MAPA MENTAL - ESPECTROFOTOMETRÍA

Esta ley permite determinar la concentración de una molécula en disolución midiendo su absorbancia

Los colores observables son producto de la absorción de luz a cierta longitud de onda

La absorbancia de la muestra será mayor cuanto mayor sea la distancia que atraviese el haz de luz

Es una técnica básica en la caracterización y analisis en bioquímica y biología molecular

Descripción

La absorbancia es directamente proporcional a la concentración de las moléculas en la muestra

Ley de lambert - beer

Instrumento que permite medir la absorción de una muestra

Fuente de luz con intensidad constante

La absorbancia es directamente proporcional a su coeficiente de extinción molar

Monocromador: Separa la banda de longitud de onda deseada y la dispersa hacia la muestra

Componentes

Espectrofotómetro

EsPECTROFOTOMETRÍA

Compartimento para la muestra

Poner el extracto en una cubeta para el análisis, sin tocar las caras transparentes de la misma

Fotodetector: Mide la radiación que atraviesa la muestra

Medir el espectro de absorción de una muestra ayuda a analizar cualitativamente las moleculas que la componen

Colocar la cubeta dentro del espectrofotometro para que el haz de luz atraviese por las caras transparentes

La luz que una molécula puede absorber depende del número de dobles enlaces que posea

Ejemplo: realizar el espectro de absorción entre las longitudes de onda 400 y 700 nm de un extracto de hojas de espinaca en el que l la clorofila es el compuesto coloreado más abundante

Presionar el botón GO y observar la variación de la absorbancia

coeficiente de extinción molar (ε)

Constante que indica el valor de la absorbancia de una sustancia que se encuentra a una concentracion de 1 M cuando de mide en una cubeta de 1 cm de ancho

Analizando el área de absorción se delimita una zona de reflexion de luz entre 500 y 600 nm

Este experimento indica que las hojas absorben los rayos de las zonas azul, violeta y rojo, y dejan pasar solo los de la zona verde