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Tinción de pas

Procedimiento

Fundamento

Se utiliza un aparato automático de tinción. El kit de PAS se compone de todos los reactivos que intervienen en esta tinción. Puede ayudar, por un lado, al diagnóstico diferencial de tumores y, por otro, a detectar enfermedades fúngicas.

– La más usada en histología.–Tiñe estructuras con gran cantidad de moléculas de hidratos de carbono como por ejemplo: el glucógeno, que se suelen encontrar sobre todo en el tejido conjuntivo, mucosas y membranas basales. – Mecanismo por afinidad eléctrica -> es una tinción histoquímica, es decir, se modifica químicamente el tejido previamente a la coloración, gracias al ácido peryódico.

Resultados

Lo que reacciona es el ácido peryódico de Schiff por su oxidación a ciertos polisacáridos, el PAS se asocia a la diastasa (PAS-diastasa) que digiere el glucógeno pero deja persistente la coloración rosa de las mucinas intra o extracelulares.

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Pasos

. 6- Cubrir con reactivo de Schiff 30 min. 7- Lavado con agua corriente y varios lavados en agua destilada. 8- Colocar los vidrios en una canasta para coloración, y dejar en Hematoxilina de Mayer durante 5 min. 9- Lavar con agua corriente 20´´ aproximadamente. 10-Deshidratar pasando por Alcohol 96 durante 5 min y alcohol 100% durante 20min. 11-Aclarar con Xilol 20 min y montar.

Candidiasis vaginal

Pasos

Partimos de muestras que han sido fijadas e incluidas en parafina. Estas muestras se han cortado en secciones de unas 8 µm y adheridas a portaobjetos recubiertos con gelatina. 1.- 2x10 min en xileno para desparafinar 2- 10 min en alcoholes con regresión de concentraciones (100, 96, 80, 50) 3-Lavar con agua destilada los extendidos. 4-Colocar los extendidos sobre un puente de tinción en un cuenco y cubrir con Ácido Peryódico durante 5 min. 5-Lavar suavemente con agua unos minutos.

Ácido peryódico de Schiff

GRÁNULOS DE GLUCÓGENO

INTESTINO: TEJIDO CONJUNTIVO.

RIÑÓN: MEMBRANA BASAL.

La pigmentación tiñe de un rosa intenso o fucsia los carbohidratos mientras que los núcleos de un azul oscuro, ya que solo te tiñe la cromatina.