3° C6 A2 : TP Extraction de l' ADN

Activité 2: Etude du contenu du noyau d’une cellule.

classes de 3ème

I.Parent,collège R.Goscinny , Valdoie

Plan

observation du contenu nucléaire en vidéo

observation du contenu nucléaire au microscope optique

extraction du contenu nucléaire

classes de 3ème

I.Parent,collège R.Goscinny , Valdoie

Après avoir observé les différentes vidéos, préciser quand le contenu du noyau est visible.

vidéos

observation du contenu nucléaire en vidéo

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Clique ici pour voir ce que contient (en partie), ce carton.

observation du contenu nucléaire au microscope optique

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Le carton contenait un bulbe de jacinthe, que nous avons fait pousser et des larves de chironomes. Pour la dissection virtuelle, nous cliquerons sur les racines de la plante.

3 - Placer la lamelle sur la préparation.

2 - Placer la pissette d'eau au dessus de la lame pour déposer une goutte d'eau.

1 - Découper la racine avec le scalpel puis prélever le petit morceau avec la pince fine.

Place la lame sur la platine.

Fais la mise au point.

Décris et dessine ce que tu vois.

x 400

DESSIN D'OBSERVATION DE CELLULES DE RACINE DE JACINTHE AU MO X1200

Replace les légendes au bon endroit

EXTRAIT DE LA PHOTO PRECEDENTE

cytoplasme

chromosomes

paroi végétale

membrane

Clique ici pour voir ce que contient (en partie), ce carton.

extraction du contenu nucléaire

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Matériel

 Quelques écailles d’oignons ou autre organisme vivant (peau de bananes, épluchures, salade, morceau de viande, champignon frais, ce que tu veux...).  Un mortier et son pilon.  Un scalpel.  Une solution d’extraction.  Un filtre.  Un entonnoir.  Un tube à essai.  Une pissette contenant de l’alcool à brûler.

Les étapes du protocole

Couper les écailles d’oignon (ou autre organisme) en petits morceaux. Dans un mortier, broyer des morceaux d’oignons avec 30mL de solution d’extraction.

Filtrer le broyat.

Incliner le tube à essai et verser le même volume d’alcool à brûler que de filtrat le long de la paroi,en faisant couler l’alcool le long du tube afin de ne pas mélanger la préparation.

Attendre quelques minutes puis observer.

Optionnel

Ajouter 2 gouttes de colorant: le vert de méthyle.

Protocole expérimental

Quiz pour comprendre les gestes de la manipulation

Retrouve le rôle de chaque étape du protocole en choississant la case qui te semble correcte.

Commencer

Adapté d'après l'idée de S.Gibert

Etape 1/5

Broyer du matériel vivant (banane, bulbe d’oignon, foie…) dans un pilon avec du liquide d'extraction.

Le broyage ainsi que la solution d'extraction font éclater les membranes cellulaires

Le broyage ainsi que le liquide permettent de dissoudre le noyau

Le liquide fait sortir le noyau des cellules

Etape 1 bis/5

Ajouter 30 mL de liquide d'extraction et remuer doucement. Attendre quelques minutes.

Le liquide va décomposer les membranes cellulaires.

Pour commencer le nettoyage du matériel.

Pour tuer les bactéries présentes dans la préparation.

Etape 2/5

Filtrer à l'aide d'un filtre et d'un entonnoir.

Pour éliminer les fragments de membrane ainsi que les molécules les plus grosses

Pour enlever le liquide de la préparation.

Pour ne garder que les éléments liquides

Etape 4/5

Ajouter à l’aide d’une pipette le même volume d’alcool, en faisant couler l’alcool le long du tube afin de ne pas mélanger la préparation.

L’alcool fait précipiter les molécules contenues dans le noyau.

L'alcool élimine les fragments de membranes cellulaires.

Etape 6/6

Ajouter 2 gouttes de colorant à la préparation.

Le vert de méthyle colore les membranes cellulaires

Le vert de méthyle donne une jolie couleur à la préparation.

Le vert de méthyle est un colorant de l'ADN.

Etape 6/6

Ajouter 2 gouttes de colorant à la préparation.

Le vert de méthyle colore les membranes cellulaires

Le vert de méthyle donne une jolie couleur à la préparation.

Le vert de méthyle est un colorant de l'ADN.

Mauvaise réponse!

Réessayer

Bravo tu es prêt(e) à suivre ce protocole!

Faire l'expérience

Revoir le protocole

Voici donc l'expérience virtuelle.On préfèrera le réel à celle-ci, si c'est possible. Je ne t'aide pas...

Et maintenant, que faire?

Verser le contenu du mortier dans le filtre.

Verser l'alcool dans le mortier.

Verser le contenu du mortier dans le filtre.

Clique sur le tube pour le replacer sur le porte-tubes.

Cette étape est optionnelle.