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Gelelektrophorese
Stella Mazarakis
Created on January 26, 2022
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Transcript
Gelelektrophorese
Grundprinzip
- ist ein Trennverfahren
- DNA, RNA oder Proteingemische werden aufgetrennt
- So ist es möglich Gemischen miteinander zu vergleichen
- Anwenungsbeispiel: dieses Trennverfahren wird auch in der Kriminilogie genutzt, da so die spuren am Tatort mit denen der Verdächtigen verglichen werden können
Versuchsaufbau
Agarose-Gel oder Polyacrylamid-Gel
Versuchsaufbau
Anode
Agarose-Gel oder Polyacrylamid-Gel
Kathode
Versuchsablauf
1. Der Probe wird ein Farbstoff versetzt 2.Die Probe wird in Gel-Taschen gefühlt 3.Die DNA Fragmente wandern zur Anode 4.Wenn der Farbstoff den Rand den erreicht hat, ist der Versuch zu ende
Geltasche
Banden
Theorie
- Durch ein elektrisches Feld wandert die Probe durch das Gel
- Das Gel ist netzartig und behindert die Moleküle beim durchqueren des Gels
- Je nach Größe der DNA-Fragmente bewegen sich die Moleküle unterschiedlich weiter durch das Gel
Auswertung des Verfahrens
Es gibt mehere Möglichkeiten der Auswertung!!
Auswertung des Verfahrens
1. Auswertungmethode mit DNA Molekülmassenstandard:
- dient dazu, um Größen der DNA-Fragmente festzustellen
- als Vergleichsprobe läuft die DNA-Molekülmassenstandard mit
- dadurch wird eine Vergleichsskalar geschaffen
Auswertung des Verfahrens
2. Auswertungmethode durch makieren mit radioaktiven Stoffen
- Probe wird mit radioaktiven Stoff vor der Gelelektrophorese versetzt
- nach durchlaufen der Probe, kann durch Autoradiographie DNA-Fragmente sichtbar gemacht werden
Auswertung des Verfahrens
3. Auswertungsmethode durch Sichtbarmachung mit Farbstoffe
- Probe wird mit fluoreszierenden Farbstoff versetzt
- die Auswertung erfolg, indem mit UV-Licht angestraht wird
Der genetische Fingerabdruck
- ist bei jedem Menschen einzigartig
- Erbgutprofil von einem Menschen
Der genetische Fingerabdruck
Anwendungsbeispiel: Vaterschaftstest
- genutzt werden dafür "Short Tandem Repeats"
- Bandenmuster von Mutter, Kind und potenziellen Vätern werden vergliechen
- Vaterschaft kann bestätigt werden, wenn die Banden des Kindes, so auf Vater und Mutter aufgeteilt werden und deckungsgleich sind
Felix-Klein-Gymnasium
ENDE