Métodos de Esterilización

factores que influyen

TEMPERATURA: las ENDOSPORAS bacterianas son la formas de vida más resistentes a la muerte por el calor, solo se alcanza la temperatura mortal si el calor está sometido a presión. HUMEDAD: la coagulación del protoplasma bacteriano (proteínas, enzimas) a temperaturas moderadas requiere humedad, y cuando se elimina la temperatura requerida para la coagulación se eleva rápidamente PRESIÓN: como tal, no tiene efecto, se necesita para mantener la temperatura del vapor por encima de los 100 °C.

Métodos de Esterilizacón

Esterilización tiene como objeto destruir todos los microorganismos vivos en estado de latencia. Constituye el fundamento de los métodos de trabajos microbiológicos y de conservación de alimentos.

Métodos Físicos

CALOR: es el agente más ampliamente utilizado para la esterilización.• FLAMEADO: con la llama del mechero, se esterilizan las ansas, espátulas pinzas, bocas de tubo de ensayo. • HÚMEDO CONTINUO: el ambiente saturado de vapor de agua. Para este método se utiliza el AUTOCLAVE. El agua hierve cuando su presión de vapor es igual a la presión exterior. A una presión normal 760mmHg hierve a 100° C. Ofrece la ventaja de penetración y humedad abundante, que favorece la coagulación de proteínas. Es preciso relacionar TIEMPO, TEMPERATURA Y PRESION que esterilicen en condiciones dadas.

Consejos para su manejo

1. Agregar agua en el casquete hasta la rejilla. 2. Colocar el material acondicionado a esterilizar sobre la rejilla. 3. Cerrar los tornillos enfrentados, ajustarlos con algún instrumento si fuese necesario. 4. Proceder al encendido. 5. Cerrar con el escape de vapor abierto y cuando sale un chorro de vapor continuo se cierra. IMPORTANTE eliminar el aire, porque este método se basa en la transmisión del calor por el vapor de agua, a este paso se lo conoce como ”purga”. 6. Cuando el manómetro llega a la presión deseada, se regula la llama y se controla el tiempo, cumplido este tiempo cortar la fuente de calor. 7. Para abrir el autoclave, cerrar la entrada de gas y esperar que la presión que marque el manómetro sea cero. PRECAUCIÓN no abrir antes de que la presión haya llegado a cero, porque el agua del autoclave tiende en ese momento a una temperatura superior a los 100° C y puede entrar en ebullición al igualarse las presión interna y externa , de este modo se mojan los tapones de algodón y pueden destaparse los recipientes que se están esterilizando. 9. Retirar el material, guardarlo en armario o lugar seco.

Importante!

TIEMPO: hace falta un cierto tiempo, para permitir que el vapor penetre y caliente los materiales a la temperatura de esterilización, aún después de haber alcanzado esta temperatura las esporas no mueren todas a la vez. Normalmente se tarda unos 11 a 12 minutos a 121°C (calor húmedo) en matar las endosporas de bacterias termófilas.

Calor Húmedo discontinuo

Calor seco: Horno eléctrico

menos efectivo que el húmedo, se requiere mayor temperatura y tiempo para esterilizar.

por calentamiento a ebullición del agua

Esterilización discontinua, fraccionada o tindalización .

Se utilizan para esterilizar todo clase de material de vidrio de laboratorio como tubos, cajas de Petri y frascos

VS

Consiste en calentar a 100°C en un Baño María durante 30 minutos durante 3 días consecutivos. El fundamento es que el primer calentamiento se matan las formas vegetativas y las esporas germinan luego y son destruidas durante segundo y tercer calentamiento.

La esterilización se realiza a 160-170°C durante 2 horas,

a tener en cuenta!

CONTROL DE ESTERILIZACIÓN: se realiza para comprobar si se cumplieron las condiciones de esterilización requeridas e el método empleado. CONTROL DE ESTERILIDAD: se toman muestras representativas de los objetos esterilizados y se realiza controles con el fin de asegurar la no presencia de microorganismos.