NUESTRO LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR

NUESTRO LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR

Dorián Builes María Ángeles Fraile María Malo Marina Mateo Claudia Sender Lucía Serrano 1SL

CLÍNICAMETABOLITOS

CLÍNICA METABOLITOS

¡BIENVENIDXS A NUESTRA CLÍNICA!

Descubre todo lo que ofrecemos en el siguiente esquema...

Normas y buenos hábitos en el laboratorio

Flujo de muestras y de trabajo en el laboratorio

Elementos de seguridad

Equipo de laboratorio

Estructura del laboratorio en salas

Plano

Específico de cada sala y genérico

Instalaciones, reactivos y agentes externos

Normas de bioseguridad, uso y manejo de equipos, reactivos y químicos

PLANO DE LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR CON NIVEL DE BIOSEGURIDAD TIPO II

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Estructura del laboratorio en salas

Cada laboratorio debe tener un mínimo de 4 salas

Sala de preparación de muestras y extracción de ADN

Sala de preparación de reactivos

Sala post-PCR

Sala PCR

Sala de preparación de reactivos o pre-PCR

Sala A en el plano

• Área limpia.
• Se preparan los reactivos que se van a utilizar en el laboratorio, incluyendo la mezcla de reacción PCR.
• Para evitar que estas muestras se contaminen con ADN, encontramos una cabina de bioseguridad, un autoclave y un incubador o estufa.

Sala de preparación de muestras y extracción de ADN

Sala B en el plano

• Área sucia.
• Se lleva a cabo el procesamiento de muestras, la separación de células, la extracción de ADN y ARN, y la preparación de la reacción PCR.
• Para evitar la contaminación de la muestra, la sala tiene una cabina de bioseguridad y un espectrofotómetro.

Sala PCR

Sala C en el plano

• Se realiza la PCR.
• Está presente un termociclador y un espacio de trabajo, en caso de que se necesite añadir material genético.

Sala post-PCR

Sala D en el plano

• Área sucia.
• Las muestras pueden estar expuestas a una fuerte contaminación, ya que hay muchas y pueden mezclarse unas con otras si no se tiene cuidado.
• Se llevan a cabo procesos de detección de hibridación con sondas de oligonucleótidos específicos, la detección por electroforesis en gel de agarosa, observación o fotodocumentación de geles y secuenciación de los amplificados.
• Podemos encontrar una sala oscura con un equipo de electroforesis, un documentador de geles y un microscopio de fluorescencia.

Equipo específico de cada sala

Necesario para llevar a cabo las respectivas actividades

Sala de preparación de muestras y extracción de ADN

Sala de preparación de reactivos

Sala PCR

Sala post-PCR

Sala de preparación de reactivos o pre-PCR

Sala A en el plano

• Cabina de seguridad: mantiene el aire libre de partículas y otros posibles contaminantes gracias a un filtro del que dispone la máquina.
• Cabinas de flujo laminar vertical de clase II.

Sala de preparación de preparación de muestras y extracción de ADN

Sala B en el plano

• Cabina de seguridad
• Espectrofotómetro (izqda): mide la concentración y la pureza proyectando un haz de luz a través de una muestra y cuantificando la cantidad de luz que es absorbida por la misma. Dependiendo del color que resulte de la absorción, se mide la concentración de ácidos nucleicos presentes.

El rango de las longitudes de onda varía entre 230-320 nm.

Sala PCR

Sala C en el plano

• Termociclador: permite sucesivos ciclos a distintas temperaturas para la amplificación de una hebra de ADN. Entre los 4 y 98º tiene lugar la desnaturalización, hibridación y extensión del ADN. Dos partes:
• Bloque incubador: se introducen muestras de ADN.
• Tapa termostática: aporta calor.

También presenta otra tapa para evitar la condensación del agua.

Sala post-PCR

Sala D en el plano

• Equipo de electroforesis: posibilita la separación de partículas de diferente carga eléctrica aprovechando la distinta velocidad que adquieren al ser atraídas por el campo eléctrico producido por la máquina, dejando líneas sobre gel de agarosa o poliacrilamida en una disolución tampón. Se usa para la separación de ADN y proteínas. Cuenta con:
• Soporte plástico.
• Cubeta de electroforesis.
• Fuente de alimentación.

Sala post-PCR

Sala D en el plano

• Equipo de documentación de geles: se emplea para observar, fotografiar y analizar las bandas de gel resultantes tras el proceso de electroforesis. Cuenta con:
• Transiluminador.
• Cámara fotográfica.

Sala post-PCR

Sala D en el plano

• Sala oscura con microscopio de fluorescencia: se tiñen las muestras obtenidas a través de la electroforesis y se analizan en este microscopio. Tiene:
• Filtros apropiados para fluorocromos.
• Sistema de captación de imágenes.

Equipo genérico

Que se encuentra o bien en todas las salas, o en el resto del laboratorio

Sistema de purificación de agua

Autoclave

Material fungible

Equipo genérico

Que se encuentra o bien en todas las salas, o en el resto del laboratorio

Centrífuga y microcentrífuga

Baño termostático

Estufa

Equipo genérico

Que se encuentra o bien en todas las salas, o en el resto del laboratorio

Agitador

Nevera y congelador

Balanza

Equipo genérico

Que se encuentra o bien en todas las salas, o en el resto del laboratorio

Reactivos: tampones, agua ultrapura y estéril, kits y reactivos comerciales

pHmetro

Otros materiales: pipetas, vasos de precipitado, micropipetas, microtubos eppendorf, etc.

Elementos de seguridad

De acuerdo con las directivas europeas y normas estatales en gestión de residuos

Agentes externos

Instalaciones

Reactivos

Instalaciones

• Armarios suficientes para almacenar sustancias tóxicas, corrosivas e inflamables.
• Duchas de seguridad y lavaojos ubicados en zonas visibles y de fácil acceso para el personal.
• Lavabos de manos instalados cerca de puertas de acceso o de salida.
• Protección contra incendios y cierre automático en puertas de acceso, con mirillas a la altura de los ojos para observar el interior del laboratorio.

Instalaciones

• Mínimo 120 cm de anchura en puertas de entrada y no menos de 90 cm en interiores.
• Instalaciones eléctricas, agua e informática a la vista y de fácil acceso.
• Lavadoras y autoclaves en sala de lavado, cerrada al público para evitar el ruido.

• Sistemas informáticos en habitación refrigerada.
• Suelos totalmente nivelados y horizontales sin ninguna pendiente.
• Recubrimiento del suelo liso.
• Las áreas de trabajo deben estar señalizadas con pictogramas de seguridad.
• Pictograma del plano a la vista.

Instalaciones

• Suelos y paredes recubiertos con materiales no porosos, fáciles de lavar y resistentes a la temperatura, sustancias químicas y corrosivas.
• Mobiliario modular y fácilmente transportable y móvil.
• Despachos individuales para atención de pacientes, comentarios de informe, análisis o atención especializada.
• Sala de usos múltiples con 2-3 apartados, para sesiones clínicas, seminarios, conferencias y biblioteca.
• Área de secretaría y archivo.
• Área de servicios y vestuarios.

Residuos

• Si son sólidos infecciosos, se depositan en contenedores gestionados por empresas especializadas.
• Si son líquidos, se depositan en contenedores específicos gestionados por empresas especializadas en residuos sanitarios.
• Red de saneamiento como alternativa al almacenaje de residuos líquidos.

Agentes externos

• Iluminación mínima de 500 lux.
• Uso de colores claros en paredes y suelos.
• Superficies mates y no satinadas.
• No más de 65 db.
• Material absorbente en las paredes para aislar el ruido.

Flujo de muestras y de trabajo en el laboratorio

• Unidireccional
• Desde el área más limpia hacia la más sucia
• Contexto de un sólido sistema de calidad, entrenamiento del personal
• Funciones perfectamente definidas

Normas y buenos hábitos en el laboratorio

Uso y manejo de reactivos y químicos

Uso y manejo de equipos

Bioseguridad

Normas del laboratorio

NORMAS DE BIOSEGURIDAD

• Utilizar elementos de protección (batas de laboratorio, guantes, gafas de seguridad, mascarilla, zapatos con suela antideslizante). La bata y los zapatos deben mantenerse bien cerrados para evitar accidentes.
• No consumir alimentos ni bebidas en el laboratorio.
• Trabajar en un área con buena ventilación.
• No pipetear con la boca.
• En caso de presentarse algún derrame o salpicadura, se debe limpiar inmediatamente, empleando el equipo de seguridad correspondiente.
• Lavarse las manos antes y después de la práctica.
• Limpiar y organizar el área de trabajo al finalizar.

Normas del laboratorio

USO Y MANEJO DE EQUIPOS

• Revisar cada material que se vaya a emplear, asegurándose de que se encuentra en perfecto estado, si no, se comunicará a un superior.
• Respetar las áreas asignadas (preparación de reacciones, manejo de reactivos) para así evitar contaminaciones de las muestras.
• Tener en cuenta que cada equipo posee un manual de operación, lo que propicia un uso más eficiente y previene daños del mismo.

USO Y MANEJO DE REACTIVOS Y QUÍMICOS

• Todo material corrosivo, ácidos, bases y solventes deben manejarse en la campana de extracción.
• Es importante tener mucho cuidado y conocer el manejo de cada sustancia, ya que en el laboratorio de biología molecular se trabaja con sustancias potencialmente cancerígenas.

Buenos hábitos en el laboratorio

• Utilizar siempre gradillas y soportes.
• Trabajar con orden y limpieza.
• Usar siempre los EPIs adecuados para cada experimento.
• Es conveniente documentar todas las actividades que se realizan en el laboratorio y las incidencias en un cuaderno de laboratorio.
• Al circular por el laboratorio se debe ir con precaución, sin interrumpir a los que están trabajando.
• Asegurar la desconexión de los equipos, el agua y el gas al terminar el trabajo.

Buenos hábitos en el laboratorio

• No debe emplearse nunca un equipo de trabajo sin conocer su funcionamiento.
• Exigir o proveer según corresponda las fichas de seguridad que deben manipularse.
• Leer la etiqueta de los envases y consultar las fichas de seguridad de los productos antes de utilizarlos por primera vez.
• Si la actividad lo requiere, deben usarse las campanas de gases siempre que sea posible.
• Las campanas de gases son un medio de protección colectiva y no tienen que emplearse para almacenar productos.

WEBGRAFÍA

• https://prezi.com/kuawlm_ejktc/laboratorio-de-biologia-molecular-y-citogenetica/
• https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc-procedimientomicrobiologia33.pdf
• https://www.ingeniarg.com/blog/29-funcionamiento-de-las-cabinas-de-bioseguridad
• https://www.abatec.com.mx/espectrofotometros/
• https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-ampliado/el-espectrofotOmetro
• https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-ampliado/que-es-y-como-funciona-un-termociclador
• https://galileoequipos.com/blog/que-es-un-termociclador/
• https://kalstein.com.mx/como-funciona-un-equipo-de-electroforesis/#:~:text=Un%20equipo%
• 20de%20electroforesis%20es,del%20ADN%20y%20de%20prote%C3%ADnas
• https://kalstein.co.cr/que-es-un-sistema-de-documentacion-de-geles/
• https://www.cromtek.cl/2021/01/12/asi-funciona-un-microscopio-de-fluorescencia/
• https://www.educarex.es/pub/cont/com/0055/documentos/10_Informaci%C3%B3n/02_Fichas_generales/El_autoclave.pdf
• https://docs.google.com/presentation/d/1WLXMQ-nL-k4II7hmXqHy2bT4hFd62xwyUdkBNZ7Zb_I/edit#slide=id.g152f5f081f9_0_149

WEBGRAFÍA

• https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-ampliado/estufa-de-secado-u-horno-de-secado
• https://www.idipaz.es/ficheros/files/Que%20es/2015/BA%C3%91O%20TERMOST%C3%81TICO(1).pdf
• https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/centrifuga-de-laboratorio.html
• https://www.cromtek.cl/2020/12/28/como-funciona-una-microcentrifuga/
• https://www.abatec.com.mx/agitadores-vortex/
• https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-diseno-un-laboratorio-microbiologia-clinica-S0213005X0900408X
• https://www.fundacionsigno.com/archivos/publicaciones/2008r9%202%20p39.pdf
• http://www.ebd.csic.es/web/lem/descripcion-del-laboratorio
• https://labsom.es/blog/normas-de-bioseguridad-en-el-laboratorio-segun-la-oms/
• https://montajesdelsaz.com/que-es-bioseguridad/
• https://www.ispch.cl/sites/default/files/Recomendaciones%20para%20lab.%20que%20realizan%20la%20t%C3%A9cnica%20de%20PCR%20%C3%A1reas%20y%20flujos%20v1.pdf

¡gracias por vuestra atención!