Técnicas Inmunodiagnóstico

Inmunodiagnóstico en Enfermedades Autoinmunes

Bqca: Vannina Bertona R-1 Residencia de Bioquímica Clínica Área Inmunología Laboratorio Central de Redes y Prográmas Ministerio de Salud Pública- Corrientes

OBJETIVOS

1 -DESCRIBIR LAS PRINCIPALES tÉCNICAS inmunoquímicas UTILIZADAS en el diagnóstico de las enfermedades autoinmunes 2- comprender la utilidad de cada una de ellas en el contexto clínico

Info

Las enfermedades autoinmunes (EA) son un grupo de patologías crónicas en las que factores genéticos, ambientales y hormonales contribuyen a su aparición

hOY EN DÍA SU DIAGNÓSTICO SIGUE SIENDO UN DESAFIO CONSTANTE Y ES AHÍ DONDE LAS TÉCNICAS DE LABORATORIO SON DE GRAN AYUDA

Ver

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PRUEBAS DE LABORATORIO EN AUTOINMUNIDAD

Laboratorio básico

Laboratorio Inmunológico

HemogramaCuagulograma VSG, PCR Aletaraciones Enzimáticas Orina Completa Prueba de Coombs directa

c. Antinúcleo-citopasmáticos (ANA/FAN)Ac. Anti DNA Ac. Anti Péptidos Citrulinados (ACCP-3) Ac. Anti Citoplasma de Neutrófilos (ANCA) Anticardiolipina IgG-IgM (ACA IgG/IgM) Anti B2 Glicoproteina (AB2GP IgG/IgM) Anticoagulante Lúpico (AL) C3, C4 Crioglobulinas Tipificación del HLA

La técnica ideal es aquella que combina una alta especificidad con una elevada sensibilidad

Los inmunoanálisis constituyen las pruebas básicas en autoinmunidad

Inmunofluorescencia Indirecta (IFI)

"Gold estándar para la búsqueda" de anticuerpos antinúcleo-citoplasmáticos

Tipos de muestras: Suero, plasma, líquido de punción

Es una técnica de fácil manejo y estandarización

VÍDEO 1

TÉCNICA DE IFI

Al realizar el ensayo de IFI, debemos tener en cuentas las etapas.....

Preanalítica

Analítica

Post- Analítica

Detección de anticuerpos antiI-DNAn con Crithidia luciliae como sustrato

Imagenes Atípicas

Imagen

400X

Fundamento

Posibles resultados

Sustrato línea células HEp-2 (ANA/FAN)

Título aquí

UTILIDAD

Patrones

CARACTERÍSTICAS

Consenso internacional

Título aquí

Los títulos no se asocian a la gravedad de la enfermedad y no se aconseja su uso para el seguimiento

ANA ,AMA, ASMA,APCA

Células Parietales

MI GALERIA DE IMAGENES

AC-4 400X

AC-1

AC-3 400X

AC-22 400X

TÍTULO AQUÍ

AC-20

AC-24

Higado

ESTOMAGO 400X

Anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos (ANCA)

Para la detección de los ANCA, la IFI se utiliza también como prueba de tamizado inicial, debido a que en ella se observan los 3 patrones de tinción que se relacionan con manifestaciones clínicas de autoinmunidad. Los patrones son: el citoplásmico o ANCAc, el perinuclear o ANCAp y el atípico o ANCAx.

El patrón ANCAx o atípico es el resultado del reconocimiento de las proteínas: catepsina G, lisozima y lactoferrina.

A-

Patrón citoplasmático (C-ANCA) sobre neutrófilos fijados en etanol

B - Patrón citoplasmatico (c-ANCA) sobre neutrofilos fijados en formalinaFormalina

ifi:

ES UNA TÉCNICA SENSIBLE ,PERO SI QUEREMOS AUMENTAR SU ESPECIFICIDAD NECESITAMOS DE OTRAS PARA COMPLEMENTAR

Elisa

Escribe un subtítulo aquí

Para caracterizar el o los antígenos específicos reconocidos por los anticuerpos, es necesario utilizar ELISA que contienen los antígenos específicos.

Se solicitan cuando los ANA dan positivo, los titulos y patrones dan necesidad de proseguir con el estudio

También se puede hacer su deteccion por CLIA

CONCLUSIÓN

Las técnicas inmunológicas utilizadas en el diagnóstico de las Enfermedades Autoinmunes pueden ser: IFI, ELISA, CLIA, inmunoLIA, entre otras. La IFI es una técnica de screening inicial. Los distintos sustratos utilizados permiten identificar diferentes autoanticuerpos, los cuales guardan relación con las EA. Las técnicas de ELISA, CLIA son pruebas confirmatorias debido a su mayor sensibilidad.

BIBLIOGRAFÍA

Damoiseaux J, Von Mühlen CA, Garcia-De La Torre I, Carballo OG, de Melo Cruvinel W, Francescantonio PLC, et al. Consenso internacional sobre los patrones de ANA (ICAP): el camino lleno de baches hacia un consenso sobre la presentación de informes de los resultados de ANA. Aspectos destacados de Auto Immun. 2016; 7 (1): 1. Hernández Ramírez DF, Cabiedes J. Técnicas inmunológicas que apoyan el diagnóstico de las enfermedades autoinmunes. Reumatol Clin. 2010; 6 (3): 173–7. Jiménez RAR. Una mirada al diagnóstico de laboratorio de las enfermedades autoinmunes. Rev. cuba hematología , immunología y hemoterapia 2012; 29 (2). Bastian C, Sidgnan F, Rodriguez C. LABORATORIO DE INMUNOLOGÍA EN LA PRÁCTICA CLÍNICA. Rev. médica Clínica Las Condes. 2015; 26 (6): 764–75. Olsen NJ, Choi MY, Fritzler MJ. Emerging technologies in autoantibody testing for rheumatic diseases. Arthritis Res 2017;19(1). Soda, P., Onofri, L. y Iannello, G. Un sistema de apoyo a la toma de decisiones para la clasificación de imágenes de Crithidia Luciliae. Inteligencia artificial en medicina,(2011); 51 (1), 67–74.

GRACIAS