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DNA complementar e PCR

joana.beatriz.almeida.03

Created on February 2, 2021

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Transcript

DNA complementar e reações de polimerização em cadeia

INÍCIAR

Trabalho realizado por: Joana Almeida e Marta Costa, 12ºA

Índice

DNA complementar

Resultado final

PCR

Formação de cDNA

Crime

Para que serve?

cDNA vs DNA

O que é necessário?

Bibliografia

Aplicação prática

Fim

Fases do PCR

1. DNA complementar

Formação de cDNA

  • Um molde
  • Uma enzima capaz de catalizar a formação de DNA

É necessário:

mRNA maturo

Transcriptase reversa

Cadeia simples de DNA

DNA polimerase

Cadeia dupla de DNA

DNA de um eucarionte Pré-mRNA mRNA Transcriptase reversa Degradação do mRNA

Transcrição Maturação cDNA cDNA

cDNA VS DNA

cDNA DNA

Encontra-se na Natureza

Obtido em laboratório

Para a sua formação é necessário um mRNA maturo (molde)

Para a sua formação é necessária uma cadeia molde DNA

Contém regiões codificantes e regiões não codificantes

Apenas contém informação proveniente de exões

Aplicação prática deste processo

Produção de insulina humana

Produção de insulina

  • Antigamente
  • Atualmente

PCR

Reações de polimerização em cadeia

Para que serve?

Amplificar o DNA

Testes de Paternidade

Identificação de criminosos

Testes de Covid

Fonte: grupoghanem.com

Fonte: tuasaude.com

Fonte: jn.pt

PCR

Exemplo: Teste de COVID

Purificação do RNA

Recolha do muco nasal

Processo de formação de cDNA

Processo de PCR

Análise gráfica

O que é necessário?

Termociclador

Constituintes dos desoxirribonucleótidos

Sequência de DNA

Lorem ipsum dolor sit amet

+1m

DNA Polimerase

Primers

Fases do PCR:

( T= 95ºC )

1. Desnaturação:

Desnaturação

Emparelhamento dos primers

Amplificação

Fases do PCR:

( T = 50/60ºC )

2. Emparelhamento dos primers

Desnaturação

Emparelhamento dos primers

Amplificação

Fases do PCR:

( T = 75/85ºC )

3. Amplificação do DNA

Desnaturação

Emparelhamento dos primers

Amplificação

Resultado final:

20 ciclos

1 ciclo de PCR:

20

1048576

R J P S

ATIVIDADE - Crime fictício

Sangue

Bibliografia: http://e-escola.tecnico.ulisboa.pt/topico.asp?id=339 https://pt.wikipedia.org/wiki/DNA_complementar https://slideplayer.com.br/slide/3675461/ https://www.genome.gov/about-genomics/fact-sheets/Polymerase-Chain-Reaction-Fact-Sheet https://youtu.be/ThG_02miq-4 https://youtu.be/Kx5qMjh-izA

Obrigada!