Práctica 2: Amilasa salival

Amilasa salival

aBSTRACT

In this experiment, we have used the temperature and the pH, two factors that affect the enzymatic action, to observe how they affect the salivary amylase (enzyme). To see its effects, we have mixed the salivary amylase with starch and have experimented with Fehling and Lugol.

iNTRODUCCIÓN

En esta práctica, se ha usado la temperatura y el pH, dos factores que afectan a la actividad enzimática, para oservar cómo afectan a la amilasa salival (enzima). Para ver sus efectos, se ha mezclado la amilasa con almidón, y se ha realizado la prueba de Fehling y Lugol.

objectivos

¿Se desnaturalizará la amilasa?

problema:

vARIABLES:

Independiente: Temperatura (ebullición y estufa) y pH (ácido o básico)Dependiente: Positivo o negativo a la prueba realizada (Lugol o Fehling).A fijar: tiempo, cantidades echadas

Hipótesis

Hipótesis de los resultados del grupo I: TuboResultado hipotéticoRazónTubo 1 (Lugol)-El almidón se rompe debido a la acción de la amilasa salival.Tubo 2 (Fehling)-El almidón no se rompe (en maltosas e isomaltosas) debido a la desnaturalización de la amilasa salival.Tubo 3 (Lugol)+El almidón se rompe debido a la desnaturalización de la amilasa salival. Hipótesis de los resultados del grupo II: TuboResultadoRazónTubo 1 (Fehling)+El almidón se rompe (maltosas o isomaltosas) debido a la acción de la amilasa salival.Tubo 2 (Lugol)+El almidón no se rompe debido a la desnaturalización de la amilasa salival.Tubo 3 (Fehling)-El almidón no se rompe debido a la desnaturalización de la amilasa salival.

xenia hueso espinosa2º bachillerato

- Realizar las pruebas correctamente.- Comparar los resultados con los compañeros.- Entender por qué las pruebas dan positivo en algunos casos y en otros no.

Materiales

- 3 tubos de ensayo por grupo)- Gradilla - - Saliva ( )- - A y B - Papel indicador del pH- Bicarbonato - HCl (en disuelto)- Cuentagotas- Pinzas de madera-Qumador Bunsen- Vaso de precipitados

Fehling, Lugol, amilasa salival, desnaturalizar, temperatura, pH

Fehling

En esta prueba el reactivo Fehling se usa para diferenciar entre glúcidos reductores (monosacáridos y disacáridos monocarbonílicos) y no reductores (p.ej: disacáridos dicarbonílicos). Fehling positivoFehling negativo

Lugol

El reactivo Lugol sirve para identificar la presencia de almidón ya que el yodo de este se introduce entre las espiras del almidón y toma el color azul/morado fuerte. Lugol positivoLugol negativo

¡OBSERVACIONES!

Se podría dar un falso positivo si se calienta mucho la amilasa.

amilasa salival

Proteína, holoproteína, holoproteína globular (función enzimática > enzima)

Almidón

Glúcido, holósido, homopolisacárido, hexosana, glucosana

Gradilla y tubos de ensayo Almidón y cuentagotasLugol Fehling A y B Indicador del pH Bicarbonato HCl Pinzas de madera Quemador bunsen Vaso de precipitados

xenia hueso espinosa2º bachillerato

metodologia

Resultados

cONCLUSIÓN

- Los resultados del grupo I concuerdan con la hipótesis excepto en el tubo 3. Aún así se pudo observar que en uno de los grupos el tercer experimento les dio un positivo parcial. Se podría concluir que hubo algún tipo de error a la hora de hervir la amilasa, por ejemplo podría ser que el quemador Bunsen calentase menos al repetir el experimento en el tubo 3.- Los resultados del grupo II concuerdan con la hiótesis. - La hipótesis ha sido parcialmente demostrada.

Grupo I

Grupo II

Grupo 3

Grupo 4

Grupo 1

Grupo 2

- Añadir 3 cm^3 (mL) de almidón y saliva en el tubo.- Calentar en la estufa a 37º C durante 7'.- Realizar la prueba del .

tUBO 1:

- Añadir saliva en el tubo y hervirla (quemador bunsen),- Añadir 3 cm^3 (mL) de almidón - Calentar en la estufa a 37º C durante 7'.- Realizar la prueba de Fehling

tUBO 2:

- Hacer lo mismo que en el tubo 2 pero en vez de realizar la prueba de Fehling, realizar la prueba del Lugol.

tUBO 3:

- Añadir 3 cm^3 (mL) de almidón y saliva en el tubo.- Calentar en la estufa a 37º C durante 7'.- Realizar la prueba de .

tUBO 1:

- Añadir saliva en un vaso de precipitados y 2 cm^3 (mL) de (en disolución).- Medir el pH de la mezcla.- Añadir para basificar la mezcla a un pH aproximado a 7. - Añadir 3 cm^3 (mL) de almidón.- Calentar en la estufa a 37º C durante 7'.- Realizar la prueba del Lugol.

tUBO 2:

tUBO 3:

- Hacer lo mismo que en el tubo 2 pero en vez de realizar la prueba del Lugol, realizar la prueba de Fehling.

Comparación del positivo parcial con un positivo total (grupo control)

Lugol

Se echan 3 gotas de Lugol y se mezcla.

HCl

Se echan 5 gotas de HCl, se mezcla y se deja que actúe un par de minutos.

Fehling

Se echan 2 mL de Fehling A y B, se mezcla y se calienta al baño maría durante 5'.

bicarbonato

Se echa gota a gota con cuidado de no basificar demasiado.

grupo i (temperatura)

grupo Ii (ph)

Añadir el almidónCalentar en la estufa Prueba de Fehling Calentar al baño maría Prueba del Lugol Hervir la saliva Medir el pH después de añadir el HCl Medir el pH después de añadir el bicarbonato

Imágenes de los resultados: GrupoTubo 1Tubo 2Tubo 3Grupo IGrupo II