Proyecto Final Laboratorio Clínico y Biomédico

TFG Laboratorio Clínico y Biomédico

Proyecto Final laboratorio clínico y biomédico

Autor: Ana Pérez Haba

Centro Laboral

Analisis Microbiológico de orina

Prueba de Coombs

Índice

Inmunodeficiencia por citometría de flujo

bibliografiá

cENTRO LABORAL

Hospital Cormarcal Valle de los Pedroches

Recepcion de muestra

Urgencias

Microbiología

El Hospital Comarcal Valle de los Pedroches (HVP) es un Hospital General Básico de carácter Comarcal localizado al norte de la provinvia de Córdoba.Intengra los recursos asistenciales y de Salud Pública tanto Hospitalaria como de los centro de Salud .

Orina

Serología

Hematología

Analisis microbiológico de orina

Importancia de la técnica

El cultivo bacteriológico de la orina es una técnica fundamental para el diagnóstico de infecciones del tracto urinario y vesical .

Además, el cultivo bacteriológico es también esencial en la investigación científica para estudiar la microbiología de diferentes ambientes, obtener nuevas cepas de bacterias con potencial biotecnológico y comprender mejor la biología de estos microorganismos.

Fundamento

El urocultivo también conocido como cultivo de orina, es un examen que se realiza en el laboratorio de microbiología para detectar la presencia de microorganismo en la orina. Esta técnica permite aislar y cultivar bacterias a partir de la muestra clínica (orina).

Tipos de medio de cultivo

Materiales

➢ Selectivo➢ Diferenciales ➢ Enriquecidos ➢ Simples ➢ Cromogenicos

➢ Asa calibrada de 10µl ➢ Medio de cultivo Cromogénicos ➢ Mechero bunsen ➢ Mascarilla y guantes. ➢ Muestra de orina.

Procedimiento

Resultado

Se observa el crecimiento de una placa bacteriana, se considera negativo si no hay colonias de bacterias durante el período de incubación de 24 a 48 horas. Un resultado anormal o “positivo” indica la presencia de bacterias o cándidas en la muestra recolectada, lo que probablemente sugiere una infección urinaria o vesical. En el examen, se verifica el número y la cuantificación de colonias, y si hay más de 3 colonias diferentes sin predominio específico, se considera que la orina está contaminada

PRUEBA DE COOMBS

Importancia de la técnica

La prueba de Coombs, también conocida como prueba de antiglobulina, es un análisis de sangre utilizado en inmunología y hematología. Fue descubierta por Coombs, Mourant y Race en 1945. Su objetivo principal es detectar anticuerpos en el suero que reaccionan con antígenos en la superficie de los glóbulos rojos.Hay dos formas de realizar la prueba de coombs de forma directa e indirecta.

Fundamento

La prueba de Coombs, se basa en la unión de proteínas del complemento o anticuerpos incompletos (IgG) a la superficie de los glóbulos rojos. Estas células, llamadas glóbulos rojos sensibilizados, pueden adquirir esta sensibilización in vivo o in vitro . En ausencia del reactivo de Coombs , los glóbulos rojos sensibilizados no se aglutinan. Esto se debe a que las moléculas de IgG unidas a los glóbulos rojos no pueden cerrar la brecha entre las células sensibilizadas. La carga negativa presente en la superficie de estas células las mantiene separadas, evitando la aglutinación. Sin embargo, cuando se agrega el reactivo de Coombs, o suero de antiglobulina, se completa la reacción.

Proceso de reacción

Materiales

Esta técnica se basa en el proceso de formación complejos antígeno-anticuerpo.La reacción tiene lugar en los microtubos llenos de gel. El gel contiene anticuerpos específicos o reactivos según la reacción deseada. Tras añadir la muestra al análisis, en la columna de gel se puede apreciar a simple vista la separación entre los eritrocitos aglutinados y los no aglutinados después del centrifugado.

➢ Tarjeta LISS/ COOMBS de Dia- Med. ➢ Diluyente. ➢ Tubos cristales. ➢ Puntas pipetas desechables. ➢ Pipetas de 10µ y 50 µ. ➢ Muestra de sangre.

Procedimiento Coombs directo

Procedimiento Coombs indirecta

Resultado del Coombs directo

Resultado del Coombs indirecto

iNMUNODEFICIENCIA POR CITOMETRÍA DE FLUJO

Importancia de la técnica

Esta técnica se basa en la detección de la luz que se dispersa o emite como fluorescencia cuando un haz de luz láser incide sobre las células que fluyen en un líquido. Facilita el diagnóstico o seguimiento de patologías como leucemia, inmunodeficiencia primaria.

La citometría de flujo es una herramienta biotecnológica que nos permite medir de manera rápida características físicas y químicas de manera individual y simultánea de cada una de las células suspendidas en una solución.

Fundamento

En el diagnóstico del VIH, la citometría de flujo se utiliza para contar las células CD4 + T, un tipo de células del sistema inmunitario que el VIH ataca y destruye. Un recuento bajo de estas células es un indicador de que el VIH ha dañado el sistema inmunitario. Este recuento se realiza al inicio del diagnóstico y se repite regularmente durante el tratamiento para monitorear la progresión de la enfermedad y la respuesta al tratamiento.

Partes del equipo

Controles

➢ Control de autofluorescencia➢ Control de Isotipo ➢ Controles FMO ➢ Controles de Compensación:

suspensión celular

Muestras liquidas :ya están resuspendidas por lo que pueden usarse directamente.

Suspension celular pueden ser :

Muestras solidas : muestras de tejidos u órganos

Procedimiento

1. separar las poblaciones.2. Reaizamos el Panning para linfocitos 3. Una vez tenemos la suspensión celular le añadimos los Ac monoclonales (AcMo) comerciales conjugado con fluorocromo especifico a las células que queremos separar e identificación, en nuestro caso marcaremos con Ac Anti- CD4 y Anti-CD3. 4. Realizamos el marcaje (con los AcMo y fluorocromos mencionados anteriormente durante 20 min a 4ºC en oscuridad para que no se exciten), incubamos y procedemos a realizar la citometría de flujo.

Procedimiento

Resultados

.Los resultados obtenidos pueden ser representados mediante diferentes estilos, desde una gráfica de puntos hasta una figura tridimensional ; la clave se centra en seleccionar los gráficos que reflejen los resultados con precisión y sin generar confusiones.

Mantenimineto , Normas de seguridad y Control de Calidad

BIBLIOGRAFÍA

https://agsnortecordoba.org/

https://citometriadflujo.com/citometria-de-flujo-y-vih/

https://www.chromagar.com/es/product/chromagar-orientation/

https://www.tuasaude.com/es/urocultivo/

Me gustaría agradecer tanto a los técnicos de laboratorio, supervisora, analistas a mis compañeras y profesores por el gran apoyo y orientación que me han brindado.

¡¡MUCHAS GRACIAS!!