Presentación Microscopía confocal

Microscopía confocal

Fundación Medac

índice

Fundamento

Carasterísticas principales

Aplicaciones

Imágenes del equipo y sus muestras

Por el contrario, la microscopía confocal utiliza iluminación puntual con un "estenopo". Contiene un plano óptico conjugado delante del convertidor para eliminar información fuera del plano focal. Sólo la luz en este plano es visible, por lo que la imagen se adapta mejor al amplio campo de visión. Además, en la microscopía confocal, solo se ilumina un área a la vez, por lo que para obtener una imagen bidimensional o tridimensional es necesario realizar un escaneo rasterizado de la muestra. El espesor del plano focal suele ser el cuadrado de la apertura numérica del objetivo, que está determinado por las propiedades ópticas de la muestra y el índice del entorno.

Fundamento

Un microscopio confocal es un microscopio que puede tomar imágenes desde un único plano confocal. El principio fundamental de la microscopía confocal es eliminar la luz que llega desde el plano exterior de la lente. Utilizando epiluminiscencia, es decir, una muestra que refleja la luz o emite luz. En 1957 Marvin Minsky validó el concepto de fotografía reflexiva. En la microscopía de fluorescencia convencional, toda la muestra se satura con la luz de una fuente de iluminación. Debido a que la energía luminosa se conserva a lo largo del camino, una porción de la muestra se excita en el camino óptico y la fluorescencia es detectada por un fotodetector o una cámara.

carasteristicas

principales

La característica principal de la Microscopía Confocal es que detecta y recoge la luz emitida por moléculas fluorescentes situadas en un mismo plano focal del espacio tridimensional. Esto es posible porque, por una parte, la fuente de iluminación utilizada es luz láser en la que el haz monocromático se mantiene perfectamente lineal al propagarse. Esta luz ilumina las muestras con una intensidad muy elevada y estable. Esta disposición permite conseguir resoluciones microscópicas subcelulares. Desde el punto de vista técnico, los microscopios confocales actuales están equipados con una pieza llamada “diafragma de detección confocal” o “pinhole”, que consiste en un pequeño orificio en el filtro detector de la luz que impide el paso de aquella procedente de los planos de la muestra que no están enfocados. Así, se obtiene sólo la información de la región enfocada, denominada “plano de imagen primario” o “plano focal”, y se elimina el resto. Como resultado final se logran imágenes de mucha mejor calidad, pudiéndose realizar cortes virtuales de las muestras analizadas. Esta Microscopía, posibilita el estudio tridimensional de las muestras, incluyendo su interior, y en determinados materiales permite la obtención de imágenes de su superficie mediante reflexión. Además, la Microscopía Confocal también se aplica para el estudio de muestras in vivo a lo largo de una secuencia temporal o para la co-localización de distintos marcadores en una región concreta.

aplicaciones

La microscopía confocal es una herramienta de imágenes que permite la visualización de células y estructuras de la piel en tiempo real. Se ha utilizado para la evaluación de lesiones benignas y malignas, mostrando un gran potencial de aplicación en investigación básica y dermatología clínica. Se cree que este método tiene un gran potencial en estudios clínicos a largo plazo y evalúa los procesos dinámicos que ocurren después de la exposición a la luz ultravioleta o durante la respuesta del tumor a los tratamientos. Este artículo proporciona una breve descripción de los fundamentos de las imágenes radiográficas, sus aplicaciones clínicas, fundamentalmente en el tratamiento de los tumores cutáneos, y las limitaciones que la técnica presenta asociadas a las propiedades ópticas de la piel, con la instrumentación y con la interpretación de las imágenes. Además este tipo de microscopio se puede aplicar en los siguientes campos: Biología Molecular, biología Vegetal, fisiología, medicina, ciencia de Materiales, microbiología, biología Celular, bioquímica, biomedicina, histología, inmunología y anatomía.

imágenes del equipo

y de sus muestras

A continuación vamos a observar diferentes tipos de imágenes de muestras vistas con el microscopio confocal. Además, a la hora de utilizar este equipo, es necesario preparar adecuadamente las muestras. Para ello deben teñirse con colorantes fluorescentes que se pueden aplicar tanto antes como después de realizar la fijación de la muestra.

Imágenes del equipo y su estructura:

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por su atención