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CRECIMIENTO CELULAR

Erendira Villalobos

Created on May 23, 2023

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Transcript

CRECIMIENTO CELULAR

Dra. Erendira Villalobos Sánchez

CICLO CELULAR

LA TEORIA CELULAR EXPRESA QUE TODAS LAS CÉLULAS SE FORMAN A PARTIR DE CÉLULAS PREEXISTENTES. CUANDO UNA CÉLULA DE DIVIDE LA INFORMACIÓN GENÉTICA CONTENIDA EN EL ADN, ÉSTE DEBE DUPLICARSE DE MANERA PRECISA Y LUEGO CADA COPIA SE TRASMITE A CADA CELULA HIJA.

CICLO CELULAR

El ciclo celular comprende toda una serie de acontecimientos o etapas que tienen lugar en la célula durante su crecimiento y división.

Una célula pasa la mayor parte de su tiempo en la etapa llamada interfase, y durante este tiempo crece, duplica sus cromosomas y se prepara para una división celular. Las células resultantes, llamadas células hijas, empiezan sus respectivas etapas de interfase y empiezan así una nueva serie de ciclos celulares.

DIVISIÓN CELULAR

Una célula produce 2 células hijas - Crecimiento -Reemplazo de células -Reparación de heridas -Reproducción

G1- Durante la fase G1, la célula se duplica en tamaño, copia organelos y hace componentes celulares.

CICLO CELULAR

El ciclo celular representa el mecanismo fundamental subyacente a la reproducción de todos los seres vivos, y se divide en etapas, a través de las cuales la célula pasa de una división celular a la siguiente. Estos acontecimientos se realizan mediante una secuencia ordenada de procesos en los que la célula duplica su contenido y luego se divide en dos.

S- La célula hace una copia identica de ADN en su núcleo y duplica el centrosoma
INTERFASE (95%)
G2- La célula crece más, sintetiza más proteínas y organelos y reorganiza el ADN para ´prepararlo para la mitosis.
MITOSIS
5%

MITOSIS

Es quizás la más compleja y la que supone una mayor reordenación de los componentes celulares. Durante esta fase se separan todos los componentes celulares en dos partes para formar dos células nuevas e independientes.

MITOSIS

Tiempo de duplicación

El ciclo celular de los distintos tipos celulares dentro de un tejido o de un organismo debe estar fuertemente controlado y coordinado. Durante el desarrollo embrionario y juvenil los animales crecen en tamaño y muchos tipos celulares contribuyen a ello, por tanto la frecuencia con la que entran en el ciclo celular es alta

MITOSIS

Es quizás la más compleja y la que supone una mayor reordenación de los componentes celulares. Durante esta fase se separan todos los componentes celulares en dos partes para formar dos células nuevas e independientes.

Senescencia celular

a senescencia celular (SC) es un fenómeno que tradicionalmente se ha caracterizado por la detención de la proliferación de células postmitóticas como respuesta a algún tipo de daño El envejecimiento puede definirse como la acumulación de todos los cambios a nivel celular que representan fallos o pérdida de la función para la que fue diseñada o ralentización en sus procesos.

Defectos de mantenimiento de los telómeros, oncogenes activados, estrés oxidativo, disfunción mitocondrial o modificaciones epigenéticas. Las células senescentes no proliferan –posiblemente para evitar la propagación de células dañadas–, pero siguen siendo viables y metabólicamente muy activas.

Desarrollo

muerte celular

La muerte celular es una parte fundamental del ciclo vital de la célula y la regulación apropiada de este proceso es crucial para mantener la regulación homeostática de un organismo multicelular.

Las células pueden ser eliminadas en cualquier momento de su ciclo celular. Esta eliminación puede estar mediada por mecanismos internos celulares o por la acción de agentes externos. Con base en criterios morfológicos y bioquímicos, en las células eucariotas se han definido tres clases de muerte celular: apoptosis, autofagia y necrosis.

Anexo

NECROSIS

APOPTOSIS

Muerte de células o tejido debido a una enfermedad o lesión.

La apoptosis es una forma de muerte celular programada, o "suicidio celular"

Anexo

Diferencias Necrosis y Apoptosis

AUTOFAGIA

Proceso por el que la célula descompone y destruye proteínas viejas, dañadas o anormales, y otras sustancias en su citoplasma (líquido en el interior de la célula). Los productos de la descomposición se reciclan para funciones celulares importantes, en especial durante períodos de estrés o ayuno.

Crecimiento de celulas en cultivo

Crecimiento de celulas en cultivo

Viabilidad celular

El concepto de viabilidad celular hace referencia a la cantidad de células sanas en una población y puede evaluarse utilizando ensayos que permitan determinar la actividad enzimática, la integridad de la membrana celular y la producción de ATP, entre otros indicadores.

Hemocitometro

Tiene dos areas de conteo separadas,cada una debe contar con 0.1mm3 de muestra celular recubierta por un cubreobjetos de grosor especial.

Dilución de las células

Añadir 50ul de suspención celular en un tubo eppendorf y diluir con 50ul de colorante azul tripano. Esto corresponde a una dilución 1:2 Factor de dilución 2 Tomar 10ul para el llenado de cada lado de la cámara.

Método de tinción por exclusión.

Las células vivas o tejidos con la membrana celular intacta no se colorean debido a que la membrana celular es selectiva respecto a qué compuestos pueden atravesarla

calculo del fd

El factor de dilución en la cámara de Neubauer se calcula dividiendo el volumen total de la dilución por el volumen de la muestra original

Ej 1: 10ul de células y 10ul de azul tripano FD= 20ul/10 = 2 Ej 2: 10ul de células y 40ul de azul tripano FD: 50ul/10 = 5

Conteo celular

Cuente las células de los 4 cuadrantes de las esquinas.
  • Cada cuadrante es de 1 x 1mm (1mm2)
  • La profundidad de la camara es de 1mm
  • el volúmen es de 1mm3

Llenado de la cámara

Se llena la cámara con un volúmen de 10ul de suspención celular, utilizando una micropipeta en un angulo de 45° aplicandola sobre el area escavada de la cámara.
  1. Colocar el cubreobjetos en la cámara
  2. Debe dejar entrar la muestra por capilaridad.
  3. No ejercer presión durante el llenado

Conteo celular

Cuente las celulas de los 4 cuadrantes de las esquinas.
  • Cada cuadrante es de 1 x 1mm (1mm2)
  • La profundidad de la camara es de 1mm
  • el volúmen es de 1mm3

Técnica de conteo "L"

Técnica de conteo

Cálculos

Concentración celular = Total celulas vivas/número de cuadrantes contados (factor de dilución)(10,000). Ejemplo: Concentración celular = 520/4 (2)(10,000) = 2,600,000 células/mL.

Técnica de conteo en "L"

Actividad

Se tiene un cultivo celular en un flask t25; se tripsiniza y resuspenden las células del mismo en 1 mL de medio de donde se toman 10 µL para realizar el conteo, y se depositan en un microtubo con 90 µL de azul tripán (Dilución 1:10). Se cuentan los cuatro cuadrantes de 4x4 obteniendo un número total de células vivas de 455 con un total de 35 células muertas. Calcule: 1. Concentración celular total 2. Concentración celular de células viables 3. Porcentaje de viabilidad celular

conclusiones

Muchasgracias

¿Alguna pregunta?