aglutinacion Teoria

Universidad Mayor de San AndrésFacultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas Cátedra de Inmunología

Reacción de Aglutinación Directa

Elaborado por: Int. MAMANI POMA, JHAYLINE LIZETH

ANTECEDENTES

Los ensayos inmunológicos se basan en la especificidad de unión del determinante antigénico del antígeno y el fragmento de unión al antígeno del anticuerpo

La afinidad es la fuerza de la reacción entre un determinante antigénico y un sitio de combinación de un anticuerpo.

La avidez es una medida de las fuerzas de unión de un antígeno y anticuerpos multivalentes.

La aglutinación es una reacción antígeno-anticuerpo en la que un antígeno particulado se combina con su anticuerpo a una temperatura y pH específicos, lo que da como resultado la formación de grupos de células o partículasinertes unidos por anticuerpos específicos contra componentes antigénicos de superficie (agragado visible de partículas)

Aglutinación

Los anticuerpos que producen tales reacciones se denominan aglutininas

Precipitación

Aglutinación

Las reacciones de aglutinación se utilizan para analizar antígenos de partículas que normalmente se conjugan con un portador. El vehículo puede ser artificial (como látex o partículas de carbón) o biológico (como glóbulos rojos).

Es la formación de una masa sólida como resultado de una reacción química que ocurre entre dos componentes iónicosel antígeno soluble y el anticuerpo da como resultado la formación de una red insoluble que forma un precipitado de la solución.

VS

CLASIFICACIÓN

• Aglutinación directa o activa

• Aglutinación indirecta o pasiva

• Aglutinación pasiva reversa

• Inhibición de la aglutinación

• Coagulación

Aglutinación activa o directa

• Los antígenos que intervienen en la reacción son componentes naturales presentes en la superficie de la partícula (bacterias, levaduras, eritrocitos, linfocitos, etc.), y es aglutinado directamente por el anticuerpo.

DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS

Los grupos sanguíneos del sistema ABO y factor Rh se efectúa enfrentando los glóbulos rojos del paciente con anticuerpos monoclonales. La aglutinación o no de los hematíes ensayados frente a cada uno de los reactivos indica la presencia o ausencia de los correspondientes antígenos

FACTOR RH

El factor Rhesus Rh es una proteína que está en el recubrimiento de los glóbulos rojos, la presencia se considea Rh(+) y su ausencia Rh(-)

Grupo ABO

Dos antígenos tipo A y tipo B (aglutinógenos ) presentes en las superficie de los eritrocitos definen el Grupo A y Grupo B la ausencia se cataloga como Grupo O

Otros sistemas de grupos sanguíneos

A la fecha se han identificado 38 principales sistemas humanos

Factor Rh

Sistema ABO H

El principal antígeno Rh es el D pero se han identificado más de 45 antígenos del sistema Rh delos cuales los mas frecuentes son: D, C, E, d, c, e.

Depositar sobre una placa1 gota de hematíes problema, con un hematocrito aprox. 35-40%.Añadir 1 gota del reactivo.Mezclar formando un circulo de unos 2 cm de diámetro.Lectura e interpretación

Método en placa

anticuerpos anti -a

anticuerpos monoclonales de clase IgM

ANTICUERPOS ANTI -b

anticuerpos monoclonales de clase IgM

O+

ANTICUERPOS ANTI -d

anticuerpos monoclonales de clase IgM

A+

B+

Efecto Prozona y postzona

Método en tubo

Preparar suspensión de hematíes problema lavados al 3-5% en solución fisiológica.

Añadir 50uL de Rvo + 50uL de suspensión de hematíes

Mezclar y centrifugar a 3400 r.p.m. por 30 seg (20 segundos a 1000 g)

Test de Commbs

Pruebas de antiglobulina Se ideo con el objetivo de estudiar la eritroblastosos fetal, conocido como Anemia Hemolitica del Recien nacido (HDN) por la incopatibilidad del Factor Rh

• Prueba de antiglobulina Directa (DAT)
• Prueba de antiglobulina Indirecta (IAT)

REACTIVO DE COOMBS

Prueba de antiglobulina Directa (DAT)

o Complemento

Prueba de antiglobulina Indirecta (IAT)

• Detecta anticuerpos en la superficie de los eritrocitos
• Se añade rvo de Coombs a los GR del paciente

• Detecta anticuerpos en el suero del paciente
• Se añade plama del paciente a un pool del GR (Rh+)
• Se añade rvo de Coombs

VS

Uso

• Diagnostico de hemolisis autoinmune
• Crioglobulinas (IgM 20%)
• Globulinas Calientes (IgG 80% IgA IgE)

• Hemolisis inducida por drogas
• HDN
• Hemolisis por Transfusión

Uso

• Test pre-Transfusión
• Cribado Pre-natal
• IgG que puede cruzar la placenta

Aglutinacion = Test +

Determinación salmonelosis –Test de Widal

Una gota 50ul cada uno de los cuatro antígenos de Salmonella (O, H, A y B) por duplicado

Añadir la muestra de suero a analizar.

1/80

20ul 20ul 20ul 20ul 40ul 40ul 40ul 40ul

1/40

Agitar suavemente por 1 minuto y determinar la presencia de aglutinación

Generalmente títulos de 1/40 ó 1/80 son sospechosos de enfermedad

GRACIAS!