terreni di coltura

terreni di coltura

Cika Adlin, Bertolasi Michela

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INDICE

tipologie di terreni

cosa sono?

esperienza in classe

approfondimento colonie

usi e funzioni

preparazione

sitografia

procedura post preparazione

ingredienti

tipologie di semina

cenni storici

procedura post semina

tecniche di analisi

COsa sono?

I terreni di coltura sono delle soluzioni che possono essere solide o liquide e rappresentano l'ambiente ideale per la crescita batterica perchè presentano le condizioni per una corretta proliferazione di cellule eucariote e procariote.

USI e funzioni

I terreni di coltura sono impiegati in laboratorio per la coltivazione di batteri, prima della semina devono essere sterili e durante tutto lo svolgimento delle attività non devono entrare in contatto con i batteri dell'aria circostante.

si usano per:

INGREDIENTI

Per la realizzazione dei terreni di coltura occorre avere l’agar che viene utilizzato come gelificante, viene scelto perché non contiene sostanze nutritive e di conseguenza non può essere digerito dai microrganismi. I terreni liquidi invece sono composti da un brodo.

cenni storici

1860

Louis Pasteur

1881

Robert Koch

1819

Serratia Mercensces

TECNICHE DI ANALISI

Le tecniche di coltura permettono di depositare un campione di batteri su un terreno di coltura. La tecnica dipende dal tipo di coltura che si vuole ottenere. Le tecniche principali sono:

per striscio

per inclusione

per spatolamento

a becco di clarino

per infissione

tipologie di terreni e la loro applicazione

Terreni generici

Sono terreni senza additivi

Terreni per arricchimento

Vengono arricchiti con sostanze in grado di favorire la proliferazione solo di alcune specie batteriche

tipologie di terreni e la loro applicazione

Terreni selettivi

Favoriscono la crescita solo di alcune specie batteriche

Terreni differenziali

Contengono sostanze indicatrici di reazioni biochimiche

preparazione

Pesata dell'Agar

Solubilizzazionee controllo del pH

Distribuzione nei recipienti (provette)

Sterilizzazione in autoclave

procedure post preparazione

Distribuzione in piastra Petri

Semina dopo la diluizione del campione

Solidificazione del terreno di coltura

tipologie di semina dei terreni di coltura

Semina per striscio

Permette di semplificare l'identificazione del patogeno

Semina per inclusione

Preserva la biodiversità del campione

tipologie di semina dei terreni di coltura

Semina per spatolamento

Prevede l'isolamento dei batteri da un campione del terreno

Semina per infissione

Prevede l'isolamento dei microrganismi da un campione di sangue

Semina a becco di clarino

Prevede l'isolamento di un batterio da un campione di pelle infetta

procedure post semina

Tempo di incubazione

Controllo di sterilità con un campione in bianco

Crescita delle colonie batteriche

Conta delle colonie

esperienza in classe

Uno dei primi terreni di coltura che abbiamo preparato e seminato in laboratorio è il terreno PCA ( plate count agar). Il PCA è un terreno generico. Abbiamo eseguito una proporzione per verificare quanto Agar pesare, l'abbiamo pesato e abbiamo preparato il terreno, successivamente messo in quantità uguali in 5 provette. I terrenni sono stati sterilizzati in autoclave e successivamente sono stati trasferiti in 5 piastre Petri. Poi abbiamo preparato per diluizione i vari campioni per la semina in alcune provette, abbiamo svolto la semina in piastra e abbiamo lasciato crescere le colonie batteriche e infine le abbiamo contate.

Sono generate da una cellula madre e hanno una dimensione compresa tra 1 e 10 mm

LE COLONIE BATTERICHE Le colonie batteriche possono avere caratteristiche e forme diverse in base alla specie a cui appartengono

sitografia

https://www.microbiologiaitalia.it/terreni-di-coltura/terreni-coltura/

https://www.microbiologiaitalia.it/batteriologia/serratia-marcescens/

https://it.wikipedia.org/wiki/Terreno_di_coltura#:~:text=conta%20batterica%20totale.-,Terreni%20elettivi%20o%20arricchiti,un%20punto%20di%20vista%20nutritivo.

https://www.labxchange.org/library/items/lb:LabXchange:950e7a04:html:1#:~:text=I%20terreni%20selettivi%20possono%20anche,coli%20non%20pu%C3%B2.

https://theory.labster.com/it/differential-selective-media/

https://www.ispezioneperugia.it/uni/oldstuff/micro/esercitazioni-iii-anno-2.pdf

https://www.microbiologiaitalia.it/terreni-di-coltura/terreni-coltura/#:~:text=Storia%20e%20nascita%20dei%20terreni,in%20atmosfera%20calda%20e%20umida.

Grazie per l'attenzione

Serratia Marcescens

Battero scoperto nel 1819 , si manifesta con delel colonie rosse (pigmento=prodigiosina) sul pane quando questo si trova in un'atmosfera calda e umida .Fu una scoperta importante, poiché questo betterio gram negativo è responsabile di molte infezioni nosocomiali