Laboratorio nivel de bioseguridad 2 (BSL2)

Lavado y descontaminación (Tarjas)

Área de balanzas

Acceso

Mesas de trabajo

BSL-2: Cabinas de seguridad biológica clase II

Equipo de protección personal

Pictogramas y señalamientos

Regadera de emergencia

Extintor

Lavaojos

Análisis y microscopía

Almacenamiento de muestras

Cultivo de hongos

Almacenamiento de reactivos

Almacenamiento de cristaleria y equipos

Autoclave para residuos

Residuos (etiquetados)

Material creado por:

• Fragoso Medina Sebastián
• González Medina María Fernanda
• Martínez Mendoza Eric

Estudiantes de la licenciatura Químico Farmacéutico Biólogo.

El almacenaminto de todas las sustancias químicas debe ser con mucho cuidado, deben estar bien etiquetadas y sobre todo, bajo llave para que únicamente el personal capacitado pueda disponer de estos reactivos.El etiquetamiento de las sustancias, debe ser el correcto e indicar con pictogramas de seguridad, así como también, hacer uso del EPP y reducir la probabilidad de un accidente.

Almacén de sustancias

• Pictogramas de peligro.
• Pictogramas de prohibición.
• Pictogramas de información.
• Pictogramas de obligación.

Este tipo de información es indispensable dentro de un laboratorio, ya que permiten un correcto manejo de sustancias, un lugar seguro en el cual trabajar y señala la forma correcta de hacerlo.Estos símbolos llamados pictogramas, los podemos clasificar en 4 grupos de interés.

Pictogramas y señalamientos

CODITEQ. (s/f). Pictogramas de seguridad - Significado y usos en el sistema globalmente armonizado. Codificación y etiquetado (CODITEQ). Recuperado el 1 de septiembre de 2024. https://www.coditeq.com.co/pictogramas-de-seguridad/

Análisis y microscopía

- Usar equipo de protección personal completo.- Asegurar que el microscopio esté preparado y desinfectado dentro de la cabina.- Obtener la muestra en la cabina de seguridad.- Colocar la muestra en un portaobjetos con solución de KOH o tinta china y cubrirla con un cubreobjetos.- Registrar resultados- Desinfectar el microscopio y superficies después del uso, eliminar portaobjetos u otros residuos en un contenedor de desechos biológicos, seguido de autoclave., retirar/desechar el EPP, luego lavar manos y áreas expuestas.También se le pueden hacer pruebas bioquímicas, genéticas, de sensibilidad, PCR y secuenciación o de diagnóstico para identificación/estudio de Mucorales y Aspergillus spp.

Universidad Miguel Hernández. (2023, 4 febrero). Staining for fungi. MicroWeb UMH. https://docenciamicrobiologia.umh.es/en/indice-de-practicas/8-observacion-microscopica/tinciones-para-hongos/

El uso de las sustancias peligrosas dentro de un laboratorio, constituye un riesgo para todo aquel involucrado dentro del laboratorio.Como parte de las medidas de higiene y seguridad se debe contar dentro de este mismo con la instalación de una regadera de emergencias, lo cual se ocupará únicamente en casos de proyecciones, salpicaduras o derrames que tengan contacto con la piel o haya probabilidad de una lesión por quemadura química o riesgo de contaminación

Duchas de emergencia

Facultad de ingenieria. (2018). Guía de uso de duchas de seguridad y lavaojos. Universidad Nacional del Litoral. Recuperado el 1 de septiembre de 2024. https://www.fiq.unl.edu.ar/institucional/wp-content/uploads/sites/3/2018/11/Gui%CC%81a-de-uso.pdf

El manejo seguro de cultivos y muestras de hongos, especialmente de Mucorales y Aspergillus spp, implica seguir una serie de procedimientos para evitar contaminación y garantizar la precisión en la identificación. A continuación, se presentan los pasos clave para el manejo seguro:

Cultivo de hongos

Ortega, M. y Rodríguez, M. (2019). Manual de Prácticas del Laboratorio del curso de “BIOLOGÍA DE HONGOS”. Universidad Autónoma de San Luis Potosí. Facultad de Ciencias. http://www.fc.uaslp.mx/academicos/material-didactico/MANUALDELABORATORIOBIOLOGIADEHONGOS.pdf

1. Preparación del Laboratorio Esterilidad: Asegurarse de que todo el equipo y los materiales sean estériles como los instrumentos (autoclave), superficies y a la hora de realizar el cultivo. Mantener un laboratorio limpio es indispensable para eliminar cualquier residuo con sustancias desinfectantes adecuadas como toallas de cloro o solución antiséptica.

2. Manipulación de Muestras: Aislar las muestras en un entorno estéril utilizando técnicas como la inoculación de muestras en medios de cultivo, asegurándote de que no haya contaminación bacteriana. Para evitar el crecimiento de bacterias contaminantes, puedes añadir antibióticos como cloranfenicol y ampicilina al medio de cultivo.

3. Condiciones Óptimas: Se requiere una incubadora para el crecimiento de cultivos con ciertas condiciones que lo favorezcan

• Temperatura: Generalmente, los Mucorales y Aspergillus spp, crecen mejor a temperaturas entre 25°C y 30°C, aunque algunas especies pueden tolerar temperaturas más altas.
• Humedad: Prefieren ambientes húmedos, lo que favorece la producción de esporas y su dispersión.
• pH: Un pH ligeramente ácido a neutro (6-7) es ideal para su crecimiento.

Los Mucorales crecen bien en agar Sabouraud, mientras que Aspergillus spp. se desarrollan mejor en agar Czapek, aunque ambos pueden crecer en otros medios como el agar PDA (Potato Dextrosa Agar).

a. Extintor de CO₂ (dióxido de carbono): Es adecuado para incendios de clases B y C (líquidos inflamables y equipos eléctricos).Consideraciones: No es eficaz para fuegos de materiales sólidos (clase A), por lo que podría necesitarse un extintor adicional para ciertos tipos de fuego.b. Extintor ABC (polvo químico seco): Eficaz para incendios de clase A (materiales combustibles sólidos), B (líquidos inflamables) y C (equipos eléctricos).Consideraciones: Deja residuos de polvo, que pueden requerir una limpieza extensa y desinfección posterior en un laboratorio BSL-3.

Extintor

Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. (2018). Seguridad en laboratorios químicos. UDG. http://www.cucba.udg.mx/sites/default/files/proteccioncivil/manuales/Seguridad%20en%20los%20laboratorios%20y%20botiquin.pdf

• CLASIFICACIÓN CRETIB

"CRETIB se refiere a los desechos de carácter corrosivo, reactivo, explosivo, tóxico, inflamable y biológico-infeccioso" (Lifeder, 2021).

• CLASIFICACION RPBI

"RPBI son las siglas que se dan en México a los Residuos Peligroso Biológico-Infeccioso" (Raffino, 2021).

Clasificación, etiquetado y disposición de residuos

• Raffino, Equipo editorial, Etecé (5 de agosto de 2021). RPBI. Enciclopedia Concepto. Recuperado el 31 de agosto de 2024 de https://concepto.de/rpbi/.
• Lifeder. (30 de junio de 2021). CRETIB (residuos). Recuperado el 1 de septiembre de 2024. https://www.lifeder.com/cretib-residuos/.

ETIQUETADO:Etiquetar los residuos con información clara, incluyendo el nombre del paciente, la fecha en que se generó, el tipo de residuo y cualquier otro dato relevante.

Procedimientos de eliminación segura

Procedimientos de eliminación segura

Las tarjas son un elemento que permite mantener limpio y desinfectado el material, lavarse las manos en caso de un posible contacto con algún agente biológico-infeccioso o simplemente por buenas prácticas de laboratorio.

Tarjas

EPIS/Prevención de Riesgo Laborales. (2022). Lavaojos de emergencia, parte clave del kit de primeros auxilios para protección ocular. ProtecciónLaboral.com. Recuperado el 1 de septiembre de 2024. https://www.masproteccionlaboral.com/blog/lavaojos-de-emergencia.html

Los accesos controlados se requieren cuando sólo cierta población puede tener acceso a un área, en este caso al laboratorio sólo se requiere y se le permite la entrada a personal capacitado en cuestiones de bioseguridad y para el manejo hongos filamentosos patógenos como Mucorales y Aspergillus spp.También se requiere que el ingreso sea con el EPP correspondiente, las instrucciones del trabajo a realizar para cuidar la esterilidad del área de trabajo y un mejor resultado.

Puertas de acceso controlado

Consulting Tech Solutions. (2024). Protege tus investigaciones: Todo lo que necesitas saber sobre controles de acceso en laboratorios. Consulting Tech Solutions. Recuperado el 1 septiembre de 2024. https://consultingcts.com/controles-de-acceso-en-laboratorios/

• Tarjetas de acceso.
• Lectores biométricos.
• Códgos PIN.

Algunos tipos de controles de acceso pueden ser:

Utiliza contenedores resistentes y a prueba de fugas, como frascos de vidrio con tapa de rosca o tubos de ensayo con tapa de sellado hermético.Etiqueta claramente los contenedores con el nombre del patógeno, fecha de almacenamiento y cualquier otra información relevante de seguridad.

Condiciones de almacenamiento

Gómez, M. T. M., & Lletí, M. S. (2021). Mucormicosis: perspectiva de manejo actual y de futuro. Revista Iberoamericana de Micología, 38(2), 91-100. https://doi.org/10.1016/j.riam.2021.04.003

• Previo a su uso, verificar la nivelación, estabilidad y limpieza de la balanza.
• Dejar calentar la balanza después de encender.
• Vertir la sustancia que se está pesando fuera de la balanza en un material que tenga ese fin (cápsulas, charolas, etc.) y registrar el peso.

Es un área del laboratorio que su acceso necesita ser regulado, pues las balanzas analíticas necesitan ciertas condiciones estandarizadas para un óptimo pesado. De preferencia, éste lugar debe estar aislado, si existen ventnas, deben estar cerradas y evitar entrar o salir del área mientras se está pesando alguna sustancia.

Zona de pesado de sustancias

Área de balanzas

Importante: No exceder el límite máximo de pesado de una balanza.

Mettler-Toledo. (s/f). El ABC de la pesada. Good Weighing Practice (GWP). Recuperado el 1 de septiembre de 2024. https://amyd.quimica.unam.mx/pluginfile.php/3329/mod_resource/content/0/Uso%20y%20manejo%20de%20balanza%20anal%C3%ADtica.pdf

-Guantes de protección frente a microorganismos y de cierta resistencia mecánica en caso de contacto o manipulación de materiales potencialmente infecciosos. -Mascarillas autofiltrantes tipo FFP2, preferiblemente FFP3 para operaciones en las que se genere gran cantidad de bioaerosoles. -Gafas de protección de montura universal.

Equipo de Protección Personal (EPP)

Insst. (s. f.). Aspergillus spp. Portal INSST. https://www.insst.es/agentes-biologicos-basebio/hongos/aspergillus-spp

Se necesitan espacios sanitizados y acordes al trabajo que se va a realizar, por ello, las mesas de trabajo requieren algunas instalaciones tanto eléctricas como de plomeria (agua, gas, etc.) y otras características:

Mesas de trabajo e instalaciones

EMILAB. (2023). Mesas de laboratorio: ¡Todo lo que necesitas saber!. EMILAB. Recuperado el 1 de septiembre de 2024. https://emilab.com.mx/mesas-de-laboratorio-todo-lo-que-necesitas-saber/

• Necesita ser resistente a productos químicos y abrasivos.
• Deben ser funcionales y tener sus respectivas tomas de aire.

El lavaojos por su parte, nos permite tener una primer respuesta ante algún accidente que pueda ocurrir. Este equipo se comporta como parte de los primeros auxilios, permitiendo retirar la mayor parte de sustancia que haya hecho contacto en la zona ocular del rostro.Existen diferentes tipos de lavaojos:*Fuente lavaojos.*El lavaojos portátil.*El lavaojos en spray.*La ducha lavaojos.

Lavaojos

Facultad de ingenieria. (2018). Guía de uso de duchas de seguridad y lavaojos. Universidad Nacional del Litoral. Recuperado el 1 de septiembre de 2024. https://www.fiq.unl.edu.ar/institucional/wp-content/uploads/sites/3/2018/11/Gui%CC%81a-de-uso.pdf

La cristaleria se refiere a todo material de laboratorio hecho de borosilicato como pipetas, matraces, buretas, probetas, varillas, tubos, etc. Necesitan estar bajo un resguardo especial para evitar rupturas o mal uso de este material.

Cristalería y equipos pequeños

Por otro lado, los equipos pequeños se pueden guardar en esta misma área, pues no representan un riesgo al encontrarse en esta área; tales como parrillas, anillos para soporte universal, soporte universal, micropipetas, etc.

Material sólido:Coloca los materiales sólidos contaminados (por ejemplo, placas de cultivo, pipetas, puntas de pipeta, guantes, etc.) en bolsas de autoclave resistentes al calor y etiquetadas como residuos biológicos peligrosos.Las bolsas deben estar parcialmente abiertas o tener ventilaciones para permitir la entrada de vapor. No llenar las bolsas en exceso; dejar suficiente espacio para que el vapor circule uniformemente.b. Material líquido:Los residuos líquidos contaminados (medios de cultivo, soluciones) deben estar en frascos o botellas de vidrio resistentes al calor. No llenes los frascos más del 75% de su capacidad para evitar derrames.Asegúrate de que las tapas estén sólo ligeramente ajustadas o aflojadas para permitir la entrada del vapor de esterilización.El equipo se debe programar a 121°C durante 15 minutos

Autoclave: preparación de los residuos biológicos

Revista Sanitaria de Investigación. (2023, 16 septiembre). Esterilización de material en autoclave: métodos y consideraciones. RSI. https://revistasanitariadeinvestigacion.com/esterilizacion-de-material-en-autoclave-metodos-y-consideraciones/#:~:text=El%20material%20se%20deposita%20en%20un%20recipiente%20herm%C3%A9tico,microbianas%20y%20la%20alta%20temperatura%20acelerar%C3%A1%20estas%20reacciones.

Se realizar todos los procedimientos que puedan generar aerosoles dentro de una CSB clase II. Esto incluye la inoculación de muestras, la manipulación de cultivos y la apertura de recipientes.

BSL-2: Cabinas de seguridad biológica clase II

Gómez, M. T. M., & Lletí, M. S. (2021). Mucormicosis: perspectiva de manejo actual y de futuro. Revista Iberoamericana de Micología, 38(2), 91-100. https://doi.org/10.1016/j.riam.2021.04.003