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ELETTROFORESI SU GEL

Flavia Salmeri

Created on April 8, 2023

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Transcript

L'ELETTROFORESI

DEI COLORANTI

COSA ABBIAMO FATTO...

Nel corso di due lezioni, abbiamo effettuato in laboratorio l'esperimento dell'elettroforesi su gel di agarosio (un polisaccaride).

INTRODUZIONE TEORICA

L’elettroforesi su gel è una tecnica che consente di ordinare e visualizzare le piccole molecole biologiche in base a due proprietà: le dimensioni e la carica. Utilizza una matrice polimerica, chiamata gel, e una corrente elettrica. Per vedere i risultati del processo di ordinamento, vengono utilizzati diversi metodi di colorazione o di visualizzazione per rivelare le biomolecole separate, che appaiono come strisce sul gel.

micropipetta

gel di agarosio

eppendorf

camera elettroforetica

Materiali

coloranti

centrifuga

(cliccare su ogni materiale per visualizzare le immagini)

Per prima cosa, abbiamo imparato ad utilizzare la micropipetta, una delle componenti fondamentali per la buona riuscita dell'elettroforesi

PROCEDIMENTO

03

02

01

INSERIMENTO DEI COLORANTI NEI POZZETTI

AVVIO DELL'ELETTROFORESI

SEPARAZIONE DEI COLORANTI

(Cliccare sui +)

SEPARAZIONE DEI COLORANTI

Per prima cosa, inserire tre diversi coloranti all'interno di tre eppendorf differenti (S1, S2, S3) e centrifugare le provette

(Cliccare sulla )

INSERIMENTO DEI COLORANTI NEI POZZETTI

Successivamente, impostare la micropipetta a 10 μl e inserire un puntale; aspirare 10 μl di S1 nella pipetta e pipettarli nel primo pozzetto, prestando attenzione al fine di non forare il gel.Ripetere questo procedimento per tutte e tre le soluzioni, ognuna con un puntale diverso.

SUGGERIMENTO!

AVVIO DELL'ELETTROFORESI

Infine, posizionare il coperchio sulla vaschetta dell'elettroforesi e avviare il processo. Passato il tempo necessario a far distinguere tutti e tre i coloranti (10 minuti o più), spegnere l'interruttore di alimentazione, rimuovere il coperchio e osservare i coloranti nel gel su un fondo bianco.

CONCLUSIONE

Al termine della corsa elettroforetica, possiamo vedere un risultato che ricorda la cromatografia: due coloranti si sono divisi in varie tonalità, mentre l'altro, che era monocromatico, è rimasto tale.

THANK YOU!

MADE BY:flavia salmeri lorenzo apetino