PCR
Polymerase Chain Reaction
הנחיות
זוהי מצגת בסגנון חדר בריחה. כל פעם שתתקלו באייקון הזה תלחצו עליו ותעברו למשימה. פיתרון נכון של המשימה יתן את הקוד למעבר לדף הבא
תוכן
תכנון תחלים
מטרה
סיכום
שימושים
שלבי התהליך
סימולציה
שאלות
מרכיבי התגובה
מטרת ה PCR
שיטת PCR היא שיטת מעבדה שפותחה בידי קארי מוליס בראשית שנות השמונים וזיכתה אותו בפרס נובל על המצאתו זו. בשיטה זו אפשר להגביר (לשכפל) כמויות זעירות של DNA נתון פי מיליארדים בתוך כמה שעות
שכפול DNA במבחנה
תהליך ה PCR מתבצע בתוך מבחנה ויש מס' הבדלים בין תהליך זה לתהליך שכפול ה DNA בתוך הגוף:
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
זיהוי מוטציות על ידי PCR
זיהוי מוטציות על ידי PCR
זיהוי מוטציות על ידי PCR
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
בדיקות DNA
בדיקות DNA
בדיקות DNA
בדיקות DNA
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
שלב הדנטורציה
שלב זה מתבצע ב 94-96 מעלות צלזיוס על מנת לנתק את קשרי המימן בין הבסיסים החנקניים במטרה להפריד בין גדילי ה DNA
שלב הצמדות התחלים
שלב זה מתבצע בטמפרטורות של בין 50 ל 65 מעלות צלזיוס כתלות בתחלים. ישנם מספר דברים שמשפיעים על הטמפרטורה:
- אורך התחלים (נע בין 18 ל 26 בסיסים בדרך כלל)
- כמות בסיסים G ו- C בתחל
שלב ההארכה
שלב זה מתבצע ב 72 מעלות צלזיוס. זוהי הטמפרטורה האופטימלית לפעילות האנזים . האנזים מתיישב על התחלים ומתחיל להאריך את השרשרת מקצה '5 לקצה '3 בעזרת תערובת הנוקלאוטידים.
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
מרכיבי התגובה
תחלים (פריימרים): כמות רבה של שני סוגי תחלים (פריימרים). אורך תחל הוא לפחות 18 נוקליאוטידים. התחלים הסמנים את גבולות הרצף המבוקש
תבנית DNA: DNA מטרה המשמש להגברה
תערובת נוקלאוטידים: כמות רבה של ארבעת סוגי הנוקליאוטידים החופשיים- dNTP
אנזים DNA Taq פולימראז עמיד בטמפרטורות גבוהות
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
סיכום
כאשר מתכננים רצף של תחל צריך להקפיד שלא יהיו על התחל עצמו בסיסים משלימים שיגרמו לו להיסגר על עצמו
משתמשים באנזים Taq פולימראז ולא בפולימראז של יונקים מכיוון שהאנזים Taq פולימראז עמיד בטמפרטורות גבוהות הנדרשות בשלב הדנטורציה
הטמפרטורה בשלב הצמדות התחלים מאוד מושפעת מרצף ואורך התחלים וצריך לכייל כל תחל חדש שיוצרים.
האנזים Taq פולימראז יוצר את גדיל ה DNA החדש מכיוון '5 לכיוון '3 ומתיישב על צד '3 של המקטע המבוקש בגדיל התבנית
את התוצרים ב PCR סטנדרטי ניתן לראות על ידי הרצה בג'ל אלקטרופורזה
כל תחל מצמד תחלים צריך להשלים לרצף על גדיל אחר של תבנית ה DNA
שלושת השלבים של התהליך חוזרים על עצמם כאשר מתקבל התוצר המבוקש רק החל מהסיבוב השלישי לתהליך
ככל שהתהליך יתבצע ביותר סבבים כך נקבל כמות תוצר גדולה יותר
כתבו את הקוד לסיום המצגת
Enter the password
PCR מצגת
Yael Segal-Ruder
Created on February 8, 2021
Start designing with a free template
Discover more than 1500 professional designs like these:
View
Visual Presentation
View
Vintage Photo Album
View
Animated Chalkboard Presentation
View
Genial Storytale Presentation
View
Higher Education Presentation
View
Blackboard Presentation
View
Psychedelic Presentation
Explore all templates
Transcript
PCR
Polymerase Chain Reaction
הנחיות
זוהי מצגת בסגנון חדר בריחה. כל פעם שתתקלו באייקון הזה תלחצו עליו ותעברו למשימה. פיתרון נכון של המשימה יתן את הקוד למעבר לדף הבא
תוכן
תכנון תחלים
מטרה
סיכום
שימושים
שלבי התהליך
סימולציה
שאלות
מרכיבי התגובה
מטרת ה PCR
שיטת PCR היא שיטת מעבדה שפותחה בידי קארי מוליס בראשית שנות השמונים וזיכתה אותו בפרס נובל על המצאתו זו. בשיטה זו אפשר להגביר (לשכפל) כמויות זעירות של DNA נתון פי מיליארדים בתוך כמה שעות
שכפול DNA במבחנה
תהליך ה PCR מתבצע בתוך מבחנה ויש מס' הבדלים בין תהליך זה לתהליך שכפול ה DNA בתוך הגוף:
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
זיהוי מוטציות על ידי PCR
זיהוי מוטציות על ידי PCR
זיהוי מוטציות על ידי PCR
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
בדיקות DNA
בדיקות DNA
בדיקות DNA
בדיקות DNA
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
שלב הדנטורציה
שלב זה מתבצע ב 94-96 מעלות צלזיוס על מנת לנתק את קשרי המימן בין הבסיסים החנקניים במטרה להפריד בין גדילי ה DNA
שלב הצמדות התחלים
שלב זה מתבצע בטמפרטורות של בין 50 ל 65 מעלות צלזיוס כתלות בתחלים. ישנם מספר דברים שמשפיעים על הטמפרטורה: - אורך התחלים (נע בין 18 ל 26 בסיסים בדרך כלל) - כמות בסיסים G ו- C בתחל
שלב ההארכה
שלב זה מתבצע ב 72 מעלות צלזיוס. זוהי הטמפרטורה האופטימלית לפעילות האנזים . האנזים מתיישב על התחלים ומתחיל להאריך את השרשרת מקצה '5 לקצה '3 בעזרת תערובת הנוקלאוטידים.
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
מרכיבי התגובה
תחלים (פריימרים): כמות רבה של שני סוגי תחלים (פריימרים). אורך תחל הוא לפחות 18 נוקליאוטידים. התחלים הסמנים את גבולות הרצף המבוקש
תבנית DNA: DNA מטרה המשמש להגברה
תערובת נוקלאוטידים: כמות רבה של ארבעת סוגי הנוקליאוטידים החופשיים- dNTP
אנזים DNA Taq פולימראז עמיד בטמפרטורות גבוהות
כתבו את הקוד לדף הבא
Enter the password
סיכום
כאשר מתכננים רצף של תחל צריך להקפיד שלא יהיו על התחל עצמו בסיסים משלימים שיגרמו לו להיסגר על עצמו
משתמשים באנזים Taq פולימראז ולא בפולימראז של יונקים מכיוון שהאנזים Taq פולימראז עמיד בטמפרטורות גבוהות הנדרשות בשלב הדנטורציה
הטמפרטורה בשלב הצמדות התחלים מאוד מושפעת מרצף ואורך התחלים וצריך לכייל כל תחל חדש שיוצרים.
האנזים Taq פולימראז יוצר את גדיל ה DNA החדש מכיוון '5 לכיוון '3 ומתיישב על צד '3 של המקטע המבוקש בגדיל התבנית
את התוצרים ב PCR סטנדרטי ניתן לראות על ידי הרצה בג'ל אלקטרופורזה
כל תחל מצמד תחלים צריך להשלים לרצף על גדיל אחר של תבנית ה DNA
שלושת השלבים של התהליך חוזרים על עצמם כאשר מתקבל התוצר המבוקש רק החל מהסיבוב השלישי לתהליך
ככל שהתהליך יתבצע ביותר סבבים כך נקבל כמות תוצר גדולה יותר
כתבו את הקוד לסיום המצגת
Enter the password