Laboratorio Virtual: HHMI Biointeractive

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

Escuela Nacional Preparatoria Plantel Nº 9 “Pedro de Alba”

Práctica Virtual No. 6:Laboratorio Virtual: HHMI Biointeractive, Prueba de Identificación de COVID-19

Maestra: Rocío José Jacinto Biología V Grupo 667 Miembros del equipo:

Camacho De León Daniela Castañeda Zárate Fátima Samantha Castro Minor Mia Marlene Hernández Guzman Zaireth Argelia

Introducción

importancia de las pruebas de identificación inmunológicas del virus SARS-CoV-2-19

La prueba de anticuerpos también se conoce como prueba de hematología, como su etimología nos da a conocer, es un análisis de sangre.

La prueba puede brindar información sobre la manera en que el cuerpo reaccionó a una infección con el coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave de tipo 2 (SARS-CoV-2). SARS-CoV-2 es el nombre del virus que causa la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19). La prueba también puede mostrar la manera en que el cuerpo reaccionó a las vacunas contra la COVID-19. Una prueba negativa de los vasos sanguíneos significa que no se encuentran anticuerpos en la sangre, mientras que una positiva nos indica que el organismo posee anticuerpos para la COVID-19 en la sangre. Como toda prueba, podemos tener falsos negativos y positivos, influyen distintos factores en estos resultados, por ejemplo, la realización demasiado pronta después de contraer la infección, pues el cuerpo no ha tenido tiempo de generar anticuerpos.

Pruebas serológicas.Villanueva a. (2020)

Las pruebas de identificación inmunológicas son una herramienta importante en la lucha contra la pandemia de COVID-19, ya que proporcionan información crucial para la prevención, el control y el tratamiento de la enfermedad.

• Detección de infecciones pasadas: Son capaces de identificar si alguien ha estado previamente infectado con el virus, incluso si no mostraron síntomas en ese momento. Esto ayuda a comprender mejor la propagación del virus y la inmunidad colectiva.

• Seguimiento epidemiológico: Pueden proporcionar datos sobre la prevalencia de la infección en una población determinada, lo que es crucial para evaluar el alcance de la pandemia y tomar decisiones informadas sobre las medidas de salud pública.

• Evaluación de la respuesta inmune: Permiten entender cómo responde el sistema inmunológico al virus y cuánto tiempo pueden persistir los anticuerpos en el cuerpo después de la infección. Esto es fundamental para el desarrollo de vacunas y estrategias de inmunización.

• Identificación de grupos de riesgo: Ayudan a identificar a las personas que han desarrollado una respuesta inmune contra el virus, lo que puede ser útil para determinar quiénes podrían estar protegidos contra futuras infecciones y quiénes podrían necesitar vacunarse.

ELISA. Morgan m. (2019).

Método de ELISA

Immunology-Lab

Oprimimos el botón para comenzar, ingresamos a nuestro laboratorio y nos encontramos con las instrucciones y desarrollo del programa.

Disponemos de un dispositivo computador y nos dirigimos a la página: https://www.biointeractive.org/classroom-resources/immunology-virtual-lab.

Nos colocamos el equipo de seguridad para después obtener 40 ml de sangre de 3 pacientes (tubos identificados: A, B y C).

Pipeteamos 1:2 con el buffer de fosfato en el tubo de muestra eppendorf.

Centrifugamos las muestras de sangre entera de los pacientes A, B y C durante 15 minutos a temperatura ambiente para obtener los sueros.

Pipeteamosr con la micropipeta 1mL en tubo de muestra eppendorf, 1mL en un tubo de centrífuga y 1 mL en otro tubo de centrifuga. Utilizando el suero del paciente A, preparamos 3 diluciones.

Pipeteamos 1:10 con el buffer de fosfato en el primer tubo de centrífuga.

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Pipeteamos 1:100 con el buffer de fosfato en el segundo tubo de centrífuga.

Depositamos en los pozos de una placa de ELISA

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Mezclamos y preparamos una placa ELISA con 0,1 ml de las diferentes diluciones de suero del paciente utilizando una pipeta Eppendorf®.

Preparamos tres diluciones utilizando el suero del paciente B siguiendo el procedimiento de nuestro paciente A.

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Aplicamos SLE anticuerpo; 0.1 mL para el control positivo en lospozos de la placa de ELISA.

Repetimos el procedimiento con la muestra B y C, posteriormente mezclamos.

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Aplicamos SLE anticuerpo; 0.1 mL para el control positivo en los pozosde la placa de ELISA

Aplicamos el control negativo anti-DNA; 0.1 mL para el control positivoen los pozos de la placa de ELISA.

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A menudo, en un laboratorio real, estos lavados se repiten de 3 a 6 veces antes de añadir la siguiente sustancia.

Incubamos la placa ELISA a 37° C durante 15 minutos.

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En nuestro laboratorio virtual, para acelerar este proceso nos dan un solo ejemplo de enjuague/lavado por paso.

Retiramos el líquido de cada pocillo con la pipeta y lave con 0,1 ml de PBS.

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Añadimos con la micropipeta 0.1 mL de enzima HRP a las muestras. Tengamos en cuenta que este anticuerpo secundario se produce en un conejo y tiene una enzima adjunta (HRP) que interactuará con el sustrato en el siguiente paso.

Colocamos los datos correspondientes (15 minutos a 37° C).

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Vamos de regreso a la incubadora.

Transferimos la placa.

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Ajustamos el cronómetro y dejamos reposar la placa según lo que se indique (15 minutos).

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Retiramos el líquido de cada pocillo con la pipeta y lavamos con 0,1 ml de PBS.

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Una vez obtenidos nuestros resultados, analizamos. En este caso fueron los resultados correctos pues el procedimiento realizado en nuestro laboratorio virtual fue el adecuado.

Añadimos 0,1 ml de solución tamponada que contenga el sustrato químico (sustrato HRP). Si hay anticuerpos humanos presentes, el sustrato transparente se volverá amarillo.

REFERENCIAS:

• Coronavirus disease 2019 (COVID-19): Overview of testing for SARS-CoV-2, the virus that causes COVID-19. Centers for Disease Control and Prevention. Recuperado de: https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/hcp/testing-overview.html.
• HHMI Biointeractive. (2021). Inmunology Virtual Lab. Recuperado de: https://www.biointeractive.org/classroom-resources/immunology-virtual-lab

• Infectious Diseases Society of America guidelines on the diagnosis of COVID-19: Serologic testing. Infectious Diseases Society of America. Recuperado de: https://www.idsociety.org/practice-guideline/covid-19-guideline-serology. Accessed Aug. 25, 2020.
• Patel R, et al. Report from the American Society for Microbiology COVID-19 International Summit, 23 March 2020: Value of diagnostic testing for SARS-CoV-2/COVID-19. mBio. 2020; doi:10.1128/mBio.00722-20.
• Pruebas de anticuerpos para COVID-19. (2022, December 20). Mayoclinic.org. Recuperado de: https://www.mayoclinic.org/es/tests-procedures/covid-19-antibody-testing/about/pac-20489696

la prueba de ELISA.Bautista E. (2020)