur OpenOffice Soit avec Excel sur Microsoft Office
2. Sélectionner le tableau et cliquer sur l’icône « Diagramme ».
1. Remplir le tableau avec les valeurs qui nous intéressent :
- La 1re colonne « A » correspond aux concentrations réelles. - La 2de colonne « B » correspond aux DO mesurées.
4. Cliquer avec un clic-droit sur un point de la courbe puis sélectionner : « Insérer une courbe de tendance… ».
3. Choisir « dispersion » de points puis cliquer sur « Terminer ».
6. Sélectionner le cadre dans lequel est noté l’équation de la droite. Clic droit puis : « Formater l’équation de la courbe de tendance… ».
5. Choisir « Linéaire » puis demander d’afficher l’équation et le coefficient de corrélation (R2).
7. Sélectionner « Nombre », ensuite choisissez 4 décimales puis cliquer sur « OK ».
8. Vous obtenez une droite avec son équation et son coefficient de corrélation dans le format attendu.
Le TP se décompose en 3 étapes principales :
1. Etablissement de la courbe spectrale2. Etablissement de la courbe étalon
3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Prélever 6 mL de la solution mère A dans un erlenmeyer. Après addition de 6 mL d’octanol (sous la hotte), les deux phases sont mises en contact à 20°C par agitation mécanique durant 45 minutes dans l'erlen bouché.
Sous la hotte
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Agitateur mécanique
Testez-vous
Préparer ces calculs avant le TP
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Prélever la phase aqueuse puis la centrifuger à 3000 tours/minute pendant 15 minutes.
Testez-vous
Centrifugeuse
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Phase aqueuse
Autre exercice
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Mesurer au spectrophotomètre l’absorbance de la solution aqueuse tamponnée.
Calculer la concentration du composé dissout dans la solution aqueuse tamponnée en se référant à la courbe étalon : [C] solution aqueuse
Calculer la concentration du composé dissout dans l’octanol : [C] octanol Quelle formule utiliser ?
Préparer ces calculs avant le TP
Etape 3. Détermination du log P apparent de façon expérimentale
Calculer le log P app : [C] octanolLog Papp = Log [C] solution aqueuse
Préparer ces calculs avant le TP
Compte rendu
Dans votre compte-rendu de TP, il vous est demandé de classer les trois sulfamides par lipophilie croissante d'après leurs structures chimiques.
A vous d'y réfléchir...