COLORACION GIEMSA Y WRIGHT

PRÁCTICA N° 9

MÉTODOS DE COLORACIÓN DE GIEMSA Y WRIGHT PARA EL DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO DE Plasmodium vivax

Blga. Nilda Aurea Apayco Espinoza

COMPETENCIAS

- Utilizar los métodos de coloración de Giemsa y Wright para el diagnóstico parasitológico de Plasmodium vivax - Interpretar los resultados obtenidos.

INTRODUCCIÓN

• Gota gruesa: Es una técnica de rutina y consiste en una muestra de una gota de sangre conformada por numerosas capas en su mayoría de glóbulos rojos, los que son deshemoglobinizados durante la coloración con Giemsa. Esta concentración de glóbulos rojos facilita la detección de los parásitos que pudieran estar presentes en su interior en densidades bajas.

• El diagnóstico de la malaria se realiza considerando las manifestaciones clínicas y la confirmación laboratorial de la gota gruesa u otra prueba de laboratorio que demuestre la presencia del parásito.
• Diagnóstico parasitológico: Consiste en el examen microscópico de la muestra de sangre para demostrar la presencia del parásito para lo cual se usa la técnica de coloración de Giemsa, con la cual podemos observar la gota gruesa y el frotis.

1. Frotis: Es una capa delgada, única de células sanguíneas, fijadas con metanol y coloreadas con Giemsa, que facilitan la observación de las características morfológicas de los parásitos presentes en los glóbulos rojos. El examen en ambos casos (gota gruesa y frotis) se realiza con aumento de 1000x con aceite de inmersión (Gutierrez y Arróspide, 2003).

La malaria es una enfermedad parasitaria de evolución crónica, caracterizada por fiebres o accesos febriles intermitentes, esplenomegalia y anemia, producidos por protozoos del género Plasmodium (P. vivax, P. falciparum, P. malarie, P. ovale), transmitido por un vector (mosquito) del género Anophele (esporozoito), en los cuales los plasmodios efectúa el ciclo esporogónicos o sexuados, en tanto que el hombre se lleva a cabo la fase asexuada o esquizogónica: la primera que ocurre en las células hepáticas y la segunda en los glóbulos rojos (World Wealth Organization, 2018).

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MATERIALES

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Solución stock o madre Giemsa en polvo 0.75 g, Alcohol metílico 65 mL, glicerina 35 mL. Solución de trabajo Solución stock 1 mL. Agua destilada o buffer fosfato (PBS) 9mL.

Colorante Giemsa

Wright en polvo 0.3g. Glicerol 3 mL. Metanol 97 mL.

PROCEDIMIENTO

láminas con la muestra hacia abajo para coloración invertida

agregando el colorante diluido al 10% por debajo de la muestra

Fijación de la láminas con metanol

láminas coloreadas secando sobre bandeja para secado

Quitar el exceso de colorante en un Beaker que contiene agua de grifo

controlar el tiempo

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REFERENCIA

Gutierrez, S., & Arróspide, N. (2003). Manual de Procedimientos de Laboratorio para el diagnóstico de Malaria. Serie de Normas Técnicas, (39). World Wealth Organization (2018).MALARIA MICROSCOPY QUALITY ASSURANCE MANUAL VERSION 2 Zurita, M. S. (2013). Manual Procedimientos de Laboratorio, Laboratorios Locales I, Laboratorios Locales II. Lima: Ministerio de Salud del Perú. Instituto Nacional de Salud Perú.

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