Criterio de Cowan y Steel: Fundamentos de tinciones y pruebas

BACTERIOLOGÍA MÉDICA

CRITERIO DE COWAN Y STEEL FUNDAMENTOS DE TINCIONES Y PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Patricia Isidra Cauich Sánchez

5 de febrero de 2024

ÍNDICE

Retroalimentación Tinción de Gram Pruebas empleadas para las bacterias gram positivas Pruebas empleadas para las bacterias gram negativas Tinción de Ziehl Neelsen Tinción de Schaeffer y Fulton Prueba de movilidad Aerotolerancia o requerimientos de oxígeno Catalasa Oxidasa Producción de ácido de la glucosa Prueba de OF Referencias

Retroalimentación

Antes de abordar los fundamentos, los invito a recordar la infografía y la imagen interactiva

TINCIÓN DE GRAM

Debido a la composición de la pared celular, las bacterias gram positivas retienen el cristal violeta, mientras que las gram negativas no, éstas adquieren el colorante de contraste, la safranina

PRUEBAS EMPLEADAS PARA LAS BACTERIAS GRAM POSITIVAS

PRUEBAS EMPLEADAS PARA LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

TINCIÓN DE ZIEHL NELSEN

Las bacterias que tienen áçidos micólicos en su pared celular resistirán la decoloración por alcohol ácido y serán rojas,mientras que las que no tienen, se teñirán de color azul.

TINCIÓN DE SCHAEFFER Y FULTON

Procedimiento

PRUEBA DE MOVILIDAD

Si la bacteria tienen flagelos se va a mover en un medio semisólido, de lo contrario no

PRUEBA DE AEROTOLERANCIA O REQUERIMIENTOS DE OXÍGENO

Interpretación

PRUEBA DE LA CATALASA

Fundamento: Si la bacteria posee la enzima catalasa, el peróxido de hidrógeno será descompuesta por ésta, produciendo agua y oxígeno

Positiva Negativa

PRUEBA DE LA OXIDASA

FUNDAMENTO: Las bacterias producen citocromo oxidasa que, en presencia del oxígeno, citocromo c y un reactivo de oxidasa, oxida al reactivo a un compuesto coloreado, el indofenol.

PRODUCCIÓN DE ÁCIDO A PARTIR DE LA GLUCOSA

Las bacterias tienen la capacidad de fermentar los carbohidratos a través de varias vías metabólicas produciendo ácidos orgánicos

Medio empleado

No inoculado Positivo Negativo

PRUEBA DE OXIDACIÓN –FERMENTACIÓN EN MEDIO DE HUGH Y LEIFSON

Las bacterias puede utilizar la glucosa por vía oxidativa (condiciones aeróbicas) o por vía fermentativa (condiciones anaeróbicas)

Medio empleado

Interpretación

No inoculado + - No inoculado + +

REFERENCIAS

Barrow, G. y Feltham, R. (2003). Cowan and Steel’s Manual for the Identification of Medical Bacteria. (3a Ed., pp.51, 95). Cambridge University Press. MacFaddin, J. (2003). Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de Importancia Clínica. (3a Ed.). Editorial Médica Panamericana. Videotutoriales Informática Educativa. (18 de octubre de 2019). Coloración con Zielh Neelsen. (Archivo de video). Youtube.https://www.youtube.com/watch?v=HANr6xMdqjA. Área de Microbiología Universidad de Salamanca. (8 de marzo de 2017). Técnicas básicas de Microbiología: Tinción de endosporas. (Archivo de video). Youtube. https://www.youtube.com/watch?v=qmDSISwVuuE Videotutoriales Informática Educativa. (14 de agosto de 2018).Prueba de la catalasa.(Archivo de video). Youtube. https://www.youtube.com/watch?v=7MW9Qjrkd3A

Procedimiento 1.- Fijar el frote por calor 2.- Cubrir la preparación con carbol fucsina 3.- Calentar a emisión de vapores durante 5 min 4.- Lavar con agua de la llave 5.- Decolora con alcohol-ácido 6.- Lavar con agua de la llave 7.- Cubrir la preparación con azul de metileno durante 1 min 8.- Lavar con agua y dejar secar al aire.