Microbiología clínica
Ana Palomo2ºB/Laboratorio Clínico y Biomédico
Índice
Aislamiento y cultivo
Introducción
Manifestaciones clínicas
Esterilidad e incubación
Identificación
Medidas de seguridad
Descripción
Métodos
Fisiopatología
Gracias
Introducción
La peste bubónica es una enfermedad infecciosa causada por Yersinia pestis, una bacteria con un impacto devastador en la historia de la humanidad. Transmitida principalmente por la picadura de pulgas infectadas, ha sido responsable de pandemias mortales, como la Peste Negra en el siglo XIV. A pesar de los avances médicos, esta enfermedad sigue presente en algunas regiones del mundo, lo que la convierte en un tema de gran relevancia en microbiología clínica.
Manifestaciones clínicas
Los síntomas de la peste bubónica aparecen entre 2 y 6 días después de la infección. La característica más distintiva es la inflamación de los ganglios linfáticos, conocidos como bubones, que se presentan en la ingle, axilas o cuello. Los pacientes también experimentan fiebre alta, escalofríos, fatiga extrema y dolor de cabeza. En algunos casos, la enfermedad puede progresar y derivar en formas más graves, como la peste septicémica, en la que la bacteria invade el torrente sanguíneo causando necrosis en las extremidades, o la peste neumónica, altamente contagiosa y potencialmente letal si no se trata a tiempo.
Fisiopatología de la enfermedad
La infección inicia cuando la bacteria es introducida en el organismo a través de la picadura de una pulga infectada. Una vez en el cuerpo, Yersinia pestis es fagocitada por macrófagos, pero sobrevive dentro de ellos y se multiplica. Luego, se disemina a través del sistema linfático, generando una inflamación severa de los ganglios. Si la bacteria ingresa al torrente sanguíneo, se desarrolla la peste septicémica, y si llega a los pulmones, se produce la peste neumónica, la cual puede ser transmitida por vía aérea.
MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Dado su alto nivel de virulencia, Yersinia pestis es considerada un patógeno de riesgo biológico 3, lo que significa que su manipulación requiere estrictas medidas de bioseguridad. Su estudio debe realizarse en laboratorios con nivel de bioseguridad BSL-3, donde se implementan protocolos como el uso de guantes dobles, mascarillas N95, gafas protectoras y trajes impermeables. Además, es crucial la desinfección constante con hipoclorito de sodio o etanol al 70% y la eliminación adecuada de residuos mediante autoclaves a más de 121°C.
Descripción del microorganismo
Yersinia pestis es un cocobacilo Gram negativo perteneciente a la familia Yersiniaceae, dentro del filo Proteobacteria. Se distingue por su tinción bipolar, lo que le da un aspecto de “alfiler de seguridad” al ser observado en el microscopio. Esta bacteria puede crecer tanto en condiciones aeróbicas como anaeróbicas facultativas y posee una cápsula que le permite evadir la respuesta inmunológica del huésped, lo que contribuye a su alta letalidad.
Aislamiento y cultivo
El diagnóstico de la peste bubónica se realiza mediante la toma de muestras de ganglios linfáticos, sangre o esputo, dependiendo de la forma clínica de la enfermedad. Estas muestras se cultivan en medios específicos como el agar cisteína-telurito, el agar sangre y el caldo BHI. En estas condiciones, Yersinia pestis desarrolla colonias pequeñas, opacas y con bordes irregulares, con un crecimiento óptimo a temperaturas entre 28-30°C.
Esterilidad e incubación
Para garantizar la fiabilidad de los resultados en microbiología, es fundamental mantener condiciones estrictas de esterilidad en el laboratorio. Esto implica:
- Uso de técnicas asépticas para evitar la contaminación cruzada.
- Esterilización de materiales con autoclave a 121°C y 15 psi de presión durante al menos 15-20 minutos.
- Desinfección de superficies con alcohol al 70% o hipoclorito de sodio.
Además, la incubación de cultivos es un paso crucial para el crecimiento y estudio de microorganismos. En el caso de Yersinia pestis:
- Se incuba a temperaturas óptimas de 28-30°C, ya que no crece bien a 37°C.
- Los cultivos deben mantenerse en condiciones de seguridad biológica estricta para evitar el riesgo de propagación del patógeno.
El cumplimiento de estos protocolos asegura la validez de los diagnósticos microbiológicos y minimiza los riesgos en el manejo de microorganismos peligrosos.
Identificación en el laboratorio
Para confirmar la presencia de Yersinia pestis, se realizan diferentes pruebas bioquímicas y tintóreas. Entre las pruebas bioquímicas destacan:
- Oxidasa negativa, lo que permite diferenciarla de Pseudomonas.
- Ureasa negativa, útil para distinguirla de Y. enterocolitica.
- No fermenta lactosa en agar MacConkey.
- Inmóvil a 37°C.
En cuanto a las pruebas tintóreas:
- La tinción de Gram revela su morfología de bacilo Gram negativo.
- La tinción de Wayson permite observar su tinción bipolar característica.
Métodos moleculares e inmunológicos
Además del cultivo y las pruebas bioquímicas, se emplean técnicas avanzadas para la identificación de Yersinia pestis:- PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa): Detecta genes específicos como pla y caf1, relacionados con la virulencia de la bacteria.
- ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay): Permite la detección de anticuerpos contra Y. pestis en muestras de suero.
- Pruebas inmunocromatográficas: Métodos rápidos utilizados para detectar antígenos específicos de la bacteria.
¡Gracias por su atención!
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Microbiología Clínica: Yersinia pestis
Ana
Created on March 9, 2025
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Transcript
Microbiología clínica
Ana Palomo2ºB/Laboratorio Clínico y Biomédico
Índice
Aislamiento y cultivo
Introducción
Manifestaciones clínicas
Esterilidad e incubación
Identificación
Medidas de seguridad
Descripción
Métodos
Fisiopatología
Gracias
Introducción
La peste bubónica es una enfermedad infecciosa causada por Yersinia pestis, una bacteria con un impacto devastador en la historia de la humanidad. Transmitida principalmente por la picadura de pulgas infectadas, ha sido responsable de pandemias mortales, como la Peste Negra en el siglo XIV. A pesar de los avances médicos, esta enfermedad sigue presente en algunas regiones del mundo, lo que la convierte en un tema de gran relevancia en microbiología clínica.
Manifestaciones clínicas
Los síntomas de la peste bubónica aparecen entre 2 y 6 días después de la infección. La característica más distintiva es la inflamación de los ganglios linfáticos, conocidos como bubones, que se presentan en la ingle, axilas o cuello. Los pacientes también experimentan fiebre alta, escalofríos, fatiga extrema y dolor de cabeza. En algunos casos, la enfermedad puede progresar y derivar en formas más graves, como la peste septicémica, en la que la bacteria invade el torrente sanguíneo causando necrosis en las extremidades, o la peste neumónica, altamente contagiosa y potencialmente letal si no se trata a tiempo.
Fisiopatología de la enfermedad
La infección inicia cuando la bacteria es introducida en el organismo a través de la picadura de una pulga infectada. Una vez en el cuerpo, Yersinia pestis es fagocitada por macrófagos, pero sobrevive dentro de ellos y se multiplica. Luego, se disemina a través del sistema linfático, generando una inflamación severa de los ganglios. Si la bacteria ingresa al torrente sanguíneo, se desarrolla la peste septicémica, y si llega a los pulmones, se produce la peste neumónica, la cual puede ser transmitida por vía aérea.
MEDIDAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Dado su alto nivel de virulencia, Yersinia pestis es considerada un patógeno de riesgo biológico 3, lo que significa que su manipulación requiere estrictas medidas de bioseguridad. Su estudio debe realizarse en laboratorios con nivel de bioseguridad BSL-3, donde se implementan protocolos como el uso de guantes dobles, mascarillas N95, gafas protectoras y trajes impermeables. Además, es crucial la desinfección constante con hipoclorito de sodio o etanol al 70% y la eliminación adecuada de residuos mediante autoclaves a más de 121°C.
Descripción del microorganismo
Yersinia pestis es un cocobacilo Gram negativo perteneciente a la familia Yersiniaceae, dentro del filo Proteobacteria. Se distingue por su tinción bipolar, lo que le da un aspecto de “alfiler de seguridad” al ser observado en el microscopio. Esta bacteria puede crecer tanto en condiciones aeróbicas como anaeróbicas facultativas y posee una cápsula que le permite evadir la respuesta inmunológica del huésped, lo que contribuye a su alta letalidad.
Aislamiento y cultivo
El diagnóstico de la peste bubónica se realiza mediante la toma de muestras de ganglios linfáticos, sangre o esputo, dependiendo de la forma clínica de la enfermedad. Estas muestras se cultivan en medios específicos como el agar cisteína-telurito, el agar sangre y el caldo BHI. En estas condiciones, Yersinia pestis desarrolla colonias pequeñas, opacas y con bordes irregulares, con un crecimiento óptimo a temperaturas entre 28-30°C.
Esterilidad e incubación
Para garantizar la fiabilidad de los resultados en microbiología, es fundamental mantener condiciones estrictas de esterilidad en el laboratorio. Esto implica:
- Uso de técnicas asépticas para evitar la contaminación cruzada.
- Esterilización de materiales con autoclave a 121°C y 15 psi de presión durante al menos 15-20 minutos.
- Desinfección de superficies con alcohol al 70% o hipoclorito de sodio.
Además, la incubación de cultivos es un paso crucial para el crecimiento y estudio de microorganismos. En el caso de Yersinia pestis:- Se incuba a temperaturas óptimas de 28-30°C, ya que no crece bien a 37°C.
- Los cultivos deben mantenerse en condiciones de seguridad biológica estricta para evitar el riesgo de propagación del patógeno.
El cumplimiento de estos protocolos asegura la validez de los diagnósticos microbiológicos y minimiza los riesgos en el manejo de microorganismos peligrosos.Identificación en el laboratorio
Para confirmar la presencia de Yersinia pestis, se realizan diferentes pruebas bioquímicas y tintóreas. Entre las pruebas bioquímicas destacan:
- Oxidasa negativa, lo que permite diferenciarla de Pseudomonas.
- Ureasa negativa, útil para distinguirla de Y. enterocolitica.
- No fermenta lactosa en agar MacConkey.
- Inmóvil a 37°C.
En cuanto a las pruebas tintóreas:Métodos moleculares e inmunológicos
Además del cultivo y las pruebas bioquímicas, se emplean técnicas avanzadas para la identificación de Yersinia pestis:- PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa): Detecta genes específicos como pla y caf1, relacionados con la virulencia de la bacteria.
- ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay): Permite la detección de anticuerpos contra Y. pestis en muestras de suero.
- Pruebas inmunocromatográficas: Métodos rápidos utilizados para detectar antígenos específicos de la bacteria.
¡Gracias por su atención!
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