V de Gowin

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Procedimento: (Página 18 do manual)1. Pese cerca de 50g de banana e corte-a em pedaços; 2. Deite os pedaços num almofariz e macer-os bem; 3. Misture 3g de sal de cozinha (NaCl) com 90ml de água destilada, aquecida a 60ºC, para preparar uma solução de NaCl; 4. Adicione 10ml de detergente à solução de NaCl e mexa com a vareta lentamente; 5. Adicione a banana macerada à solução obtida na etapa 4 e envolva com a vareta durante alguns minutos; 6. Coloque o algodão num funil e filtre para um gobelé o preparado da etapa 5; 7. Meça 20ml do preparado para um tubo de ensaio ou para uma proveta; 8. Usando uma vareta, adicione muito lentamente cerca de 20ml de álcool frio. Deverá observar-se que se forma uma fase alcoólica sobre uma fase aquosa; 9. Deixe repousar 5 minutos; 10. Observe e registe, em vídeos ou fotografias as alterações de posição do agregado molecular; 11. Contrua o relatório V de Gowin.

Observação macroscópica de aglomerados de DNA das células eucarióticas vegetais da banana, numa preparação que contém uma solução de água destilada com NaCl, detergente da loiça e álcool etílico. O DNA aparece como filamentos esbranquiçados que ascendem no álcool, devido à formação de bolhas de ar (choque térmico).

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Juízos de valor: A olho nu não é possível observar-se a estrutura do DNA.

Acontecimento/Objeto: Pretende-se extrair o DNA das células eucarióticas vegetais de uma banana madura

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Teoria: Ácidos nucleicos (estudo do DNA e da síntese proteica)

Escola Secundária Mário Sacramento

Material: -1 banana -Sal de cozinha -Detergente liquído da loiça -Vareta -Balança -Faca -Água destilada -Provetas graduadas -Álcool etílico a 96% a 4ºC -Gobelés -Algodão -Tubo de ensaio -Funil

Registos:

Conclusões: É possível extrair e observar o DNA. Conclui-se que o DNA está no núcleo e que para o libertar é necessário quebrar a parede celular (através da maceração da banana) e membrana celular e membrana nuclear (através da adição de detergente da loiça que emulsiona os lípidos que constituem estas membranas). Conclui-se também que a adição de sal faz com que a molécula de DNA fique estável e que a adição de álcool faz com que o DNA precipite, pois o DNA é insolúvel no álcool. As moléculas de DNA ascendem no álcool devido às bolhas de ar que se formam devido ao choque térmico.

Conceitos: Células eucarióticas vegetais; DNA; membrana plasmática, perede celular, lípidos, núcleo e invólucro nuclear, nucleótidos e sua constituição, histonas

Princípios: O DNA é uma molécula que contém a informação genética responsável por coordenar o desenvolvimento e funcionamento dos seres vivos. Este encontra-se principalmente armazenado no núcleo das células eucarióticas, sendo, por isso, envolvido pelo invólucro nuclear, uma membrana que delimita o núcleo e que é de natureza lipídica. Desta forma, o detergente liquído que é utilizado serve para emulsionar os lipídos que constituem o invólucro nuclear e a membrana plasmática (estrutura que delimita as células). Para além das membranas, as células eucarióticas vegetais são também envolvidas pela parede celular que confere suporte e rigidez a estas células. Desta forma, a maceração, um processo físico, serve para destruir a parede celular. Sobre a constituição do DNA, este é uma molécula de dupla hélice constituída por duas cadeias polinucleótidicas antiparalelas e cada monómero destas cadeias designa-se de nucleótido. Cada nucleótido é composto por uma pentose (desoxirribose), uma base nitrogenada e um grupo fosfato. E, para além destas características, nas células eucarióticas o DNA está associado a proteínas, como os histonas, que apresentam carga positivas. Assim sendo, a carga positiva dos histonas estabiliza as cargas negativas dos grupos fosfatos, presentes nos nucleótidos. Ou seja, o sal, vai permitir manter as proteínas dissolvidas na solução de forma a que estas não precipitem com o DNA. Adicionalmente, o ião Na+ do sal, ao apresentar carga positiva, interage com o grupo fosfato da molécula de DNA, tornando esta molécula estável. Por fim, nesta atividade laboratorial, utiliza-se também o álcool a 4ºC para promover a precipitação do DNA, uma vez que o álcool é insolúvel à solução com o DNA, permitindo a ascensão do DNA.

Como extrair e visualizar macroscopicamente DNA de células eucarióticas vegetais?

Questão-problema

Ala Metodológica

Ala Conceptual

DNA em células vegetais