Extracción del ADN-Laboratorio Virtual

Extraccion del DNA Laboratorio Virtual

Facultad de Medicina - UPBBiologia MolecularUniversidad Pontificia Bolivariana

Tabla de contenido

Laboratorio de extracción DNA (virtual)

Ingreso a praxilabs

Extracción del DNA

Objetivo

Herramientas del laboratorio

¿En que consiste?

Pasos

Aislamiento del DNA 1-7

Aislamiento del DNA 8-15

Aislamiento del DNA 16-24

Evidencias

Dudas y ayuda

Gracias!!

Objetivo

Paso a paso de ingreso a praxilabs1. Ingresa en el siguiente link: www.praxilabs.com 2. Da click en "create free acount"

3. Llena los datos y da click en "start now"

Paso a paso

4. Al correo te llegara un e-mail para confirmar tu verificación

5. Regresa a praxis y en "log-in" podras ingresar a la plataforma

6.Una vez adentro te aparecerá como primera opción "DNA Extraction Virtual Lab" donde le darás click en "add simulation"

7. Luego le darás click en "my simulation" y te aparecerá el laboratorio "DNA" donde le darás click

Extraccion del DNA

¿En que consiste?

El DNA (ácido desoxirribonucleico) es una molécula compleja que contiene el material genético de una célula. El DNA está compuesto por una serie de nucleótidos unidos entre sí, formados básicamente por una base nitrogenada, una molécula de azúcar (desoxirribosa) y un grupo fosfato. El DNA adopta la forma de una doble hélice que, además de la molécula de DNA, contiene proteínas unidas.

Pasos

El aislamiento del ADN se realiza en etapas:

Paso 3.

Paso 2.

Paso 1.

Precipitación: Se eliminan las proteínas e impurezas de la muestra.

Disolución celular: Se rompe la célula y el núcleo para extraer el DNA mediante un tampón de lisis.

Purificación:Se aisla completamente el DNA de las otras sustancias, para obtener una muestra final de DNA puro.

Herramientas del laboratorio

Puntas 20 - 200 - 1000

Procedimientos de aislamiento de DNA

7. Agregue 700 microlitros de fenol, cloroformo y alcohol amílico en proporciones de 1:24:25 y mezcle la solución con la muestra varias veces con una pipeta.

5. Mezcle bien la muestra con el mezclador durante 15 segundos.

3. Coloque la muestra en el baño de agua a 37 ºC durante una hora.

1. Preparar 10 microlitros de enzima RNAsa con ayuda de una pipeta

4. Añadir 10 microlitros de la enzima Proteinasa k y mezclarla con las muestras varias veces con la pipeta.

2. Agregue 700 microlitros de disolución a la muestra.

6. Coloque la muestra en el baño de agua a una temperatura de 56 ºC durante 2 horas.

Procedimientos de aislamiento de DNA

8. Coloque la muestra en la centrífuga a 13.000 ciclos x 10min a 4ºC para aislar el contenido del tubo en dos capas.

9. Retire la capa superior con la pipeta y luego colóquela en el tubo limpio.

13. Retire la capa superior con la pipeta y luego colóquela en el tubo limpio.

15. Agregue a la muestra una solución de acetato de sodio con una concentración de 3 molar, una décima parte del tamaño de la muestra.

11. Agregue 700 microlitros de cloroformo a la muestra que ha extraído.

14. Repita los pasos 12 y 13 una vez más

12. Coloque la muestra en la centrífuga y ajústela a 13.000 ciclos x 10 min a 4 ºC

10. Repita los pasos 7, 8 y 9 dos veces.

Procedimientos de aislamiento de DNA

18. Coloque la muestra en la centrífuga y ajústela a 13.000 ciclos x 30 min a 4 ºC.

17. Mezclar el contenido del tubo girándolo. Luego déjelo precipitar a una temperatura de - 70 ºC x 1 día entero.

16. Agregue una solución de etanol con una concentración del 95 %, el doble del tamaño de la muestra, a la muestra.

21. Coloque la muestra en la centrífuga y ajústela a 13.000 ciclos por minuto durante 10 minutos a una temperatura de 4 ºC.

20. Añadir 700 microlitros de etanol al 70%. Luego mézclelo presionándolo suavemente para evitar daños.

19. Vierta el material flotante en una papelera. Recuperar el material restante con una pipeta.

24. Disuelva la muestra de ADN en el regulador de solución y mézclela con la muestra varias veces usando la pipeta.

23. Seque la muestra al aire.

22. El líquido se vierte en la papelera y el resto se recupera con la pipeta suavemente para conservar la muestra y eliminarla.

En el tablero encontrarás dos herramientas fundamentales:1. LAB MANUAL: - En texto todo 2. ANIMATED GUIDE: - Video donde podras ver el paso a paso

Evidencias. Las evidencias deben ser montadas en la carpeta de teams correspondiente a su respectiva fecha de laboratorio. En tal caso de no estarlo se verá afectado en su evaluaciónA más tardar el 1 de agosto a las 12 del mediodía (para los que tienen el laboratorio el 2 de agosto) y el 08 de agosto a las 12 del mediodía (para los que tienen el laboratorio el 09 de agosto). Nota. Esta actividad tendrá una nota que entrará entre el 10% correspondiente a los quices de laboratorio.

Eureka!

Muchas gracias.

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