Manual de Tinciones

Manual de tinciones

Alberto Mendoza Ortiz

Y técnicas para el estudio de la Histología Médica

MPSS y Técnico en Histopatología UNAM

01

03

06

02

04

05

Masson

HyE

Gallego

Carbohidratos

Sangre

Azul de Toluidina

07

09

08

12

10

11

Inmunohistoquímica

Impregnaciones

Van Gieson

Otras tricrómicas

Lípidos

Mielina

17

16

14

15

13

06

Repaso

Pentacrómicos

Papanicolau

MEB

Patológicas

MET

Objetivo 2

HyE

Se llama así por el uso de 2 colorantes

La tinción de rutina

• Hematoxilina

• Eosina

• Imagen negativa

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Tricrómica de masson

Tinción utilizada para distinguir:

• Epitelios y músculo

• Tejido conjuntivo

• Núcleos

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Tricrómica de gallego

Tricrómica similar a Masson, pero que utiliza diferentes colorantes para contrastar estructuras como:

• Núcleos

• Citoplasma y queratina

• Músculo y eritrocitos

• Tejido conjuntivo

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Mucicarmín de Mayer

Ácido Peryódico y reactivo de Schiff

Esta tinción pretende demostrar la presencia de carbohidratos y se contrasta con hematoxilina:

• Carbohidratos

• Núcleos

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Carmín de Best

Mayer

Mucicarmín de Meyer

Esta tinción pretende demostrar la presencia de carbohidratos y se contrasta con hematoxilina:

• Carbohidratos

• Núcleos

• Células epiteliales

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Mayer

Carmín de Best

Esta tinción pretende demostrar la presencia de carbohidratos y se contrasta con hematoxilina:

• Carbohidratos

• Núcleos

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Giemsa

Técnicas de ROMANOWSKY

Wriht

Técnica de Romanowsky modificada por James Wright quien propone el uso de metanol como disolvente y fijador para las soluciones acuosas:

• Núcleo celular

• Citoplasma

+ info

Técnicas originalmente descritas por Leonidovich Romanowsky que usan azul de metileno y eosina

Técnicas de ROMANOWSKY

Wrihgt

Giemsa

Técnica de Romanowsky modificada por Gustav Giemsa quien propone el uso de glicerol como destabilizador para las soluciones acuosas:

• Núcleo celular

• Citoplasma

+ info

Técnicas originalmente descritas por Leonidovich Romanowsky que usan azul de metileno y eosina

Azul de Toluidina

Tinción monocrómica que se basa en tonalidades de azul por su afinidad tintorial

• Estructuras ácidas

• Estructuras básicas

• Estructuras con grupos aniónicos

+ info

Sudán negro

Sudán III

Colorante lipófilo que al entrar en contacto con las grasas las contrasta de un color naranja brillante

• Lípidos

+ info

Requiere de muestras procesadas con técnicas que preserven las grasas

Sudán III

Sudán Negro

Colorante lipófilo que al entrar en contacto con las grasas las contrasta de un color negro

• Lípidos

+ info

Requiere de muestras procesadas con técnicas que preserven las grasas

Inmunohistoquímica de fluoresencia

Histoquímica enzimática

Se aprovechan enzimas que tras la fijación permanecen activas en el tejido y producen una reacción química que acumula cromóforos en los sitios de reacción

• Reacción enzimática

• Tejido sin reacción

+ info

Histoquímica Enzimática

Inmunohistoquímica de Fluoresencia

InmunoHistoquímica enzimática

El uso de anticuerpos para la detección de un antígeno (molécula) específica, al cual se le conjuga una enzima que reacciona para activar el colorante.

• Reacción positiva

• Contraste con hematoxilina

+ info

Inmunohistoquímica Enzimática

Inmunohistoquímica de Fluoresencia

Tiene un principio similar a la inmunohistoquímica enzimática, la diferencia es que se asocia una molécula fluorescente (fluoróforo) a los anticuerpos.

• Reacción negativa (Fondo)

reconocidos

genos

• Antí

+ info

Impregnaciones Argento-Áuricas

Impregnaciones argénticas

Depósitos de sales metálicas sobre tejidos que son suceptibles de retener estas sales, también llamados argirófilos o argentafines por su capacidad de captarlas.

• Estructuras argirófilas

• Estructuras argirófilas

+ info

Fontana Massón

Dafano

Recuerda que las impregnaciones argénticas NO son tinciones

Golgi

Cajal

Impregnaciones Argénticas

Impregnaciones argento-áuricas

Depósitos de sales metálicas sobre tejidos que son suceptibles de retener estas sales, también llamados argirófilos o argentafines por su capacidad de captarlas.

• Estructuras argirófilas

• Estructuras NO argirófilas

+ info

Pío-Hortega

Wilder

Metenamina de plata

ReYes Mota

Recuerda que las impregnaciones argénticas NO son tinciones

Luxol Fast Blue

10

Kluver Barrera

Tinción que resalta de forma específica la mielina presente en el tejido nervioso

• Mielina

• Neuronas y núcleos

• Sustancia de Nissl

+ info

Nissl

Kluver Barrera

10

Luxol Fast Blue

Tinción utilizada para el estudio de la mielina presente en el tejido nervioso, al no tener violeta de cresilo, sólo será en tonos azules esta tinción:

• Mielina

Nombre Apellido

• Neuronas

+ info

Objetivo 11

Luxol Fast Blue

10

Nissl

Tinción utilizada para el estudio de las neuronas en el tejido nervios y resaltar el RER, que forma la sustancia de Nissl por la afinidad del violeta de cresilo a las sustancias ácidas.

• Pericarion

• RER (sistnacia de Nissl) y Nucléolo

+ info

11

Tricrómica de Van Gieson

Tricrómica de uso general para la distinción de teidos ricos en queratina como los epitelios, sobre todo tiene gran utilidad en piel

• Núcleos

• Colágena

• Queratina

+ info

Objetivo 13

12

Tricrómica de Mallory Azan

Las tricrómicas (incluyendo a Masson) son técnicas empíricas, que permiten diferencial el tejido conjuntivo de los epitelios

• Núcleos / Músculo / Citoplasma

• Colágena

• Eritrocitos

+ info

Objetivo 13

12

Tricrómica de Gomori

Las tricrómicas (incluyendo a Masson) son técnicas empíricas, que permiten diferencial el tejido conjuntivo de los epitelios

• Músculo

• Colágena

• Citoplasma

• Núcleos

+ info

Ziehl-Neelsen

13

Gramm

Tinción "de rutina" en bacteriología para clasificar a las bacterias por las características de su membrana celular

• Bacterias Gram negativas

• Bacterias Gram negativas

• Bacterias Gram positivas

+ info

+ info

Grocott

Gram

13

Ziehl Neelsen

Técnica en bateriología ampliamente utilizada para teñir baterias que NO se tiñen bien con Gramm, gracias a las características de su pared, llamadas ácido alcohol resistente, como el bacilo Mycobacterium tuberculosis.

• Bacterias ácido alcohol resistentes

• Contrastante

+ info

Rojo Congo

Ziehl-Neelsen

13

Grocott

Impregnación argénitca que recuerda mucho a Metenamina de plata de Jones, se utiliza en micología por la pared celular argirófila de los hongos.

• Hongos

• Contraste

+ info

+ info

Objetivo 12

13

Rojo Congo

Tinción de amplio uso para el estudio de amiloidopatías, es decir, acúmulo de porteínas mal plegadas o de conformación anómala que tienden a acumularse

• Estructuras congófilas

+ info

+ info

14

Pentacrómica de Movat

Permite la distinción de 5 tejidos conjunitvos con una sóla técnica

• Núcleos y fibras elásticas

• Colágena y reticulina

• Mucina

• Músculo

• Epitelios

+ info

15

Papanicolau

Técnica revolucionaria que permite el daingóstico temrpano de lesiones premalignas y malignas de cáncer cervicouterino en muestras de citología exfoliativa cervical.

• Núcleos

• Células escamosas maduras (superficial)

• Células escamosas Inmaduras (basal)

Se requiere de una muestra obtenida por citología exfoliativa

+ info

Réplica por criofractura

16

Microscopía electrónica de Transmisión

El uso de fotones pone un límite al poder de resolución que podemos obtener con microscopio óptico, por lo que al cambiar a los electrones podemos aumentar este límite hasta los 0.2nm con el uso de electrones como fuente de luz

Nombre Apellido

• Electron-denso

• Electron-lúcido

+ info

Réplica por criofractura

16

Réplica por criofractura

Expetenda tincidunt in sed, ex partem placerat sea, porro commodo ex eam. His putant aeterno interesset at. Usu ea mundi tincidunt, omnium virtute aliquando ius ex. Ea aperiri sententiae duo. Est ei erat mucius quaeque. Ei his quas phaedrum, efficiantur mediocritatem ne sed, hinc oratio blandit ei sed. Blandit gloriatur eam et. Brute noluisse per et, verear disputando neglegentur at quo.

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17

Microscopía electrónica de Barrido

El uso de fotones pone un límite al poder de resolución que podemos obtener con microscopio óptico, por lo que al cambiar a los electrones podemos aumentar este límite hasta los 0.2nm con el uso de electrones como fuente de luz

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¿Para qué sirve Gallego?

Nos ayuda a diferenciar tejidos específicos

Gallego es una técnica que emplea el colorante carmín de índigo y fucsina de Zielh, que permite diferenciar:

• Rojo: Núcleos celulares
• Amarillo: Queratina y citoplasma
• Verde: Músculo y eritrocitos
• Azul/verde turquesa: Tejido conjuntivo

• Corte de epitelio de la vejiga urinaria teñido con tricrómico de Gallego
• Interactúa con los elementos táctiles para descubrir los detalles de la imagen.

La reacción con formol acético provoca una diferencia en la coloración de colágenas como en piel, dermis papilar y reticular.

¿Para qué sirve Ziehl-Neelsen

Identificar bacterias ácido alcohol resistentes

Las bacterias denominadas "ácido alcoohol resistente" o BAAR, son bacterias cuya pared es muy rica en ácidos micólicos que les confieren gran resisnteic a los ácidos, por lo que al contrastarse con Fucsina y ser someticas a lavados con alcohol adicionado con ácido clorhídrico no pierden su color magenta-rojizo, mientras que otros bacilos y células sin estos elementos, sólo serán coloreados por el contraste, el azul de metileno.

• Muestra de esputo teñida con Ziehl Nielsen donde se demuestra la presencia de micobacterias (bacilos ácido alcohol resistentes)
• Haz click en los elementos interacticvos para descubrir más información.

• Azul: Colorante de contraste

• Rojo-Rosado: BAAR (Click aquí)

¿Para qué sirve MM?

Demostrar la presencia de carbohidratos

Esta tinción utiliza hematoxilina férrica, amarillo de metilo y mucicarmín ácido de meyer, por lo que se observa

• Rojo pálido: Carbohidratos
• Amarillo: Células epiteliales
• Anaranjado: Células con pocos carbohidratos
• Negro/Pardo: Núcleos celulares

• Corte de glándula submaxilar con Mucicarmín de Mayer
• Haz click en los elementos interactivos para descubrir más

Tinción que contrasta elementos epiteliales con elementos mucinosos, útil para tumores productores de moco y hongos.

¿Para qué sirve Luxol Fast Blue?

Teñir mielina

El Luxol Fast Blue es un colorante con gran afinidad por las porfirias presentes en la mielina, lo que la hace un excelente método para resaltarla del resto del tejido nervioso.

• Azul obscuro: Mielina
• Azul pálido: citoplasma de las neuronas

• Corte de cerebelo teñido con Luxol Fast Blue
• Haz click en los elementos interactivos para descubrir más detalles

Esta tinicón es muy útil para mielonopatñias, es decir, enfermedades donde la mielina pierde su morfología normal y se afecta el sistema nervioso como la esclerosis lateral amiotrófica

¿Para qué sirve la Histoquímica enzimática?

Detectar la presencia de enzimas presentes en un tejido

Algunas enzimas se mantienen funcionales con el proceso de fijación, por lo que se puede aprovechar para que su reacción transforme una sustancia incolora en una con color:

• Pardo/negro: Pigmento acumulado por reacción positiva
• Café claro: Reacción inespecífica o poco abundante del tejido. considerada negativa.

• Histoquímica enzimática para canalículos biliares que demuestra la presencia de ATPasa.
• Haz click en los elementos interactivos para más detalles.

Pueden usarse colorantes contrastantes además de la histoquímica enzimática:

• Pardo/negro: Reacción positiva
• Rojo: Eosina Amarillenta. (Click aquí)

¿Para qué sirve Fontana-Masson?

Identificar melanina

La impregnación de Fontana-Masson permite identificar melanina por medio tejido oxidado con Yodo/Yoduro de potasio (solución de Gram) con de nitrato de plata 10% (solución de Fontana) contrastada con Safranina o Eosina. Se ve como resultado:

• Negro: Melanina y estructuras argirófilas

• Corte de piel delgada con impregnaicón de Fontana-Masson para identificar Melanina.
• Haz click en los elementos interactivos para descubrir más detalles

• Rosa: Estructuras acidófilas

El colorante de contraste es lo que provoca que a pesar de ser una tinción argéntica, no sea clásicamente con fondo amarillo pajizo.

¿Para qué se usa HyE?

¡Es la tinción de rutina!

HyE es una tinción muy versátil que se basa en la afinidad de sus colorantes para teñir las diversas estructuras:

• Hematoxilina: Colorante básico que se una a estructuras ácidas como el núcleo.

• Eosina: Colorante ácido que se une a estructuras básicas como el citoplasma.

• En la imagen vemos hepatocitos teñidos con HyE.
• Haz click en los elementos interactivos para obtener más información.

No tiene un uso específico, pero su amplia capacidad de unirse a diversas estructuras la hace muy útil.

Imagen negativa

A pesar de ser muy versátil, la tinción de HyE no es capaza de teñir varias sustancias, por lo que cuando veas espacios "en blanco" al ver una tinción de HyE, debes pensar en las siguientes posibilidades:

Glucoproteínas

• Carbohidratos o

• Lípidos: Adipocitos

• Aparato de Golgi: Célula plsamática

• Luz de estructuras huecas: Alveolos, vasos sanguíneos, conductos, etc.

¿Para qué sirve Van Gieson?

Distingue tejidos ricos en queratina

La tricrómica de van Gieson emplea la fucsina ácida que tiñe de magenta o rojo el colágeno del tejido conjuntivo y ácido pícrico que tiñe de amarillo fibras musculares, eritrocitos y fibras guíales.

• Magenta: Tejido conjuntivo (Colágena)
• Amarillo: Queratina, músculo y fibras gliales

• Corte de piel cabelluda que muestra folículos pilosos teñidos con tricrómica de Van Gieson.
• Haz click para descubrir más detalles

Se usa la hematoxilina férrica de Weigert que confiere un color pardo o negro a los núcleos:

• Pardo/Negro: núcleos celulares

¿Para qué sirve PAS?

Demostrar la presencia de carbohidratos

Esta tinción se basa en la creación de grupos de aldehído a partir de carbohidratos que reaccionan con el ácido peryódico para poder incorporar el colorante, el reactivo de Schiff y así evidenciar carbohidratos y se contrasta con hematoxilina:

• Magenta: Carbohidratos
• Morado: Núcleo celular

• Corte de intestino delgado teñido con PAS
• Haz click en los elementos interactivos para descubrir más

Un tip para distinguir PAS de HyE son los eritrocitos, muy pálidos con PAS y rojo escarlata en HyE.

¿Para qué sirve la Imnunohistoquímica?

Demuestra un antígeno en el tejido

Un antígeno es cualquier molécula que es reconocida por el sistema inmune y por lo tanto, ser reconocida por anticuerpos de forma específica. Al agregar este anticuerpo asociado a una enzima, podemos "revelar" este antígeno con la reacción es pecífica:

• Rojo/Pardo: Reacción enzimática positiva asociada al anticuerpo que reconoce un antígeno.

• Corte de mucosa gástrica con marcaje por inmunohistoquímica enzimática para pepsinógeno, exclusivo de células principales.
• Haz click en los elementos interactivos para más detalles.

Para no "navegar a ciegas" en un mar pardo de antígeno, se suele contrastar con hematoxilina:

• Azul: Estructuras basófilas teñidas con hematoxilina.

¿Para qué sirve Cajal?

Observación de tejido Nervioso

La impregnación de Gogli permite se basa en la preparación previa del tejido con una solución débil de nitrato de plata y después reducirla con piogalol o hidroquinona, para después tener una doble impregnación con plata amoniacal o nitrato de uranio Observe como esta técnica permite un detalle al interior de las neuronas así como un contraste al tejido más nítido.

• Asta anterior de la médula espinal procesada mediante impregnaicón argéntica de Cajal

¿Para qué sirve Sudán III?

Tiñe lípidos

Sudán III es un colorante naranja brillante liposoluble que al entrar en contacto con las grasas se observa:

• Naranja intenso: Lípidos

Las muestras en las que se busca observar lípidos deben ser procesadas con técnicas que preserven lípidos, como es el caso del criomicrotomo, ya que el la técnica de rutina remueve las grasas. Suele usarse un contrastante como hematoxilona para tener como referente otras estructuras:

• Adipocitos procesados con criomicrotomo y teñidos con Sudán III contrastado con hematoxilina.

• Azul claro: Núcleos

¿Para qué sirve el MET?

Permite el detalle de la ultraestructura celular en "2D"

Para el estudio de la ultraestructura, detalles solamente visible con el microscopio electrónico, se requieren muestran tan delgadas como 60-100nm de grosor obtenidas con el ultramicrotomo, después se irradia con una fuente de electrones como tungsteno excitado por una corriente eléctrica al vacío, dirigidos por lentes formadas por campos electromagnéticos y se observan varios fenómenos como:

ultramicrotomo

• Contraste de amplitud: Por absorción de electrones

• Micrografía observada con microscopía electrónica de transmisión de una mitocondria y cisternas del retículo endoplásmico rugoso.
• Recuerda que estas preparaciones NO tienen tinción, pero se contrastan con metales pesados como tetraóxido de osmio

• Contraste de fase: Electrones desacelerados

• Rayos Difractados: En elementos cristalinos

• Rayos X: Revela la composición de la muestra

Los electrones son captados por varios sensores, interpretados para formar una imagen en una pantalla.

¿Tienes una idea?

¡Que fluya la comunicación!

Con las plantillas de Genially podrás incluir recursos visuales para dejar a tu audiencia con la boca abierta. También destacar alguna frase o dato concreto que se quede grabado a fuego en la memoria de tu público e incluso embeber contenido externo que sorprenda: vídeos, fotos, audios... ¡Lo que tú quieras! ¿Necesitas más motivos para crear contenidos dinámicos? Bien: el 90% de la información que asimilamos nos llega a través de la vista y, además, retenemos un 42% más de información cuando el contenido se mueve.

• Genera experiencias con tu contenido.
• Tiene efecto WOW. Muy WOW.
• Logra que tu público recuerde el mensaje.
• Activa y sorprende a tu audiencia.

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¿Para qué sirve Sudán negro?

Evidencia los lípidos

• Muestra de adipocitos procesada mediante criomicrotomo para conservar las grasas.
• Haz click en los elementos interactivos para descubrir más infromación

¿Para qué sirve Masson?

Ayuda a diferenciar tejidos básicos

Tinción tricrómica que contrasta los tejidos con los que producen 3 tonalidades:

• Rojo: Tiñe tejido epitelial y muscular por la tinción de proteínas
• Azul: Tiñe el colágeno distintivo del tejido conjuntivo y el moco.
• Negro: Se tiñen los núcleos celulares por el uso de hematoxilina férrica.

• Se observa un corte de lengua teñido con tricrómico de Masson
• Interactúa con los elementos táctiles para descubrir sus características

Esta tinción es de utilidad para cuantificar vasos sanguíneos presentes en el tejido conjuntivo en muestras para cáncer.

¿Para qué sirve Pío del Río Hortega?

Gran detalle a las fibras reticulares

Pío del Río Hortega innova con su impreganicón argéntica introduciendo el carbonato de plata, ya que permite gran detalle al citplasma celular así como un realce muy específico de fibras reticulares (lo más mencionado en nuentro Atlas), sin embargo, esta técnica permitió la tipificación del oligodendocito y de la microglía en 1930.

• Corte de hígado donde se evidencia con gran detalle el citoplasma del hepatocito así como las fibras reticulars en negro intenso.

• Negro: Fibras reticuares

• Morado: Tonificaicón que da el cloruro de oro

¿Para qué sirve Reyes-Gallego?

Evidenciar fibras elásticas

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• Corte de Aorta donde se distinguen claramente las láminas elásticas aórticas procesada mediante la técnica de Reyes-Gallego.

¿Para qué sirve Metenamina de Plata?

Identifica membrana basal

Esta técnica emplea el ácido peryódico de Schiff (como en la tinción de PAS) que forma grupos aldehidos en los carbohidratos de membranas basales a los que se pueden unir las sales de plata (metenamina de plata), se logra mayor definición usando cloruro de oro y se agrega la coloración de contraste con Verde Claro (Verde luz) o incluso con el propio reactivo de Schiff en el método PASM.

• Corte de corteza renal con impregnaicón argéntica de metenamina de plata

• Negro: Membranas basales y carbohidratos

• Verde: Estructuras afinas al verde claro como células epiteliales

PASM: Ácido peryódico, reactivo de Schiff y Metenamina de Plata (Click aquí)

Hematoxilina

Colorante extraído a partir del palo de Campeche (Hematoxylum campechianum). Tiene un caracter básico, por lo tanto, es afín a estructuras ácidas en combinación con sales de metales divamentes como el aluminio y hierro que actúan como mordientes.

• Las estructuras ácidas o de carga negativa (aniónicas), son muy afines a la hematoxilina y se teñirán de morado.
• Las estructuras afines a la hematoxilina se denominan basófilas

¿Para qué sirve Mallory?

Distingue epitelios/músculo de tejido conjuntivo

A pesar de que aún no conocemos del todo el mecanismo exacto por el cuál las tricrómicas tiñen como lo hacen a los tejidos, son muy útiles para distinguir el tejido epiteial y muscular del conjuntivo, teniendo en el caso de Mallory una gama de colores:

• Rojo: Citoplasma, núcleos, músculo y epitelios

• Corte de de Lengua teñido con tricrómica de Mallory
• Haz click sobre los elementos interactivos para descubrir más detalles

• Azul: Tejido Conjuntivo

• Rojo intenso: Eritrocitos

Un tip para diferenciar Mallory de Masson, es notar la coloración naranja de eritrocitos (naranja G) y los núcleos rojos en vez de pardos.

¿Para qué sirve Grocott?

Identificar hongos

Grocott tiene un fundamento muy similar a la metenamina de Jones (en el apartado impregnaciones argento-áuricas) ya que aprovecha la abundancia de carbohidratos en la pared micótica, por lo que el ácido peryódico puede generar grupos aldehídos a partir de estos para precipitar la metenamina de plata y se tonifica con cloruro de oro para mejorar la tinción, observando:

• Corte de pulmón que demuestra la presencia de levaduras de Candida spp. en los alveolos pulmonares.
• Haz click en los elementos interactivos para más información

• Negro: Hongos y estructuras argentafines

• Verde turquesa: tinción de contraste con verde luz

¿Para qué sirve Giemsa?

Observar sangre y médula ósea

La tinción de Giemsa tiene un principio similar a Wright, ya que emplea un colorante catiónico (Azul de metileno) y un colorante aniónico (Eosina) pudiendo observar:

• Azul: Núcleos, ergastoplasma, gránulos azurófilos, plaquetas.
• Rosa: Citoplasma, gránulos eosinófilos

• Frotis sanguíneo teñido con Giemsa.
• Haz Click en los elementos interactivos para descubrir más.

La ventaja de giemsa sobre Wright es que puede usarse un método lento (Solución al 3%) o rápido (Solución al 10%) depende de los recursos y tiempo del que se disponga. Muy útil en sospecha de malaria.

¿Para qué sirve Papanicolau?

Diagnóstico citológico

El uso más extendido del Papanicolau sin duda es la citología exfoliativa cervical que permite un diagnóstico precoz del carcinoma cervicouterino, sin embrago esta tinción es muy ampliamente usada para diangístico de otras muestras de citología como orina, líquido cerebroespinal, sinovial, BAAF, entre otras

Su gran versatilidad es gracias a sus colorantes:

• Citología exfoliativa cervical que muestra un resultado patológico.
• Haz click en los elementos interactivos para obtener más información.

• Hematoxilina: Núcleos en morado

• OG-6: Orange green, colorante ácido que tiñe queratina

• EA-50: mezcla de colorantes como:

1. Eosina amarillenta: Rosa - Células maduras

2. Verde Luz: Células inmaduras no superficiales

3. Pardo Bismark: Tiñe mucina

¿Para qué sirve Kluver Barrera?

Tiñe mielina

Kluver Barrera es una tinción que combina los colorantes Luxol Fast Blue que presenta gran afinidad a las porfirinas de la mielina y se une a estructuras fosfolipídicas como lecitina y mielina; además el empleo de violeta de crescilo para resaltar las neuronas

• Azul celeste: Mielina
• Rosa/Violeta: Neuronas

• Corte de médula espinal teñido con Kluver Barrera
• Haz click en los elementos interactivos para descubrir más detalles.

Kluver Barrera es una tinción que combina los colorantes Luxol Fast Blue que presenta gran afinidad a las porfirinas de la mielina y se une a estructuras fosfolipídicas como lecitina y mielina; además el empleo de violeta de crescilo para resaltar las neuronas

¿Para qué sirve Gram?

Clasificación bacteriana

Tinción que aprovecha las características de la membrana bacteriana para agruparlas en:

• Gram positivas: Púrpuras o moradas

• Gram negativas: Rosadas a rojas

Las bacterias Gram positivas (púrpuras) tienen una membrana gruesa rica en peptidoglucano que "atrapa" al cristal violeta o violeta de genciana, mientras que las Gram negativas son relativamente povres en peptidoglucano, por lo que al lavar con alcohol acetona se "decolora" y sólo se tiñe con el colorante de contraste, la Safranina o Fucsina

• Extendido de bacterias donde se aprecian bacilos Gram positivos y negativos.

¿Para qué sirve la Imnunohistoquímica de fluorescencia?

Demuestra un antígeno en el tejido

Tiene un fundamento muy similar a la inmunohistoquímica enzimática, pero en este caso, los anticuerpos se asocian a fluoróforos, es decir, moléculas que al ser estimulados con luz UV, emiten una respuesta con longitudes de onda mayores, produciendo una extensa gama de colores en las estructuras reconocidas y un fondo negro en las áreas carentes de tejido reconocido.

• Fibroblastosprocesados con DAPI y 2 anticuerpos para A) Ácidos nucleicos (Azul-DAPI), B) Microtúbulos (verde) y C) Actina (rojo)

• Haz click en los elementos interactivos para más detalles.

• Negro: Reacción negativa (tejido sin el antígeno de interés)
• Color: reacción positiva, el color depende del fluoróforo usado.

¿Para qué sirve rojo congo?

Estudio de amiloidopatías

El amiloide son depósitos de proteínas anómalas en los tejidos que no pueden ser eliminadas, lo cual provoca daño por acumulación y despolazamiento del tejido normal, el rojo congo, gracias a su pacácter aniónico, presenta una gran afinidad por este formando puentes de hidrógeno y depositándose

• Rojo intenso: Estructura congófila, como amiloide o colágeno
• Rojo pálido: Estructura no congófila

• Corte de riñón teñido con rojo congo.
• Haz click en los elementos interactivos para descubrir más detalles

A la microscopía de luz polarizada el amiloide se distingue del colágeno por su birregringencia

• Monorrefringencia: No amiloide
• Birrefringencia: Amiloide

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¿Para qué sirve Wilder?

Evidencia fibras elásticas

Técnica basada en la oxidación del tejido con ácido fosfomolíbdico y reacción del nitrato de uranilo con nitrato de plata seguido de tonificación con cloruro de oro para realzar la impregnaicón, quitando el exceso con tiosulfato de sodio. Permite observar las fibras reticulares compuestas de colágeno tipo III, formas fibras delgadas muy ramificadas y altamente glicosiladas:

• Corte de hepatocitos impregnado con Wilder para demostrar fibras reticulares

• Negro: Fibras reticulares

• Morado: Tonificación dada por el cloruro de oro al tejido no imoregnado con plata

¿Para qué sirve Movat?

Diagnóstico en cardiología

La pentacrómica de Movat modificada por Rusell es una técnica altamente socorrida en cardiología y neumología, ya que permite la disticnión de cambios sutiles en el tejido conjuntivo por medio de 4 tinciones:

• Azul alciano: identifica mucina en azul celeste

• Imoregnaicón de Verhoeff: identifica en negro fibras elásticas y núcleos

• Corte de pulmón donde se aprecia una sección de bronquio teñida con pentacrómica de Movat

• Fucsina escarlata ácida: Músculo en rojo

• Safranina: amarillo: Fibras colágenas y reticulina

¿Para qué sirve Nissl?

Estudio de la estructura neutonal

La tinción de Nissl emplea violeta de cresilo o azul de metileno, ambos con afinidad a sustancias ácidas como la de los núcleos (ADN) y RER (ribosomas), por lo que sirve para resaltar las neuronas, ya que poseen un priminente RER que conforma la sustancia de Nissl.

• Morado obscuro: RER (sustancia de Nissl)
• Violeta claro: Citoplasma neuronal (pericarion)

• Corte de médula espinal teñido con Nissl.
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Esta ticnión tiene especial utilidad para evaluar la arquitectura y distribución enlas diferentes áreas del sistema nervioso, observe la imangen de portada que se de un corte de hipocampo de ratón.

¿Para qué sirve Gomori?

Distingue epitelios/músculo de tejido conjuntivo

A pesar de que aún no conocemos del todo el mecanismo exacto por el cuál las tricrómicas tiñen como lo hacen a los tejidos, son muy útiles para distinguir el tejido epiteial y muscular del conjuntivo, teniendo en el caso de Gomori una gama de colores:

• Rojo: Citoplasma, núcleos, eritrocitos

• Corte de cartílago elástico teñido con tricrómica de Gomori
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• Verde turquesa: Tejido Conjuntivo

• Magenta: Músculo

• Azul/negro: núcleos

Un tip para diferenciar Gomori de Masson, es notar la coloración verde turquesa del colágeno y el magenta en vez del rojo

¿Para qué sirve Gogli?

Observa la estructura tridimensional del tejido nervioso

Se fundamenta en la creación de depósitos opacos intracelulares de cromato argéntico por la reacción entre el bicromato de potasio y nitrato de plata en tejido previamente tratado con tetra-óxido de osmio. Permite observar:

• Negro: Neuronas, astrocitos, vasos sanguíneos

• Pardo/Amarillo: resto del tejido

• Neuronas granulares del hipocampo procesadas mediante impregnaicón argéntica de Golgi

Eosina

Colorante sintético resultado de la reacción entre bromo y fluoresceína. Tiene un caracter ácido, por lo tanto, es afín a estructuras básicas que presentan carga negativa, como lo son las proteínas, por lo que estas son consideradas acidófilas.

• Las estructuras básicas o de carga positiva (catiónicas), son muy afines a la eosina y se teñirán de rosado/rojo.
• Las estructuras afines a la eosina se denominan acidófilas o eosinófilas.

¿Para qué sirve el azul de toluidina?

Observar cortes semifinos

El azul de toluidina es un colorante catiónico (básico) que por su afinidad tintorial provoca una gama de tinalidades azules con las estructuras:

• Azul obscuro: Estructuras ácidas (núcleo)
• Azul claro: Estructuras básicas (Citoplasma)

Sin embargo, cunado hay estructuras ricas en grupos aniónicos (ácidos) provoca metacromasia.

• Corte de riñón teñido con azul de toluidina

• Rojo: Metacromasia (click aquí)

¿Para qué sirve Carmín de Best?

Demostrar glucógeno

El carmín de best es un colorante de origen animal de las cochinillas, se usa con un mordiente de aluminio o litio para demostrar carbohidratos como el glucogeno:

• Rojo/Magenta: Glucógeno y mucinas.

Puede llegar a utilizarse hematoxilina alumínica como contrastante para evidenciar los núcleos:

• Corte de hígado procesado con Carmín de Best para demostrar glucógeno
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• Morado: Núcleos Celulares

¿Para qué sirve Da Fano?

Resalta el aparato de Golgi

Impregnación argéntica que resalta de forma selectiva el aparato de Golgi, mismo que muestra una gran afinidad por las sales de plata utilizadas en esta técnica, con la cual podemos observar:

• Blanco: cuando vemos una zona blanca en el centro de las neuronas, podemos decir que s el núcleo en tinción negativa
• Café claro: Tejido levemente argentafín que corresponde con el citoplasma
• Negro: Las zonas más afines a la plata se resaltan intensamente, revelando un abundante aparato de golgi en las neuronas

• Neuronas ganglionares procesadas mediante la técnica de Da Fano que muestra el aparato de Gogli.
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¿Recuerdas cómo se ve Gogli con HyE? (Click aquí)

¿Para qué sirve Wright?

Observar sangre y médula ósea

La tinción de Wright tiene un principio similar a HyE, ya que emplea un colorante catiónico (Azul de metileno) y un colorante aniónico (Eosina) pudiendo observar:

• Azul: Núcleos, ergastoplasma, gránulos azurófilos
• Rosa: Citoplasma, gránulos eosinófilos

• Frotis sanguíneo teñido con Wright
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Su principal uso es en las muestras hemátológicas de sangre y médula ósea, pero puede usarse para distinguir eosinófilos en orina en nefritis intersticial o tinción de cromosomas en un cariotipo.

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