P3S1

Cuantificación RNA

P3S1

• DAVID HERNANDEZ LANDERO
• ANDREA SUSEL VIQUEZ CANO

• ANDREA SANCHEZ HINOJOSA,
• ANGEL LEONARDO CORTEZ VALTIERRA

Indíce

Pregunta 1

Pregunta 2

Pregunta 3

Pregunta 4

Pregumta 5

Pregunta 6

PREGUNTA 01

Tipos de RNA que conforman el RNA total (Esquema)

Hay 3 tipos de RNa

ARN transferencia

ARN ribosomal

ARN Mensajero

Pregunta 02

Cuadro comparativo entre los diversos RNAs

Cuadro comparativo entre los diversos RNAs

PREGUNTA 03

Espectrofotometría para RNA

¿Qué es la espectrofotometría? y ¿por qué se usa para determinar concentración de RNA?

• La Espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la detección específica de los ácidos nucleicos y su pureza.

• Se caracteriza por su precisión, especificidad y su aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc). Es una técnica analítica utilizada para medir cuánta luz absorbe una sustancia química.

• Sirve para el RNA y medir la pureza de este gracias a la cantidad de luz que absorba por lo general en 260nm.(Maestrogen, 2019)

Pregunta 04

RNA que absorbe a una longitud de onda de 260nm

¿Por qué el RNA absorbe a una longitud de onda de 260nm?

• Por que a esa longitud de onda es en la que más absorción tienen los ácidos nucleicos, en este caso de nuestra muestra de RNA, la cantidad de luz absorbida es proporcional a la cantidad de muestra y pureza, por lo que si aumenta o disminuye podemos medir estos parámetros. (labster, 2021)

PREGUNTA 05

Pureza del RNA el cociente 260/230

Pureza del RNA el cociente 260/230

• Específicamente el cociente de 260 / 230 se conoce que se absorben contaminantes como sales caotrópicas, fenoles o carbohidratos. Para elste cociente el RNA se considera puro dependiendo el ratio (Programa de control de calidad de ácidos nucleicos. 2020)

• La calidad y pureza de un ARN se mide en relación de absorbancias, entre las cuales se encuentra A260/280 y A260/230.

PURO: ratio de 1.8-2-2.

CONTAMINANTES: Ratio menor a 1.8

IMPURESA que compromete la muestra : ratio menor a 1.5

SECtion 06

Pureza del RNA el cociente 260/280

¿Qué información da sobre la pureza del RNA el cociente 260/280?

• La pureza del ácido nucleico puede determinarse midiendo la absorbancia a diferentes longitudes de onda. Los ácidos nucleicos absorben la luz a 260 nm, mientras que las proteínas la absorben a 280 nm y los contaminantes químicos (como los compuestos orgánicos fenol y trizol) absorben la luz a 230 nm. (Pureza del ácido nucleico - Labster Theory, s. f.)

En el caso del ARN la relación de absorbancias A260/280 con un valor entre 2.0-2.2 se considera indicativa de un ARN de pureza óptima y adecuada.

Valores A260/280 > 1.7 se corresponden a una muestra de ARN con una pureza aceptable pero un poco contaminada

BIBLIOGRAFIAS

• Programa de control de calidad de ácidos nucleicos. Banco Nacional de ADN Carlos III (Universidad de Salamanca). www.bancoadn.org”
• Cuantificación del ácido nucleico - Labster Theory. (s/f). Labster.com. Recuperado el 21 de marzo de 2023, de https://theory.labster.com/rna-quantification-esg/
• Espectrofotómetro de cuantificación de proteínas de ADN ARN, MN-917 MaestroNano - MaestroGen Inc. (s/f). Maestrogen.com. Recuperado el 21 de marzo de 2023, de https://www.maestrogen.com/es/product-278783/Espectrofotómetro-de-cuantificación-de-prote%C3%ADnas-de-ADN-y-ARN-MN-917-MaestroNano.html

• Pureza del ácido nucleico - Labster Theory. (s. f.). Labster Theory. Recuperado 26 de marzo de 2023, de https://theory.labster.com/nucleic-acid-purity-es/

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