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Cartel.Espectrofotómetro

Bioquímica y Biología Molecular

Created on June 4, 2024

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Fundamento del Espectrofotómetro

se basa en la relación que existe entre la absorción de luz por parte de un compuesto y su concentración

La absorbancia es una curva que muestra la cantidad de energía radiante absorbida por la sustancia en cada longitud de onda del espectro electromagnético.

  • Absorbancia (A) : Se define como la cantidad de energía radiante absorbida por una sustancia pura o en solución
  • Transmitancia (T): Es la razón entre la luz transmitida por una muestra y la luz incidente.

El método espectrofotométrico se rige por dos leyes fundamentales:

Kalstein. (2021, diciembre 22). ¿Cómo funciona un espectrofotómetro? Kalstein. https://www.kalstein.cl/como-funciona-un-espectrofotometro/ Componentes del espectrofotómetro—Labster. (s/f). Recuperado el 4 de junio de 2024, de https://theory.labster.com/es/spec-components/

Ley de Beer

Ley de Lambert

La intensidad de un haz de luz disminuye exponencialmente al aumentar la concentración de la sustancia absorbente

La intensidad de la luz transmitida disminuye exponencialmente al aumentar el espesor del medio absorbente.

Un espectrofotómetro es un instrumento utilizado para medir la cantidad de luz absorbida por una muestra a diferentes longitudes de onda.

Registro de resultados

Selección de la longitud de onda

Calibración del instrumento

Preparación de la muestra

Medición

La combinación de luz reflejada y absorbida en varias longitudes de onda lo que produce un color específico que vemos

Díaz, A., et al..Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de biomoléculas. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Campus Universitario de Rabanales, Córdoba