EM. Fragmentación

Espectrometría de Masa. Fragmentación

Ejemplo:GC-MASA

¿Cuándo ocurre?

Clivaje Sigma

Aromáticos

H-ϒ

Clivaje Alfa

Reordenamiento H-ϒ

Clivaje Inductivo

GC - Masa. cuantificación

• Alta sensibilidad
• Obtención del cromatograma: modo TIC. No hay distinción de m/z.

Dificultades: Introducir un compuesto a PA en un sistema de alto vacío. Interfase:

• Reducir el flujo del gas carrier a un grado que permita mantener el alto vacío.
• Separación selectiva del gas carrier.
• Debe mantenerse la separación cromatográfica.

GC - Masa. cuantificación

• Las moléculas de helio son pequeñas y pueden ser desviadas fácilmente de su trayectoria.
• Los iones más pesados, con mayor momentum, tienden a mantenerse en el centro del recorrido y de esta manera llegan al MS.

GC - Masa. cuantificación

Los datos pueden ser presentados de varias formas: 1) TIC: Cromatograma de iones totales. Se registran la intensidad de todos los iones en función del tiempo. 2) SIM: Cromatograma de uno o más iones seleccionados o monitoreo selectivo de iones. Se registran la o las intensidades de uno o más iones seleccionados en función del tiempo. (pico base que da mayor sensibilidad, más m/z característicos) - Más sensible que TIC - Mejora relación m/z. 3) SCAN: Espectros de masas. Se registran los espectros de masas de los diversos picos cromatográficos donde las intensidades relativas de los iones se representan en función de la relación m/z.

GC - Masa. cuantificación

El TIC se compara con un cromatograma de cromatografía de gases. Se crea sumando las intensidades de todos los picos espectrales de masas del mismo barrido. Incluye el ruido de fondo y los componentes de la muestra. En el modo SIM, el espectrómetro de masas está configurado para medir solo la masa especificada, aumentando la sensibilidad.

GC - Masa. cuantificación

SCAN vs. SIM

GC - Masa. cuantificación

CUANTIFICACIÓN: Estándar interno deuterado: analito deuterado, mismo tr que analito, pero distinta m/z (a 3 unidades de m mayor) 1- Muestra + EI separación por GC 2- TIC: se determina la ventana de tiempo donde aparece la señal que se quiere analizar, determinar tr del analito. (AR vs tr) Ejemplo: 2,4,6-tricloroanisol

GC - Masa. cuantificación

https://www.shimadzu.com/an/service-support/technical-support/gas-chromatograph-mass-spectrometry/required_tools/scan_and_sim.html

3- SCAN a ese tr (AR vs m/z) 4- SIM en esa ventana de tiempo, sabiendo los picos m/z característicos

GC - Masa. cuantificación

5- Curva de calibración:

• SIM de patrón externo de concentración conocida ascendente más igual concentración de EI.

• Muestra (X) con agregado de la misma cantidad de EI.

• Se grafica (AR patrón externo/AR

estándar interno) vs C patrón externo

• Se mide AR de muestra

GC - Masa. cuantificación

SIM: Sensible: Sólo se monitorean iones de una determinada m/z Se cuantifica utilizando el pico base Específico: Tr m/z de picos confirmatorios AR de los picos confirmatorios respecto al pico base Preciso: Estándar interno