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Prueba de aglutinación

nilda.apayco

Created on October 10, 2020

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Transcript

Práctica N° 9

Prueba de aglutinación: AntÍgenos febriles

Blga. Nilda Aurea Apayco Espinoza

Competencias

Identificar algunas aplicaciones de la reacción inmunológica de aglutinación mediante las pruebas de reacciones febriles.

Introducción

  • La aglutinación es una reacción que se presenta entre un antígeno multivalente y un anticuerpo bivalente, siendo alguno de estos particulado. Existen diversos tipos de aglutinación, la aglutinación activa o directa, en donde tenemos que la partícula presenta sus propios antígenos (por ejemplo, bacterias o eritrocitos), mientras que la aglutinación pasiva o indirecta en donde una partícula se le pega un antígeno. En la aglutinación inversa, a la partícula se le pega un anticuerpo (Marroquín Seguro et al., 2020).
  • La serología del género Salmonella constituye el complemento necesario para el diagnóstico de la fiebre tifoidea.
  • El género Salmonella tiene principalmente dos clases de antígenos:
  • – El antígeno "O" o antígeno somático termoestable.
  • – El antígeno "H" o antígeno flagelar termolábil.

MÉTODOS SEROLÓGICOS EN EL DIAGNÓSTICO DE SALMONELOSIS

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Diagnóstico de salmonelosis

Reacción de Widal

Aglutinación en placa

– Aglutinación en placa Procedimiento ampliamente utilizado por su simplicidad. – Aglutinación en tubo Debe utilizarse para confirmar la presencia de anticuerpos demostrados por la prueba en placa y para cuantificar su título.

A partir de la segunda semana, el paciente que sufre de fiebre tifoidea, contiene anticuerpos en la sangre, que pueden ser identificados probando el suero del paciente contra antígenos de salmonelas, los cuales pueden ser demostrados por la reacción de Widal (Instituto Nacional de Salud, 1999).

Se encuentra en el comercio antígeno de O y H de Salmonella para realizar la prueba. Este método es rápido y exacto. ♦ Es preciso agitar bien el vial de antígeno, antes de usarlo, para garantizar una suspensión uniforme y lisa. No deben congelarse. ♦ Almacenar los viales con antígeno a 2 - 8 °C.

materiales

Antígeno de Salmonella typhi H Y O. – Materiales para obtención de suero del paciente. – Pipetas serológicas de 0,2 mL – Placa de vidrio grande (20 x 20 cm) dividida con lápiz de cera y regla en cuadrados (2,5 - 1,27 cm) de preferencia, cinco hileras de seis cuadrados. – Un aplicador o un palito de dientes.

Procedimiento

Añadir a cada medida del suero 0,03 mL de suspensión de antígeno.

Mezclar cada compuesto antígeno-suero con un aplicador o un palito de dientes, comenzar con la dilución de suero de 0,005 mL y continuar hasta la dilución de 0,08 mL.

Depositar en los cuadrados de cada hilera o en cada lámina, las siguientes medidas del suero del paciente: 0,08, 0,04, 0,02, 0,01 y 0,005 mL.

Rotar (oscilar) la placa de vidrio suavemente 15 - 20 veces (durante 2 minutos). Proceder a la lectura inmediatamente.

lectura e informe

Observar la presencia de grumos, indicativo de aglutinación.

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4+ Aglutinación completa 3+ El 75 % de las partículas, están aglutinadas 2+ El 50% de las partículas, están aglutinadas 1+ El 25 % de las partículas, están aglutinadas Negativo Ninguna aglutinación.

Los grados de aglutinación se interpretan con la siguiente escala:

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– 0,08 mL de suero 1/20 – 0,04 mL de suero 1/40 – 0,02 mL de suero 1/80 – 0,01 mL de suero 1/160 – 0,005 mL de suero 1/320

Las diluciones de suero sobre la placa corresponden a las siguientes diluciones en tubo (aglutinación en tubo):

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El título del suero

El título del suero que se informa corresponde a la última dilución del suero en que se produce una aglutinación de por lo menos 2+ (50%) Ejemplo de cálculos.

VÍDEO

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