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Dr. Lester Mercado Lugo Laboratorio de Inmunologia

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Actividad Enzimatica plus

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Comparte tus datos y compara los resultados obtenidos en el laboratorio

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Crea una grafica de linea con los resultados de la espectrofometria absornacia ?? VS concetracion de la sangre 2.5 ml

• Donde hubo el grado mayor grado de absorbancia segun el largo de onda utilizado
• Donde hubo el grado de menor absorbancia segun el largo de onda utilizado
• Donde hubo mayor indice de absorcion y como se traduce ello con el indice de inmunocomplejos.
• Donde hubo menor indice de absorcion y como se traduce ello con el indice de inmunocomplejos.

Materiales: 1. guantes 2. sangre 3. tincion Wright 4. microscopio 5. gradillas 6.cuvetas 7. papel de limpiar cuvetas 8. espectrofotometro 9. pipetas Pasteur 10. detergente antiseptico 11. solucion salina 12. zafacon" sharp container" 13. solucion salina 14. vasos decker 15. receptaculo de desperdicios 16. bandejas de tincion 17. laminillas

Objetivos: 1. Simular el proceso de fagocitosis para comprender la dinamica. 2. Observar particulas fagocitadas mediante tecnicas simples de laboratorio, tincion y vision campo microscopico y espectrofotometria. 3. Analizar la importancia de la fagocitosis en la respuesta inmmuitiaria ante respuestas extranas.

Pasos del experimento1. Previa asepsia y antisepcia de la mesa de trabajo 2. Coloquese los guantes 3. Ordenar los materiales en la mesa. 4. Encender el espectrofotometro 5. Encender el microscopio y colocarlo en posicion de vision. 6. Colocar el tubo de sangre periferica en la gradilla 7. Anadir 1.5 gr aprx de carbon activado en el tubo de sangre periferica. 8. Colocar el tapon y mantener en movimineto y en calor por 30 minutos a temperatura ambiente 37 C. ( entre los estudiantes pasarse el tubo de sangre hasta completar el ciclo por cronometro) 9. Etiquete con un sharpie negro permanente su laminilla 10. Limpie la laminilla a utilizar 9. Una vez cuplido los 30 minutos, extraer una cantidad de sangre con la pipeta pasteur y coloque una gota un extremo de la laminilla y realize un frotis o extendido de la sangre periferica. 10. Dejar secar la laminilla con el extendido por 15 minutos. 11. Tenir con Wright la laminilla en haciendo uso de la bandeja de tincion en tina la zona del frotis por 1 minutos, luego del minuto anada agua destilada y deje por 4 minutos adicionales. Trancrurrido los 4 minutos remueva exceso de tinte. 12. Deje secar por 5 minutos. 13. Luego leve al microscopio a: 4 X, 10 X y 40 X tome fotos de las magnificaciones e idientifque complejos antigeno anticuerpo con el carbon activado. 14. Cuente y anote en su cuaderno el aproximado de globulos rojos, blancos, plaquetas y complejos imunologicos Ab-Ag. 15. Coloque 4 cc de la agua destilada y calibre el espectrofotometro a Largo de onda de 414 nm 16. Luego proceda colocar una cuveta con la sangre que se le anadio el carbon activado y determine su absorbancia en 514, 614 y 714. 17- Luego repita con 4 cc de una cuveta de sangre perferica que no tiene carbon activo y detemrine su abdorbancia en largo de onda de 400 nm.

Introduccion: La fagocitosis es un mecanismos esencial de la inmunidad innata donde las celulas como los macrofagos y neutrofilos engullen y destruyen micrognamsismo y particulas extranas a su entorno. Este exprimento solumara este proceso usando el carbon activado que estimulara la respura antigeno anticuerpo en el ser humano