Recuento de Staphylococcus aureus

Recuento de Staphylococcus aureus

Práctica

Objetivos

• Aprender la enumeración e identificación de S. aureus en muestras de alimentos.

• Identificar S. aureus de piel o mucosas.

Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus

Otras caracterísiticas

Medios de cultivo en los que crece

Crece en concentraciones de sal comprendidas entre 7 y 10%

Agar sangre Manitol salado

Metabolismo

Placas Petrifilm™ Staph Express

Anaerobio facultativo mesófilo Coagulasa + Catalasa + pH entre 4,0 y 9,8

Produce la enzima DNasa

Reservorio

Ampliamente distribuida en la naturaleza que puede encontrarse en el aire, agua, residuos, maquinaria y superficies de la industria alimentaria.

Su principal reservorio son los animales y humanos, encontrándose en la piel, fosas nasales y garganta.

En consecuencia, pueden transmitirse a una amplia gama de alimentos derivados de animales (leche, carne y huevos y los productos derivados) y alimentos consumidos en crudo (frutas, verduras, etc).

Importancia/Transmisión

Muchos de los brotes de intoxicación de enterotoxinas estafilocócicas se producen en el hogar por un inadecuado cocinado (<45ºC) o una mala conservación de los alimentos (>10ºC).

S. aureus se pueden transmitir a las personas a través del consumo de alimentos contaminados por falta de higiene y manipulación y por inadecuadas prácticas de cocinado y conservación.

Parte experimental

•GRUPO 1 y 2 Hisopado de manos GRUPO 3 y 4 Hisopado de superficie (tabla de picar) GRUPO 5, 6 y 7 Queso fresco con sal ~100g

MUESTRA

Hisopados – remojar el hisopo en agua peptonada e hisopar la superficie (~400 cm2). Colocar el hisopo en el tubo con 9 ml de agua peptonada y homogenizar• Queso fresco – tomar 1 ml del líquido del queso, colocarlo en tubo con 9 ml de agua peptonada y homogenizar. Realizar una dilución 10-2 en un tubo con 9 ml de agua peptonada

SEMBRAR

IDENTIFICACIÓN

1 ml de cada dilución en PLACAS PETRIFILM para S. aureus (por duplicado)

Las colonias rojo-violeta en la Placa son S. aureus. Cuando solamente se aprecien colonias rojo-violeta, contar las colonias y la prueba se habrá completado.

DNasa POSITIVAS

Confirmación

Si se observa COLONIAS NEGRAS O AZUL-VERDOSAS, colocar sobre la placa el test de la DNasa e Incubar 4-8h

Contar todas las zonas rosadas, aunque no se encuentre presente una colonia Calcular el número de ufc/g como se ha indicado antes

https://www.youtube.com/watch?v=Am30Tq1BT4g

Detección de posibles cepas de S. aureus en mucosas

• • Realizar un hisopado de nariz y estriar en el medio Manitol salado
• • Observar el crecimiento de colonias Manitol positivas (amarillas) y Manitol negativas (rosadas)

Interpretación

Interpretación

Interpretación Dnasa test

Interpretación Dnasa test

Reporte de resultados

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