Infografía tinción
Daniela Cárdenas
Created on September 29, 2024
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Transcript
Valoración de dos métodos de tinción en ensayos de citotoxicidad sobre líneas celulares tumorales
Comparar dos métodos de tinción celular, sulforodamina B (SRB) y resazurina, evaluando la efectividad de ambos métodos en detectar la citotoxicidad de tres compuestos sintéticos y doxorrubicina HCl en tres líneas celulares tumorales (SiHa, MCF-7 y MKN-45).
OBJETIVO
Tinción con Sulforodamina B (SRB)
MÉTODOs usados
MI EXPLICACIÓN
Tinción de Resazurina
Se investigo cómo medir la citotoxicidad en células cancerígenas. Para ello, se compararon dos métodos de tinción celular: Sulforodamina B (SRB) y Resazurina.Se queria saber si estos métodos eran efectivos para detectar el daño en las células causado por ciertas sustancias.Se usaron tres tipos de células cancerígenas (SiHa, MCF-7 y MKN-45) y se aplicaron tres compuestos sintéticos y un medicamento contra el cáncer llamado Doxorrubicina ...
importancia de estos métodos de tinción
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Escobar M, L., Alfonso R, P. A., & Aristizábal G, F. A. (2009). Valoración de dos métodos de tinción en ensayos de citotoxicidad sobre líneas celulares tumorales. Revista colombiana de biotecnologia artículo, 11(2), 49–56.
1. Se adicionó ácido tricloroacético (TCA) al 10% para fijar las células. 2. Se lavó con agua y se secó. 3. Se adicionó SRB al 0,4% en ácido acético. 4. Se incubó 10 minutos. 5. Se lavó con ácido acético al 1%. 6. Se adicionó solución de TRIS base 10 mM, pH 10,5. 7. Se leyó la absorbancia a 570 nm.
1. Se adicionó resazurina (4,4 µM) en medio MEM sin suplementar. 2. Se incubó 4 horas en condiciones estándar. 3. Se leyó la fluorescencia a 535 nm (excitación) y 595 nm (emisión).
Evalúan la citotoxicidad de sustancias en células cancerígenas. Identifican compuestos potencialmente efectivos contra el cáncer. Facilitan la investigación de nuevos fármacos y tratamientos. Proporcionan información valiosa sobre la respuesta celular a diferentes sustancias.
Después de tratar las células con estas sustancias, se utilizaron los métodos de tinción SRB y Resazurina para medir la cantidad de células vivas. Los resultados mostraron que ambos métodos funcionaron bien y dieron resultados similares. Sin embargo, se encontro que el método de Resazurina es un poco más sensible y fiable que el SRB. Lo que significa que el método de Resazurina puede ser mejor para detectar pequeños cambios en la cantidad de células vivas.