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Techniques de biologie moléculaire

Alexandra Picaut

Created on November 5, 2023

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Transcript

Techniques en biologie cellulaire et moleculaire

01

04

Microscopie electronique

MARQUAGE PAR FLUORESCENCE

02

03

Cristallographie aux rayons x

AUTORADIOGRAPHIE

Marquage par fluorescence

Le marquage par fluorescence consiste à utiliser des protéines responsables d'une fluorescence d'une couleur particulière qui s'associent à une molécule particulière dans la cellule. La fluorescence est ensuite détectées grâce à des machines et on obtient un cliché des cellules avec une répartition précise de la fluorescence permettant d'indiquer où se trouvent les molécules marquées au sein de la cellule.

Ex: le DAPI est un marqueur fluorescent bleu qui s'associe à l'ADN. Le bleu sur le cliché ci-dessus indique donc où est situé l'ADN dans la cellule.

Cristallographie aux rayons X

La cristallographie aux rayons X est une technique d'analyse fondée sur la diffraction des rayons X par la matière. Cette méthode utilise un faisceau de rayons X qui, rencontrant une molécule, est renvoyé dans des directions spécifiques déterminées notamment par l'agencement des atomes dans la molécule. On réalise ensuite un cliché des rayons diffractés. Par la mesure des angles et de l'intensité des rayons diffractés (sur le cl, il est possible d'obtenir les dimensions de la molécule et la position et la nature des atomes composant la molécule ainsi que d'autres informations structurales.

Microscopie électronique

La microscopie électronique consiste à utiliser des rayonnements d’électrons projetés sur une préparation microscopique. Lorsque les électrons rencontrent la préparation microscopique, ils peuvent être déviés ou non. On réalise un cliché final de la trajectoire finale des électrons après passage de la préparation microscopique. Cette technique permet d'obtenir des images à très petite échelle (plus petite que le microscope optique): de l'ordre du nanomètre: il est possible de voir des molécules.

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