Desarrollo y validación de un método analítico por HPLC para la cuantificación de carotenoides obtenidos de actinobacterias.
Omar E. Valencia-Ledezma1, Rubria M. Martínez-Casares2*, Lucia Ortega Cabello3, Herminia I, Pérez Méndez3, Norberto Manjarrez Alvarez3, Aida Solís Oba3.1. Departamento de Micología y Patología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México, 2. Ciencias de la Salud, Univeridad del Valle de México Campus Lomas Verdes, 3. Departamento de Sistemas Biológicos, Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Xochimilco. *qfbmarlenmartinez@gmail.com
Introducción
Infografía
La validación de un método analítico es el proceso por el cual se establece, mediante estudios de laboratorio, que las características de desempeño del método cumplen con los requisitos para las aplicaciones analíticas previstas. Debido a las características especiales de los carotenoides, los métodos que se han planteado para su análisis son largos y costosos. Además, con frecuencia tienen errores que llevan a resultados falsos, tanto cuali- como cuantitativamente. Los carotenoides son pigmentos liposolubles, altamente insaturados, que se encuentran en plantas y algunos microorganismos. Son utilizados por sus propiedades antioxidantes como coadyuvantes en el tratamiento de algunas enfermedades crónicas como: cáncer, Parkinson, Alzheimer, entre otras. En este trabajo se desarrolló y validó un método analítico para la cuantificación de carotenoides extraídos de actinobacterias marinas.
metodología
RESULTADOS
Tabla 1. Parámetros obtenidos de la evaluación de Addecuabilidad y precisión del sistema
Figura 1. Cromatogramas y espectros UV-Vis de extractos de los medios GYE (A), ISP2 (B) y SALES (C). Color rojo: espectro del pico de un xantófilo hidroxilado, amarillo: xantófilo con grupo carbonilo, azul: xantófilo con grupo carbonilo e isomería “cis”.
Tabla 2. Precisión intermedia, Valores de F obtenidos del Análisis de varianza de dos factores; analistas y días
El límite de cuantificación (LC) fue 0.25 μg/mL, por debajo de esta concentración el CV es > 2.0 %. Para el límite de detección (LD) el compuesto es detectable hasta 0.01 μg/mL.
Se demuestra que el valor F experimental es menor que el F de tablas. Por lo tanto no existe diferencia estadísticamente significativa entre los analistas y días.
Gráfica 1. Linealidad del sistema, Coeficiente de Variación (CV) menor a 2.0 % por nivel.
Referencias
CONCLUSIÓN
El método desarrollado es confiable, exacto y preciso, ya que cumplio con los parámetros evaluados. Este método servirá para la cuantificación de xantófilos totales presentes en extractos de actinobacterias con potencial antioxidante.
- USP 40 – NF 35. Farmacopea de los Estados Unidos de América, Trigésima Séptima Revisión, y el Formulario Nacional, Trigésima Segunda Edición, pp 1257- 1286.
- Ramos, E., & Dary, O. (2001). Revista Científica de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, 14(1), 3.
@qfbvalencia84
Desarrollo y Validación de un método analítico por HPLC
qfbmarlenmartinez
Created on August 30, 2020
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Desarrollo y validación de un método analítico por HPLC para la cuantificación de carotenoides obtenidos de actinobacterias.
Omar E. Valencia-Ledezma1, Rubria M. Martínez-Casares2*, Lucia Ortega Cabello3, Herminia I, Pérez Méndez3, Norberto Manjarrez Alvarez3, Aida Solís Oba3.1. Departamento de Micología y Patología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México, 2. Ciencias de la Salud, Univeridad del Valle de México Campus Lomas Verdes, 3. Departamento de Sistemas Biológicos, Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Xochimilco. *qfbmarlenmartinez@gmail.com
Introducción
Infografía
La validación de un método analítico es el proceso por el cual se establece, mediante estudios de laboratorio, que las características de desempeño del método cumplen con los requisitos para las aplicaciones analíticas previstas. Debido a las características especiales de los carotenoides, los métodos que se han planteado para su análisis son largos y costosos. Además, con frecuencia tienen errores que llevan a resultados falsos, tanto cuali- como cuantitativamente. Los carotenoides son pigmentos liposolubles, altamente insaturados, que se encuentran en plantas y algunos microorganismos. Son utilizados por sus propiedades antioxidantes como coadyuvantes en el tratamiento de algunas enfermedades crónicas como: cáncer, Parkinson, Alzheimer, entre otras. En este trabajo se desarrolló y validó un método analítico para la cuantificación de carotenoides extraídos de actinobacterias marinas.
metodología
RESULTADOS
Tabla 1. Parámetros obtenidos de la evaluación de Addecuabilidad y precisión del sistema
Figura 1. Cromatogramas y espectros UV-Vis de extractos de los medios GYE (A), ISP2 (B) y SALES (C). Color rojo: espectro del pico de un xantófilo hidroxilado, amarillo: xantófilo con grupo carbonilo, azul: xantófilo con grupo carbonilo e isomería “cis”.
Tabla 2. Precisión intermedia, Valores de F obtenidos del Análisis de varianza de dos factores; analistas y días
El límite de cuantificación (LC) fue 0.25 μg/mL, por debajo de esta concentración el CV es > 2.0 %. Para el límite de detección (LD) el compuesto es detectable hasta 0.01 μg/mL.
Se demuestra que el valor F experimental es menor que el F de tablas. Por lo tanto no existe diferencia estadísticamente significativa entre los analistas y días.
Gráfica 1. Linealidad del sistema, Coeficiente de Variación (CV) menor a 2.0 % por nivel.
Referencias
CONCLUSIÓN
El método desarrollado es confiable, exacto y preciso, ya que cumplio con los parámetros evaluados. Este método servirá para la cuantificación de xantófilos totales presentes en extractos de actinobacterias con potencial antioxidante.
@qfbvalencia84