Extracción de ADN de una Fresa

extracción de ADN de una fresa

Introducción

Integrantes:

• Daniel Camacho Fournier
• Aldo Quirós Morales
• Camila Tuñón ARAUZ

LAS FRESAS SON UNA EXCELENTE OPCIÓN PARA REALIZAR UNA EXTRACCIÓN DE MATERIAL GENÉTICO DEBIDO A QUE CONTIENEN UNA GRAN CANTIDAD DE ESTE EN SUS CÉLULAS AL SER OCTOPLOIDES, LO CUÁL SIGNIFICA QUE POSEEN OCHO PARES DE CADA CROMOSOMA. ADICIONALMENTE, LAS FRESAS CONTIENEN PECTINASAS Y CELULASAS, QUE SON ENZIMAS CAPACES DE DESCOMPONER POLISACÁRIDOS Y SUS SUSTRATOS, ENCONTRADOS EN LA PARED CELULAR.

PROCEDIMIENTO

RETIRE CUALQUIER HOJA QUE QUEDE EN LAS FRESAS

COLOQUE LAS FRESAS EN LA BOLSA DE PLÁSTICO Y CIÉRRELA, LUEGO APLÁSTELAS SUAVEMENTE CON LA MANO POR ALREDEDOR DE 2 MINUTOS.

AL APLASTAR LAS FRESAS EN LA BOLSA SE ESTÁ PROVOCANDO UNA RUPTURA DE LAS CÉLULAS QUE LAS CONFORMAN, LIBERANDO SU CONTENIDO, ENTRE ESTE EL ADN. LA EFICIENCIA AUMENTA AL PULVERISZAR EL TEJIDO.[1]

EN UN VASO DE PLÁSTICO, PREPARE EL LÍQUIDO DE EXTRACCIÓN DE ADN: MEZCLE 2 CUCHARADITAS DE DETERGENTE CON 1 CUCHARADITA DE SAL Y 1/2 TAZA DE AGUA.

POSTERIORMENTE, AÑADA 2 CUCHARADAS DEL LÍQUIDO DE EXTRACCIÓN DE ADN A LA BOLSA CON LAS FRESAS.

LA CONFORMACIÓN DE ESTE LÍQUIDO DE EXTRACCIÓN DE ADN SE DEBE A QUE LAS PROPIEDADES DEL DETERGENTE LO HACEN CAPAZ DE DISOLVER LA MEMBRANA CELULAR (BICAPA LIPÍDICA) Y DESNATURALIZAR PROTEÍNAS, Y EL CLORURO DE SODIO (SAL DE MESA) AYUDA A DESHACERSE DE LAS PROTEÍNAS UNIDAS AL ADN, ASÍ COMO TAMBIÉN CUMPLEN LA FUNCIÓN DE MANTENER LAS PROTEÍNAS DISUELTAS EN LA CAPA ACUOSA, Y QUE ESTAS NO PRECIPITEN POSTERIORMENTE EN EL ALCOHOL JUNTO CON EL ADN.[2]

CIERRE LA BOLSA Y CONTINÚE APLASTANDO SU CONTENIDO SUAVEMENTE POR OTRO MINUTO, EVITANDO GENERAR MUCHAS BURBUJAS DE JABÓN.

PONGA EL FILTRO DE CAFÉ DENTRO DEL OTRO VASO DE PLÁSTICO Y VIERTA EL LÍQUIDO DE LAS FRESAS A TRAVÉS DE ESTE.

PARA ESTE PUNTO EL LÍQUIDO OBTENIDO DE LAS FRESAS DEBE CONTENER UNA CONSIDERABLE CANTIDAD DE ADN, Y PARA SU EXTRACCIÓN FINAL ES MEJOR SEPARARLO DE EL RESTO DE RESIDUOS DE LA FRESA, POR LO QUE SE REALIZA ESTA TÉCNICA DE FILTRADO. DE MODO QUE SE OBTENGA LA SEPARACIÓN DE LA SUSTANCIA DE INTERES Y LOS PEDAZOS DE FRESA.[3]

FINALMENTE, VIERTA SOBRE LA PARED INTERNA DEL VASO UNA CANTIDAD DE ALCOHOL PARA FRICCIONES FRÍO QUE EQUIVALGA A LA MISMA CANTIDAD QUE HAYA DEL LÍQUIDO DE LAS FRESAS, SIN MEZCLARLO O AGITARLO.

EN UNOS POCOS SEGUNDOS, OBSERVE CÓMO SE DESARROLLA UNA SUSTANCIA TURBIA Y BLANCA (ADN) EN LA CAPA SUPERIOR, POR ENCIMA DE LA CAPA DEL EXTRACTO DE FRESA.

EL ALCOHOL (ETANOL) PROVOCA LA PRECIPITACIÓN DEL ADN, UNA VEZ QUE ESTE SALE DE LA SOLUCIÓN DE EXTRACTO DE FRESA, TIENDE A AGRUPARSE, HACIÉNDOLO VISIBLE. AL APLICARSE ETANOL SE DISMINUYE LA CONSTANTE DIELECRTICA Y ADEMÁS EN PRESENCIA DE SALES, ESTA COMBINACION FORZARÁ LA PRECIPITACION DEL ADN. [4]

INCLINE EL VASO Y RECOJA EL ADN CON UN AGITADOR DE PLÁSTICO O UN PALITO DE MADERA.

REFERENCIAS

1. Méndez, Carla, Faría, Alfredo, Osorio-Acosta, Francisco, Nava, Alba, EVALUATION OF DNA EXTRACTION METHODS FROM DRIED AND FROZEN TOMATO LEAVES FOR DETECTING BEGOMOVIRUSES BY PCR. Interciencia [Internet]. 2010;35(11):823-827. Recuperado de: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=33915598006
2. Fagundes Teixeira Reis, Maycon, Ferreira Bonomo, Renata Cristina, Superbi de Sousa, Rita de Cássia, Martins Veloso, Cristiane, da Costa Ilhéu Fontan, Rafael, Ramos Gandolfi, Olga Reinert, Optimization of protein extraction process from jackfruit seed flour by reverse micelle system. Acta Scientiarum. Technology [Internet]. 2016;38(3):283-290. Recuperado de: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=303246074003
3. JARAMILLO, MARCELA, RIVERBANK FILTRATION: AN EFFICIENT AND ECONOMICAL DRINKING-WATER TREATMENT TECHNOLOGY. Dyna [Internet]. 2012;79(171):148-157. Recuperado de: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=49623207020
4. Alves Lopes, Denise, Belizário Cantagalli, Liriana, Barateiro Stuchi, Ana Lúcia Paz, Aparecida Mangolin, Claudete, Ruvolo-Takasusuki, Maria Claudia Colla, Population genetics of the sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabr.) (Lepidoptera: Crambidae). Acta Scientiarum. Agronomy [Internet]. 2014;36(2):189-194. Recuperado de: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=303030420007

SE ADJUNTA LA PRUEBA DE LOS ESTUDIANTES, AL CLICKEAR CADA FOTO, ESTA SE MPLÍA