Diseño Laboratorio Biología Molecular

Diseño laboratorio biología molEcular

Diseño laboratorio

1. Sala de preparación de reactivos
2. Sala de preparación de muestras y extracción de ADN
3. Sala PCR
4. Sala Post-PCR

Sala de preparación de reactivos

• Área limpia .
• Se realiza la mezcla de reacción de PCR.
• Es fundamental que los reactivos no se contaminen con ADN.
• Ligera presión positiva para evitar contaminación.

EQUIPAMIENTO

CABINA DE BIOSEGURIDAD DE CLASE II: protegen de la contaminación a la persona manipuladora, a la muestra y al medio ambiente.

AUTOCLAVE: sirve para esterilizar las muestras.

Sala de preparación de muestras y extracción de ADN

• Es una sala sucia .
• Es conveniente que tenga una ligera presión negativa, para evitar que pueda escaparse el material contaminante.

Equipamiento

CABINA DE BIOSEGURIDAD DE CLASE II:protegen de la contaminación a la muestra, a la persona manipuladora y al medio ambiente.

ESPECTROFOTÓMETRO: se encarga de cuantificar la concentración y pureza de los ácidos nucleicos.

SALA PCR

• Añadir muestras de ADN a la mezcla de la reacción.

EQUIPAMIENTO

TERMOCICLADORES: se lleva a cabo la PCR.

CABINA DE BIOSEGURIDAD: que protegen la contaminación de la muestra, a la persona y al medio ambiente.

EQUIPAMIENTO

NEVERA (conservar reactivos y muestras) y ESTUFA (secar y esterilizar material)

AUTOCLAVE: esterilizar muestras.

SALA POST-PCR

• Sala "sucia" = con ADN; fuente de contaminación por productos amplificados.

• Ligera presión positiva.
• Sala oscura.

EQUIPAMIENTO

DOCUMENTADOR DE GELES

Permite visualizar las bandas de ácidos de nucleicos en el gel después de la electroforesis y obtener una fotografía.

EQUIPO DE ELECTROFORESIS

MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA

• Separar moléculas de ácidos nucleicos del ADN y ARN por tamaño.
• Analizar productos amplificados en una PCR.
• Obtener fragmentos de tamaños concretos de ADN.

• Caracterización e identificación de moléculas en células/tejidos.
• Estudio células normales y patológicas.
• Estudios inmunológicos.

ELEMENTOS DE SEGURIDAD DEL LABORATORIO

INSTALACIONES DE EMERGENCIA

DUCHA DE SEGURIDAD

FUENTE LAVAOJOS

NEUTRALIZADORES

EXTINTOR

MANTA IGNÍFUGA

EQUIPOS PARA VENTILACIÓN DE EMERGENCIA

Armarios para reactivos

Deben de ser adaptados a sus características de peligrosidad y respetando las incompatibilidades.

- Inflamables: alcoholes(etanol, isopropanol, metanol)

- Tóxicos y muy tóxicos: acrilamida, azida sódica, bromuro de etidio...

- Carcinógenos: acrilamida, DAB, formaldehido.

- Mutágenos: acrilamida, bromuro de etidio.

- Teratógenos y/o perjudiciales para la fertilidad: formamida, tetrametilurea.

contenedores para residuos

Clase I, residuos sólidos urbanos: (Bolsa negra) Material de oficina y habitaciones pacientes, restos de comida, periódicos. Clase II, residuos sanitarios asimilables a urbanos: (Bolsa marrón) Material de curas, gasas y apósitos, vidrio, yesos, vendas, sondas, material manchado con sangre, secreciones o excreciones. Clase III, residuos sanitarios especiales: (contenedor verde con bolsa roja) Residuos procedentes de pacientes infectados por las enfermedades infecciosas de anexo y todo el material en contacto con ellos, cultivos y reservas de agentes infecciosos.

Clase III, residuos sanitarios especiales: (contenedor amarillo de plástico duro) Residuos cortantes o punzantes Clase III, residuos sanitarios especiales: (contenedor rojo) Citostáticos y todo material utilizados en su preparación o en contacto. (Contenedor azul) Enfermedades de creutzfeldt, gripe aviar. Clase IV, residuos químicos: (contenedor amarillo grande) Pequeños restos anatómicos impregnado en formal, residuos de laboratorio, envases de producots químicos peligrosos. (Contenedor blanco) Medicamentos caducados. (Garrafa 25L) Residuos líquidos.

el flujo de trabajo

Pre-PCR

PCR

Post-PCR

normas y buenos hábitos de trabajo

• Material reutilizable de vidrio puede sumergirse en hipoclorito al 10% hasta terminar sesión trabajo. Posterior limpieza y esterilización.
• Material fungible utilizado en la cabina se desecha en contenedores para material contaminado.
• Entrada exclusiva del personal trabajando en la sala.
• Limpieza cabinas y superficies con etanol al 70% o desinfectante comercial tras cada sesión.
• Conectar lámpara germicida UV después limpieza.

• Lavado de manos.
• Uso de guantes y batas desechables estériles.
• La puerta de la sala debe estar cerrada.
• Uso exclusivo de material y reactivos estériles.
• No introducir mecheros bunsen en las cabinas.
• Colocar en interior de la cabina el material a utilizar en la sesión de trabajo.
• No sacar el material estéril de su embalaje hasta el momento de uso.
• Mantenimiento cabinas y filtros HEPA.