BIOLOGÍA CELULAR E HISTOLOGÍA

La célula

Dra. Karen Adriana Mokay Ramírez

BIOLOGÍA CELULAR

Anteriormente citología, del griego κύτος, que significa ‘célula’; ​ es una rama de la biología que estudia la estructura, la función y el comportamiento de las células. La biología celular abarca tanto las células procariotas y eucariotas e incluye el estudio del metabolismo, comunicación, ciclo, bioquímica, composición e interacción con el ambiente.

TEORÍA CELULAR

HISTOLOGIA

Rama de la anatomía que estudia los tejidos de animales y plantas. Aunque el término anatomía microscópica no es sinónimo, se utilizan indistintamente para referirse al estudio de la estructura microscópica de células, tejidos y órganos o sistemas.

HISTOLOGIA EN EL DiAGNOSTICO CLÍNICO

Las principales técnicas de histología implican el uso de varias tinciones químicas para estudiar muestras de tejido. La histopatología implica la aplicación clínica de métodos histológicos para examinar las células y los tejidos enfermos con fines diagnósticos; para identificar patógenos, metales pesado y toxinas.

TINCIÓN EN HISTOPATOLOGÍA

Numerosas técnicas de tinción se desarrollaron inicialmente de una forma empírica para analizar cortes de tejido. En la actualidad, las tinciones se han centrado en reconocer los núcleos, citoplasma, RER, aparato de Golgi y organelos específicos.

IMPORTANCIA DE LA TINCIÓN HISTOLÓGICA NORMALIZADA

El diagnóstico mediante citología, histología e inmunohistoquímica depende del colorante, la tinción o la sonda inmunológica que se une a las estructuras químicas celulares o tisulares fundamentales y que indican la arquitectura o el estado de salud de las células.

histotecnología

La histotecnología es considerada la ciencia que estudia los fundamentos técnicos y la secuencia de las manipulaciones necesarias para llevar a cabo el análisis de los tejidos de los seres vivos.

objetivos básicos de la histotecnología

• Producir cortes delgados conservando la morfología, a fin de que logren ser observados con la máxima resolución de los microscopios.
• Conservar las características biológicas y químicas de las células y tejidos para que sean estudiados utilizando métodos especializados.
• Permitir que se estudien en un solo corte la mayor parte de las estructuras celulares y tisulares.
• Conocer la correlación entre la morfología y la función de las estructuras celulares y tisulares.

pasos de la tecnica histológica

Recogida de la muestra. Fijación. Recepción y registro de la muestra. Descripción macroscópica y corte. Inclusión de la muestra.

pasos de la tecnica histológica

Confección de los bloques Corte histológico – Microtomía. Tinción de los cortes. Montaje de la preparación histológica. Observación al microscopio y diagnóstico.

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MICROSCOPIO

MICROSCOPIO

El microscopio (del griego μικρός micrós, ‘pequeño’, y σκοπέω scopéo, ‘mirar’)​ es una herramienta que permite observar objetos muy pequeños o definidos que no se pueden observar a simple vista. El tipo más común y el primero que fue inventado es el microscopio óptico.

MICROSCOPIA

(1) Ocular(2) Tubo (3) Cabezal (4) Revolver (5) Objetivo (6) Platina (7) Pinzas para sujetar el portaobjetos (8) Condensador (9)Fuente luminosa con diafragma

(10) Base o pie (11) Interruptor (12) Brazo (13) Macrométrico (14) Micrométrico (15 y 16) Mandos para de desplazamiento de la platina (17) Botón regulador de intensidad.

TIPOS DE MICROSCOPIOS

Microscopio simple

Estereomicroscopio

Microscopio óptico

Microscopio de contraste de fases

Microscopio compuesto

Microscopio de luz ultravioleta

Microscopio electrónico

Microscopio de efecto túnel

Microscopio estereoscópico

Microscopio confocal

Microscopio de iones en campo

Microscopio de campo oscuro

Microscopio de sonda de barrido

Microscopio campo luminoso

Microscopio de fuerza atómica

Microscopio virtual

El proceso de montaje tiene como finalidad que las muestras que han sido teñidas puedan ser observadas de manera óptima al microscopio y puedan mantenerse en excelentes condiciones de conservación.

Consiste en dar dureza homogénea al tejido para poder ser cortado con el microtomo y poder ser observado en el microscopio. Esta dureza se consigue mediante la inclusión en un medio sólido, como la parafina, que es una sustancia cérea que a temperatura ambiente es sólida.

• Formaldehído: Generalmente en forma de formalina al 10%, es el fijador más común. Preserva bien las proteínas y mantiene la estructura del tejido. • Glutaraldehído: Utilizado en microscopía electrónica por su capacidad de fijar membranas celulares con alta precisión. • Bouin: Una mezcla de ácido pícrico, formaldehído y ácido acético, útil para fijar tejidos ricos en colágeno y muestra buena conservación de los detalles morfológicos. • Etanol: Fijador utilizado principalmente en citología y fijación rápida de tejidos pequeños. Ácido acético: Mejora la fijación de los núcleos celulares, generalmente en combinación con otros fijadores.

Toma del tejido de interés del paciente para su estudio, ya sea una biopsia en la que obtenemos la muestra de un individuo vivo, o un estudio histopatológico donde se realiza un muestreo de varios o todos los órganos después de una necropsia previa.

• Hematoxilina: Tiñe los núcleos celulares de azul o púrpura debido a su afinidad por los ácidos nucleicos.
• Eosina: Tiñe el citoplasma y los componentes extracelulares (como el colágeno) en tonos rosados o rojos.
• Tricrómica de Masson: Diferencia componentes del tejido conectivo. Colorea colágeno de verde o azul, núcleos en negro y citoplasma en rojo.
• Ácido periódico de Schiff (PAS): Tiñe carbohidratos y moco en tonos magenta. Útil para visualizar glucógeno, membranas basales y mucinas.
• Tinción de Wright-Giemsa: Para frotis sanguíneos y médula ósea. Colorea los núcleos de púrpura y los citoplasmas de diversos tonos.

El montaje protege la sección teñida y la preserva para observación al microscopio.

• • Bálsamo de Canadá: Un medio tradicional para montar las muestras. Se utiliza para preservar la muestra bajo el cubreobjetos.
• Entellan: Resina sintética utilizada para montar las muestras después de la tinción. Es un sustituto común del bálsamo de Canadá.

La finalidad es detener la vida de las células e impedir las modificaciones post morten que pueda sufrir la célula (procesos autolíticos), manteniendo la estructura morfológica de células y tejidos sin que ocurran cambios notables en ellos

ORGANELOS

Cuando llega la muestra, se le asigna un número interno del laboratorio y se registra:

• Tipo de muestra (fecha de biopsia y fecha de recepción)
• Tipo de fijador
• Datos completos del paciente
• Estudio a realizar

Reactivos para aclaramiento: Después de deshidratar, el tejido se trata con un reactivo que es miscible con la parafina. • Xilol: Es el reactivo aclarador más común. Permite que el tejido se vuelva transparente y se mezcle con la parafina. • Tolueno: Alternativa al xilol, con propiedades aclaradoras similares. • Cloroformo: También utilizado en algunas técnicas, pero menos común debido a sus propiedades tóxicas.

• Mediante la biopsia

• Incisional
• Excisional
• Por sacabocados
• Por punción y absorción
• Por raspado
• Por trepanación
• Mediante necropsia

Reactivos para inclusión Los reactivos de inclusión facilitan la infiltración del tejido en un medio que permita su corte en secciones delgadas. • Parafina: El medio de inclusión más usado. Es una cera que se funde a temperaturas entre 56-58°C, y que endurece el tejido para permitir cortes finos. Resinas plásticas: Utilizadas en microscopía electrónica para incluir tejidos con un mayor nivel de detalle estructural.

• Hematoxilina: es un colorante básico que reacciona con las estructuras de carácter ácido (núcleo azul-púrpura a negro).
• Eosina es un colorante ácido que reacciona con las estructuras de carácter básico (citoplasma rosa a rojo).

El examen macroscópico comienza con la observación y caracterización de los hallazgos anormales. Se describe sus dimensiones y las lesiones que contiene, aspecto, coloración. Seleccionan las zonas más significativas de las lesiones halladas sobre las que va a realizarse el estudio microscópico y se realiza el corte en pequeñas porciones .

• Bloque sólido
• Superficie fría a 4 °C
• Orientación de la muestra.

Reactivos para deshidratación: La deshidratación es el proceso de eliminar el agua del tejido. Los alcoholes se utilizan como solventes deshidratantes. • Etanol (70%, 80%, 90%, 100%): El alcohol etílico es el más utilizado, aplicándose en concentraciones graduales para evitar la contracción brusca de los tejidos. • Isopropanol: Alternativa al etanol, con una eficacia similar en la deshidratación.