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qPCR
Rolando Araos
Created on September 3, 2021
Aprende cómo funciona el qPCR para detectar virus en frutales.
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Transcript
Método qPCR
Por Rolando Araos M.
Este método, a diferencia del PCR convencional, entrega resultados en tiempo real. También basa la detección de un virus a nivel de ADN.
Método qPCR
El primer paso implica aislar el material genético viral.
Método qPCR
Tras ello, se obtiene el ARN viral de la muestra.
Método qPCR
Mediante un proceso denominado transcripción inversa, la enzima transcriptasa inversa lee el material genético de ARN.
Método qPCR
Mediante un proceso denominado transcripción inversa, la enzima transcriptasa inversa lee el material genético de ARN.
Método qPCR
Mediante un proceso denominado transcripción inversa, la enzima transcriptasa inversa lee el material genético de ARN.
Método qPCR
Con este proceso, la enzima crea copias complementarias de este material genético y lo convierte en ADN.
Método qPCR
Este material genético viral, ahora en ADN, será amplificado en forma exponencial por la técnica conocida como Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
Método qPCR
En este punto leerá regiones específicas del material genético del virus que están flanqueadas por secuencias conocidas como “partidores” que son parte de la región del genoma viral que se desea amplificar.
Método qPCR
La diferencia con el PCR convencional es que en este proceso de copia se añade una molécula fluorescente que brilla cada vez que una copia es creada.
Método qPCR
La diferencia con el PCR convencional es que en este proceso de copia se añade una molécula fluorescente que brilla cada vez que una copia es creada.
Método qPCR
La diferencia con el PCR convencional es que en este proceso de copia se añade una molécula fluorescente que brilla cada vez que una copia es creada.
Método qPCR
La diferencia con el PCR convencional es que en este proceso de copia se añade una molécula fluorescente que brilla cada vez que una copia es creada.
Método qPCR
La diferencia con el PCR convencional es que en este proceso de copia se añade una molécula fluorescente que brilla cada vez que una copia es creada.
Método qPCR
La diferencia con el PCR convencional es que en este proceso de copia se añade una molécula fluorescente que brilla cada vez que una copia es creada.
Método qPCR
En una muestra con gran cantidad de virus, la fluoresencia ocurrirá rápidamente.
Fluorescencia
Umbral
Número de copias
Método qPCR
En una muestra con gran cantidad de virus, la fluoresencia ocurrirá rápidamente.
En una muestra con baja cantidad de virus, la fluoresencia tardará.
Fluorescencia
Umbral
Número de copias
Método qPCR
En una muestra con gran cantidad de virus, la fluoresencia ocurrirá rápidamente.
En una muestra con baja cantidad de virus, la fluoresencia tardará.
En una muestra sin virus, la fluoresencia no ocurrirá.
Fluorescencia
Umbral
Número de copias
Método qPCR
Esta técnica entregará resultados más rápidos que el PCR convencional y con una sensibilidad mayor a la prueba Elisa.
Fluorescencia
Umbral
Número de copias