Validation Analytique - complet

Validation de méthode analytique

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SOMMAIRE

Validation de méthode analytique

COntexte règlementaire et technique de la validation anAlytiquE

Comment réaliser une validation anAlytique ?

Critères, Méthodologie et exemples

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Prérequis

• Formation BPF

• Avoir une idée de ce qu'est la norme ISO 9000 « Management de la qualité »

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Objectifs pédagogiques

• Connaitre le cycle de vie d'une méthode analytique

• Comprendre l’intérêt de la validation d'une méthode analytique

• Découvrir le contexte réglementaire de la validation analytique

• Savoir quels sont les différents paramètres requis pour une validation analytique

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Public :

• Tous publics

Niveau :

• Débutant

Je réalise ce module si :

Si j’ai besoin de comprendre la validation analytique

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En réalisant ce module, je serais capable de :

• Comprendre l'intérêt de la validation analytique

• Comprendre les étapes clés de la validation analytique

• Appréhender si une situation nécessite de réaliser une validation analytique

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Quelques acronymes abordés

Quality ControlQuality Control Limit Of DetectionLimit Of QuantificationStandard Operating Procedure International Council for Harmonisation United States Pharmacopeia Good Manufacturing Practices

QA QC LODLOQSOP ICH USP GMP

Assurance Qualité Contrôle Qualité Limite de Détection Limite de Quantification Procédure Opératoire Conseil International d'Harmonisation Pharmacopée américaine Bonnes Pratiques de Fabrication

AQCQ LDLQPO CIH USP BPF

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Quelques définitions clés

Elle garantit les performances d’une méthode d’analyse par examen et apport de preuves objectives, au regard de l’usage attendu du produit et permet d’estimer les incertitudes de mesure aussi.

Validation

La validation d’une méthode est la « confirmation par des preuves objectives que les exigences pour une utilisation spécifique ou une application prévue ont été satisfaites. » `

Définition norme EN ISO 9000

Toutes les activités de validation doivent être planifiées et documentées par un PDV. C’est un document qui présente la politique et les actions mises en œuvre pour documenter les phases de qualification et de validation d’1 système = indifféremment un équipement, un procédé, une méthode ou une installation.

Plan directeur de validation (PDV)

Elle concerne la démonstration de l'adéquation de la méthode en cohérence avec la spécification produit/ matière.

Vérification

La vérification d’une méthode est la « confirmation par l’examen et la fourniture de preuves objectives que des exigences spécifiées ont été remplies. »

Définition norme EN ISO 9000

Ne pas confondre validation : orientée utilisation spécifique et vérification : orientée spécifications précises

⚠️

Quelques définitions clés

monographie issue d'une pharmacopée en vigueur (Européenne : PE, Américaine : USP, Japonaise : JP, etc..). Les méthodes de référence doivent être considérées comme déjà validées !

Méthode de référence

par opposition à une méthode de référence, cette méthode usuelle est mise en place par un labo.

Méthode usuelle

(le résultat de ce type d’analyse est subjectif (identification au microscope) ou binaire (présence/absence). Exemple : la détection d’un réactif dans un produit fini pour savoir si la réaction a été totale ou non.)

Analyse sélective / qualitative

Elle est définie en opposition à l’analyse qualitative. Elle est qualifiée par une unité de mesure (souvent associée à une concentration) alors que la donnée qualitative sera simplement décrite.

Analyse spécifique / quantitative

Données non interprétées provenant directement des appareils ou des résultats d’expérimentation (fiche de travail, chromatogrammes...). Elles font gage de preuve quant aux informations apportées dans le rapport de validation et sont essentielles.

Données brutes

Erreur aléatoire : (Erreur de mesure qui, au cours d’une série de plusieurs mesures, varie de façon imprévisible.)

Incertitude de mesure

Erreur de mesure qui, au cours d’une série de plusieurs mesures, varie de façon constante ou prévisible.

Incertitude systématique

introduction

Le sujet des analyses est très vaste. Elles sont à effectuer tout au long du cycle de vie produit / matériau souhaité.

Les analyses requises par la réglementation du domaine concerné (pharmaceutique, cosmétique, environnemental, agro-alimentaire, chimie, médical, biologie...) doivent être effectuées avec des méthodes validées.

🎯 Objectif de la validation analytique :

La validation analytique n’a pas pour but de vérifier la qualité du produit / matériau, mais la qualité de la méthode analytique en elle-même.

👉

Il existe 4 grands types de méthodes analytiques.

4 validations de méthodes analytiques sont possibles.

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Grands Types de méthodes analytiques

Physico-chimiques

Thermiques

4 Types

Pharmaco-techniques

Microbiologiques

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Types de validation d'une méthode*

Validation retrospective

Validation simultanée

Revalidation

Validation prospective

*système, procédé, équipement ou installation

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contexte règlementaire 📃(1/2)

La validation des méthodes analytiques est requise selon les BPF (Bonnes Pratiques de Fabrication) pour tout produit fini (médicament) / matière API avant sa mise sur le marché et pendant sa commercialisation.

Extrait des BPF chapitre 12.8. Validation des méthodes analytiques :

12.80 Les méthodes analytiques doivent être validées à moins que la méthode utilisée ne soit incluse dans la Pharmacopée appropriée ou dans un autre standard de référence reconnu…

12.81 Les méthodes doivent être validées en prenant en compte les critères inclus dans les guides ICH …Le degré de la validation analytique réalisée doit refléter le but de l’analyse… »

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contexte règlementaire 📃(2/2)

Selon les BPF, les critères des guides ICH sont à prendre en compte pour la validation analytique :Il y a 2 guides ICH spécifiques aux méthodes analytiques :

Il y a 2 guides ICH spécifiques aux méthodes analytiques :

1) ICH Q2 : validation des méthodes analytiques et méthodologie

Exemples de méthodes analytiques à multiples variables

• spectroscopie infrarouge FTIR

• Résonance Magnétique Nucléaire RMN

2) ICH Q14 : développement des méthodes analytiques et cycle de vie

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Exemples de Va

* Pour un médicament

La validation analytique à toute procédure d’analyse est requise pour enregistrement dans les pays où il sera commercialisé.

* Pour un produit alimentaire

Dans le cadre de la réglementation Européenne, les exploitants du secteur alimentaire sont responsables de la sécurité (innocuité) et de la salubrité (absence d’altération) des produits qu’ils commercialisent.

* Pour une méthode pour les laboratoires d’analyses de biologie médicale

Le guide SH GTA 04 du Cofrac (Comité Français d'Accréditation) est le Guide technique d'accréditation de vérification, qui s’applique uniquement

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Qui ?

Quels sont les acteurs dE la VA ?

Les acteurs concernés par la validation analytique sont nombreux et multi-services :

En externe :

En interne :

Assurance Qualité

Labo / Contrôle Qualité

Responsable Validation

Prestataires de service

Service R&D

Responsable HSE

Service production

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Pré-requis et étapes de la validation analytique

Analyses

Protocole

Rapport

Pré-requis

La validation analytique comprend ces 3 étapes

Change control

Quelles sont les étapes de la validation analytique ?

• Protocole approuvé

• Analyses selon protocole

• Rapport approuvé avec l’exploitation des résultats et conclusion sur la validation

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Place aux questions

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en résumé

La validation des méthodes analytiques est requise dans tous les domaines : Pharma, Alimentaire, Médical, etc…

3 étapes pour la VA 1) Protocole approuvé 2) Tests selon protocole 3) Rapport approuvé avec conclusion

Avant de faire une validation analytique, il y a des prérequis et un change control à initier pour décider quelle validation faire parmi les 4 validations possibles

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Comment ?

Protocole de validation analytique

Le protocole doit être vérifié et approuvé avant de commencer les activités et inclure les éléments suivants :

• Une numérotation unique du document

• Le nom et l’affiliation de l’auteur; du/des vérificateur(s), des approbateurs :  au minimum un responsable CQ et un responsable AQ

• L'objectif de la validation

• Le nom de la méthode, son principe et l’utilisation qui en sera faite

• La description détaillée de la méthode ou une référence à un document décrivant la méthode.

• Les paramètres qui devront être testés durant la validation, les spécifications et les critères d’acceptation.

• Une description détaillée des tests à réaliser.

Critères, méthodologie et intérêt

Critères ICH

Méthodologie

Intérêt

• Spécificité / Sélectivité

• Linéarité

• Gamme de validation

• Répétabilité

• Fidélité intermédiaire

• Reproductibilité

• Exactitude / Justesse

• Robustesse

• Seuil / Limite de détection
(LOD)


Seuil / Limite de quantification (LOQ)

👉 NB : Les critères ICH ne sont pas tous requis selon le but de la méthode à valider

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interactions entre critères ICH

Plusieurs critères de validation selon ICH sont interdépendants pour des tests quantitatifs :

La validation analytique permet à la fois de :

• garantir les performances de la méthode d’analyse

ET

• d’estimer les incertitudes de mesure de la méthode

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critères supplémentaires NON ICH

Des critères supplémentaires non ICH sont couramment requis dans le domaine Pharma et Médical :

• Stabilité des réactifs : Dans le cas de réactifs fabriqués par le laboratoire, celui-ci devra établir les conditions de stabilité (température, durée de conservation, conditions de stockage, etc…). Une vérification des conditions suggérées par le fabricant peut être envisagée selon le risque.

• Effet matrice : Effectuer une évaluation avec des échantillons contenant des substances pouvant altérer le signal de mesure et entraîner des résultats erronés.

• Contamination inter-échantillons : Une étude de contamination inter-échantillons peut être à effectuer si pertinente.

Exemple : pour le système de pipettage des échantillons en utilisant 1 blanc ou des spécimens négatifs intercalés avec des spécimens fortement positifs dans le domaine de l’analyse de biologie médicale

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RAPPORT DE VALIDATION ANALYTIQUE

Toutes les données récoltées lors de la validation sont à exploiter et compiler dans un rapport à rédiger par CQ. Exemple : il est possible d’utiliser un logiciel comme Minitab pour évaluer les critères d’acceptation.

contenu

contenu du rapport (1/2)

Le rapport doit être vérifié et approuvé par l’AQ et au minimum inclure les éléments suivants :

• Une numérotation unique du document.
• Le nom et l’affiliation de l’auteur; du/des vérificateur(s), des approbateurs (au minimum un responsable CQ et un responsable AQ).
• La référence au protocole de validation.
• Nom de la méthode, son principe et l’utilisation qui en sera faite.
• La description détaillée de la méthode ou une référence à un document décrivant la méthode.
• Le matériel et les équipements utilisés durant la validation.
• La référence aux données brutes.

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contenu du rapport (2/2)

• Les résultats (résultats individuels et résultats moyens) conformément au protocole de validation.
• La revue globale des données (résultats et critères system suitability) et la conformité vis-à-vis des critères d’acceptation du protocole avec une justification en cas d’écart et l’ouverture d’une déviation si besoin.
• Un résumé et une conclusion.
• La déclaration formelle du statut de la validation.

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Cycle de vie d’une méthode usuelle analytique selon ICH

Les différentes étapes incluent la validation analytique

utilisation méthode validée en routine + suivi continu CQ

Suite à l’approbation du rapport de validation concluant que la méthode est validée, l’AQ autorise l’utilisation en routine avec la mise en place de contrôles qualité pour l’analyse au laboratoire conformément aux spécifications du produit concerné.

Les résultats de routine sont stockés dans l’ERP pour constituer une base de données, afin d’évaluer l’écart entre des résultats réels et la valeur cible (moyenne de la plage de spécifications) et déterminer si un résultat est :

• Rejeté

• Anormal

• Valide

Exemple : pour un test quantitatif, à partir de 30 résultats réels, on parlera de carte de contrôle : outil statistique

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🛡️

contrôle analytique par les autorités

Les autorités sanitaires ont de multiples missions dont le contrôle qualité, face à la mondialisation des marchés et l’émergence des falsifications.

Dans l’industrie pharmaceutique : l’ANSM (Agence Nationale de Sécurité du Médicament) effectue chaque année des contrôles analytiques dans leur laboratoire indépendant.

🔗 Qui sommes-nous ? Quelles sont nos missions ? Comment assurer la sécurité des produits et contrôler leur qualité ?

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REVue périodique des méthodes analytiques validés

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Place aux questions

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en résumé

En Pharma : les BPF exigent que les critères des guides ICH soient suivis pour la validation analytique

La validation analytique n’est qu’une phase du cycle de vie des méthodes : la revue périodique des méthodes validées est requise (ICHQ14)

Les critères ICH de validation ne sont pas tous requis car le degré de la validation analytique doit refléter le but de l’analyse

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Répétabilité

Exprime la fidélité sous des mêmes conditions opératoires et dans un court intervalle de temps.Effectuer un minimum de 6 déterminations à 100% ou 9 déterminations couvrant la gamme de validation (3 concentrations différentes répétées 3 fois chacune).  La répétabilité d’une méthode étant dépendante de la concentration, il est intéressant d’utiliser la 2ème procédure pour un dosage.

Intérêt spécificité / sélectivité

Il est important de prouver que le produit principal peut être analysé avec la même fiabilité qu’il soit seul ou en présence de ses produits secondaires. Une méthode spécifique justifiera de l’absence d’interférence lors de l’analyse du produit principal en présence de ses produits secondaires.

Linéarité

La linéarité est la capacité de la méthode à obtenir des résultats directement proportionnels à la concentration d’analyte dans l’échantillon (sur un certain intervalle)Analyser 5 concentrations minimum du produit principal, recouvrant la gamme de validation sélectionnée et en incluant la concentration nominale. Par exemple, évaluer la linéarité de la méthode à l’aide d’une régression linéaire.

Intérêt - Reproductibilité

La partie reproductibilité permet de justifier de l’indépendance de la méthode entre deux laboratoires. Très souvent, ce critère une fois validé est utilisé pour garantir le transfert de la méthode dans le deuxième laboratoire. La validation est alors appelée « co-validation ».

Spécificité / Sélectivité

La spécificité est la capacité de la méthode à démontrer que la réponse ne provient que du composé à analyser, même en présence d’autres composés tels que des impuretés, la matrice...Analyser de façon indépendante toutes les substances connues dans le produit fini et analyser ensuite le mélange produit fini et substances connues. Par exemple, en chromatographie, un dopage avec un standard de référence est couramment effectué dès le développement de la méthode.

🎯 Objectif de la revue périodique

L’objectif de cette revue est d’effectuer un état des lieux périodique des méthodes analytiques en vérifiant leur adéquation par rapport aux technologies et à la réglementation en évolution constante.

L’objectif de cette revue est d’effectuer un état des lieux périodique des méthodes analytiques en vérifiant leur adéquation par rapport aux technologies et à la réglementation en évolution constante.

En cas d’écarts constatés, un plan d’actions est à définir avec complément ou revalidation des méthodes et/ou déviation à intégrer dans le PDV annuel.

Seuil / Limite de détection
(LOD)
 Seuil / Limite de quantification (LOQ)

Toute méthode d’analyse possède ses propres limites de fiabilité, précision, exactitude etc. La LOQ est généralement la concentration la plus basse de la gamme de validation. En ce qui concerne la limite de détection, elle est un moyen de pouvoir confirmer la présence d’une substance au sein d’un produit fini, sans pour autant pouvoir la quantifier.

Fidélité intermédiaire

Représente des variations intra-laboratoire : jours différents, analystes différents, équipements différents. Reproduire la partie répétabilité dans le même laboratoire en y incluant plusieurs paramètres extérieurs changeant. Par exemple : technicien différent, jour différent et/ou équipement différent.

Validation rétrospective

effectuée a posteriori

La validation rétrospective n’est effectuée que lorsque la méthode n’a pas fait l’objet d’une validation formelle documentée.

Elle s’effectue normalement par l’utilisation de données historiques et l’analyse des tendances afin de prouver que la méthode se trouve dans l’état dans lequel il est censé se trouver.

NB : Dans la plupart des cas, ce n’est plus une approche acceptable de la validation de méthode, car toute méthode d’analyse devrait déjà avoir été validé avant sa distribution commerciale

Intérêt - Gamme de validation

La gamme de validation doit absolument être respectée car toute méthode analytique possède des limites d’utilisation. En effet, une méthode n’est parfois plus linéaire à très basse ou à très haute concentration par exemple. Il en est de même pour l’exactitude. La gamme de validation permet donc de fixer des limites d’utilisation de la méthode.

Revalidation

exécutée lorsque la validation prospective arrive à la conclusion que la méthode d’analyse n’est pas reproductible

La revalidation est plus largement utilisée pour les dispositifs médicaux que pour les médicaments.

En outre, un critère de revalidation peut être indiqué dans le protocole de validation original.

NB : Le processus de revalidation peut ne pas être aussi complet que la validation initiale, surtout si la situation ne nécessite que la répétition de certains aspects.

Intérêt - Exactitude / Justesse

L’exactitude d’une méthode permet de déterminer l’écart entre la valeur analytique et la valeur dite « vraie ». Le dosage d’un produit fini par exemple, devra fournir des résultats très proches de la réalité. Les critères d’acceptation seront fixés en tenant compte de la spécification même du produit à analyser.

Intérêt - Répétabilité

La répétabilité est le critère justifiant de la précision de la méthode d’analyse. En effet, il est primordial de prouver qu’une analyse répétée dans les mêmes conditions donne un résultat identique.

ICH Q14 - développement des méthodes analytiques et cycle de vie

C’est une nouvelle ligne directrice sur le développement et le cycle de vie des méthodes analytiques crée en 2018.

Elle couvre les bases scientifiques requises pour le développement, la gestion des changements et les exigences de soumission des méthodes analytiques pour une approche minimale et étendue.

Répétabilité

Exprime la fidélité sous des mêmes conditions opératoires et dans un court intervalle de temps.Effectuer un minimum de 6 déterminations à 100% ou 9 déterminations couvrant la gamme de validation (3 concentrations différentes répétées 3 fois chacune).  La répétabilité d’une méthode étant dépendante de la concentration, il est intéressant d’utiliser la 2ème procédure pour un dosage.

Gamme de validation

La gamme de validation (Validation range) est l’intervalle de concentration dans lequel la méthode est dite validée. En dehors de cette intervalle, la méthode n’est pas considérée comme validée.L’intervalle est définie lors de l’évaluation de la linéarité et de la justesse / exactitude.

Intérêt - Robustesse

La robustesse étudie l’influence de petites variations pouvant intervenir de façon aléatoire dans un laboratoire. Cette étude permet donc de prouver qu’une méthode est plus ou moins sensible aux aléas pouvant perturber les conditions d’utilisation d’une méthode.

Intérêt - Reproductibilité

La partie reproductibilité permet de justifier de l’indépendance de la méthode entre deux laboratoires. Très souvent, ce critère une fois validé est utilisé pour garantir le transfert de la méthode dans le deuxième laboratoire. La validation est alors appelée « co-validation ».

Prérequis

• Personnel formé, habilité au(x) test(s) à valider avant d’exécuter les analyses requises pour la validation selon BPF 2
• Qualification des équipements d’analyse par le service concerné (QC, QI, QO : cf Modules correspondants) selon BPF 12.82
• Méthode déjà développée et décrite dans un document du service concerné dans le système qualité du laboratoire selon ICH Q14
• Demande de changement (Change Control) à initier par le service demandeur selon BPF 13

Robustesse

La robustesse est étudiée en simulant volontairement des variations mineures de plusieurs paramètres (une variation à la fois). On étudie par exemple la variation mineure d’une longueur d’onde, d’un pH, d’une phase mobile ou d’une température de colonne.

Thermiques et thermogravimétriques

1) Analyse thermogravimétrique (technique ATG, ATG couplée à l’infrarouge FTIR)2) Analyse thermique différentielle (technique ATD)3) Calorimétrie à balayage différentielle (technique par calorimètre DSC – Differential Scanning Calorimetry)4) Chromatographie en Phase Gazeuse GC-MS5) Thermo-désorption (thermo-désorbeur TDU couplée à la chromatographie en phase gazeuse GCMS)6) Pyrolyse couplée à la GC-MS (Py-GCMS)

Spécificité / Sélectivité

La spécificité est la capacité de la méthode à démontrer que la réponse ne provient que du composé à analyser, même en présence d’autres composés tels que des impuretés, la matrice...Analyser de façon indépendante toutes les substances connues dans le produit fini et analyser ensuite le mélange produit fini et substances connues. Par exemple, en chromatographie, un dopage avec un standard de référence est couramment effectué dès le développement de la méthode.

Robustesse

La robustesse est étudiée en simulant volontairement des variations mineures de plusieurs paramètres (une variation à la fois). On étudie par exemple la variation mineure d’une longueur d’onde, d’un pH, d’une phase mobile ou d’une température de colonne.

Intérêt - Répétabilité

La répétabilité est le critère justifiant de la précision de la méthode d’analyse. En effet, il est primordial de prouver qu’une analyse répétée dans les mêmes conditions donne un résultat identique.

Intérêt spécificité / sélectivité

Il est important de prouver que le produit principal peut être analysé avec la même fiabilité qu’il soit seul ou en présence de ses produits secondaires. Une méthode spécifique justifiera de l’absence d’interférence lors de l’analyse du produit principal en présence de ses produits secondaires.

Change control

Le change control est un prérequis pour évaluer la nécessité d'effectuer une validation ou non.

Validation prospective

effectué avant commercialisation

La validation prospective est généralement effectuée avant de commencer la production de routine.

Elle est également considérée comme le type de validation fondamentale car elle constitue le point de départ de tout produit qui sera lancé dans de nouvelles conditions.

Intérêt - Linéarité

Une réponse analytique doit absolument être proportionnelle à la concentration de l’analyte. Une méthode linéaire permet d’assurer un résultat fiable sur une gamme de concentration. Par exemple, l’impureté B qui se retrouve toujours présente à des teneurs différentes suivant les lots d’un produit fini A, sera quantifiée avec la même précision indépendamment de la quantité de B dans A.

Reproductibilité

Démontre la fidélité inter laboratoire et représente la variation maximaleReproduire la partie répétabilité dans 2 laboratoires différents en y incluant plusieurs paramètres extérieurs changeant. Par exemple : technicien différent, jour différent et/ou équipement différent.

Gamme de validation

La gamme de validation (Validation range) est l’intervalle de concentration dans lequel la méthode est dite validée. En dehors de cette intervalle, la méthode n’est pas considérée comme validée.L’intervalle est définie lors de l’évaluation de la linéarité et de la justesse / exactitude.

Intérêt - Linéarité

Une réponse analytique doit absolument être proportionnelle à la concentration de l’analyte. Une méthode linéaire permet d’assurer un résultat fiable sur une gamme de concentration. Par exemple, l’impureté B qui se retrouve toujours présente à des teneurs différentes suivant les lots d’un produit fini A, sera quantifiée avec la même précision indépendamment de la quantité de B dans A.

Reproductibilité

Démontre la fidélité inter laboratoire et représente la variation maximaleReproduire la partie répétabilité dans 2 laboratoires différents en y incluant plusieurs paramètres extérieurs changeant. Par exemple : technicien différent, jour différent et/ou équipement différent.

Intérêt - Robustesse

La robustesse étudie l’influence de petites variations pouvant intervenir de façon aléatoire dans un laboratoire. Cette étude permet donc de prouver qu’une méthode est plus ou moins sensible aux aléas pouvant perturber les conditions d’utilisation d’une méthode.

Microbiologiques

1) Contrôle microbiologique des produits non stériles2) Contrôle des produits stériles3) Efficacité de la conservation antimicrobienne avec les souches de référence et/ou des souches sauvages4) Titrage des antibiotiques5) Monitoring environnemental6) Identification et caractérisation des micro-organismes

Linéarité

La linéarité est la capacité de la méthode à obtenir des résultats directement proportionnels à la concentration d’analyte dans l’échantillon (sur un certain intervalle)Analyser 5 concentrations minimum du produit principal, recouvrant la gamme de validation sélectionnée et en incluant la concentration nominale. Par exemple, évaluer la linéarité de la méthode à l’aide d’une régression linéaire.

Exactitude / Justesse

L’exactitude exprime l’étroitesse d’accord entre la valeur qui est acceptée comme la valeur vraie (ou une valeur de référence) et la valeur retrouvée par la méthode.L’exactitude (ou justesse) sera déterminée par comparaison d’une valeur de concentration théorique avec la valeur expérimentale exprimée sous forme de % de recouvrement. Par exemple en chromatographie, cette évaluation devra être confirmée sur 9 préparations minimum (en général 3 préparations sur 3 niveaux) en recouvrant la gamme de validation.

Physico-chimiques

1) Identification (colorimétrie, UV, IR, CCM...)2) Dosage de substances actives (HPLC, GC, titrimétrie, LC/MS, GC/MS, LC/MSMS, GC/MSMS...)3) Essai Limites et dosages quantitatifs d’impuretés4) Uniformité de teneur5) Recherche et analyse des solvants résiduels6) Recherche et analyse des impuretés élémentaires en ICP-MS7) Détermination de la teneur en eau par Karl Fischer / coulométrie8) Dosage de l’azote (Kjeldahl)9) Propriétés thermodynamiques (TGA / DSC)

Exactitude / Justesse

L’exactitude exprime l’étroitesse d’accord entre la valeur qui est acceptée comme la valeur vraie (ou une valeur de référence) et la valeur retrouvée par la méthode.L’exactitude (ou justesse) sera déterminée par comparaison d’une valeur de concentration théorique avec la valeur expérimentale exprimée sous forme de % de recouvrement. Par exemple en chromatographie, cette évaluation devra être confirmée sur 9 préparations minimum (en général 3 préparations sur 3 niveaux) en recouvrant la gamme de validation.

Seuil / Limite de détection
(LOD) 
Seuil / Limite de quantification (LOQ)

La LOD est la concentration la plus basse détectable. La LOQ est quant à elle la concentration la plus basse quantifiable. Ces seuils seront déterminés en analysant la substance à des concentrations de plus en plus faibles jusqu’à ses limites. Par exemple en chromatographie, afin de justifier l’atteinte de ces critères, le signal sur bruit peut être utilisé.

ICH Q2 - validation des méthodes analytiques et méthodologie

Cette Ligne directive internationale, créée en 1994, donne le cadre général pour la validation de toute méthode analytique (lien vers 4 types d’analyses)

• ICH Q2 révision 1 (Q2 R1) : version en vigueur de 2005 Elle combine deux lignes directrices : Q2 R1 = Q2A (paramètres de validation requis) + Q2B (méthodologie)

• ICH Q2 révision 2 (Q2 R2): en cours de relecture par membres ICH avant mise en application

Cette version élargie couvrira les méthodes analytiques à multiples variables (telles que la spectroscopie infrarouge FTIR, Raman, la Résonance Magnétique Nucléaire RMN, qui nécessitent des analyses statistiques à plusieurs variables), les méthodes spécifiques pour les produits biologiques et biotechnologiques aussi en accord avec le BPF.

Fidélité intermédiaire

Représente des variations intra-laboratoire : jours différents, analystes différents, équipements différents. Reproduire la partie répétabilité dans le même laboratoire en y incluant plusieurs paramètres extérieurs changeant. Par exemple : technicien différent, jour différent et/ou équipement différent.

Seuil / Limite de détection
(LOD)
 Seuil / Limite de quantification (LOQ)

Toute méthode d’analyse possède ses propres limites de fiabilité, précision, exactitude etc. La LOQ est généralement la concentration la plus basse de la gamme de validation. En ce qui concerne la limite de détection, elle est un moyen de pouvoir confirmer la présence d’une substance au sein d’un produit fini, sans pour autant pouvoir la quantifier.

Pharmaco-techniques

1) Dissolution2) Friabilité3) Désagrégation4) Viscosité (rotative ou capillaire) et rhéologie5) Densité et écoulement de poudre6) Dureté des comprimés7) Granulométrie (laser, tamis)…

Intérêt - Exactitude / Justesse

L’exactitude d’une méthode permet de déterminer l’écart entre la valeur analytique et la valeur dite « vraie ». Le dosage d’un produit fini par exemple, devra fournir des résultats très proches de la réalité. Les critères d’acceptation seront fixés en tenant compte de la spécification même du produit à analyser.

Intérêt - Fidélité intermédiaire

La partie fidélité intermédiaire permet de justifier de l’indépendance de la méthode avec des évènements extérieurs à la méthode elle-même au sein d’un même laboratoire. En effet, la méthode d’analyse doit être reproduite avec la même fiabilité indépendamment des conditions météorologiques, du technicien effectuant l’analyse ou de l’équipement (marque, modèle…) utilisé.

Étapes de validation

Une validation analytique requiert :

• Protocole approuvé
• Analyses selon protocole
• Rapport approuvé avec l’exploitation des résultats et conclusion sur la validation

Seuil / Limite de détection
(LOD) 
Seuil / Limite de quantification (LOQ)

La LOD est la concentration la plus basse détectable. La LOQ est quant à elle la concentration la plus basse quantifiable. Ces seuils seront déterminés en analysant la substance à des concentrations de plus en plus faibles jusqu’à ses limites. Par exemple en chromatographie, afin de justifier l’atteinte de ces critères, le signal sur bruit peut être utilisé.

Intérêt - Gamme de validation

La gamme de validation doit absolument être respectée car toute méthode analytique possède des limites d’utilisation. En effet, une méthode n’est parfois plus linéaire à très basse ou à très haute concentration par exemple. Il en est de même pour l’exactitude. La gamme de validation permet donc de fixer des limites d’utilisation de la méthode.

Intérêt - Fidélité intermédiaire

La partie fidélité intermédiaire permet de justifier de l’indépendance de la méthode avec des évènements extérieurs à la méthode elle-même au sein d’un même laboratoire. En effet, la méthode d’analyse doit être reproduite avec la même fiabilité indépendamment des conditions météorologiques, du technicien effectuant l’analyse ou de l’équipement (marque, modèle…) utilisé.

Validation simultanée

effectuée au cours du contrôle régulier

La validation simultanée démontre que l’analyse atteint le niveau requis au cours de son exécution réelle