Laboratorio de Anaerobios

Laboratorio de Anaerobios

Mónica Maria Figueroa Echeverri.Bacteriologia II

Hay diferentes Técnicas para el aislamiento de Anaerobios:

Bolsas para Anaerobios : Importante montar lo más rápido posible, para evitar que el microorganismo entre en contacto con el oxigeno.

01

Implementos necesarios

Tenerlos listos al momento de realizar el montaje:

1. Bolsa de Anaerobiosis.
2. Generador de anaerobiosis.
3. Cultivos para anaerobios.
4. Indicador de anaerobiosis

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https://supromperu.com/producto/sachets-para-anaerobiosis-gaspak/

Medios de cultivos para anaerobios:

Cada institución determina los medios a utilizar

• Agar Sangre Anaerobico.
• Agar sangre lakada kanamicina-vancomicina.
• Agar Fenil-etil-alcohol.(FEA).
• Agar yema de huevo (EYA).
• Caldo tioglicolato.
• Agar shaeldler.

+ info

https://slideplayer.es/slide/3418350/

“Hay diferentes tipos de generadores e indicadores de anaerobiosis”

Según la casa comercial

http://jornades.uab.cat/workshopmrama/sites/jornades.uab.cat.workshopmrama/files/Jarra_anaerobiosis.pdf

https://www.sanilaboshop.es/GasPak-EZ-Anaerobe-Container-System-Sachets-Con-indicador20-uds

http://www.medioscultivo.com/anaerokit/

Generador para bolsas de anaerobiosis

Generador para jarra de anaerobisis

Generador con indicador incluido

Es más grande, Genbox

Genbag, para una casa comercial

Es de otra casa comercial

http://www.laboquimia.es/catalogo/producto.php?codigo=2025BR0055B

https://www.sanilaboshop.es/GasPak-EZ-Anaerobe-Container-System-Sachets-Con-indicador20-uds

https://co.pinterest.com/pin/233202086932742159/

Indicador de tirilla

Indicador de pastilla

Indicador papel humedo

Si el color es blanco No hay oxigeno, Si hay contacto con el oxigeno se puede poner de color rosado o azul , segun el indicador.

Procedimiento para el montaje de anaerobios

http://www.medioscultivo.com/anaerokit/

https://www.fishersci.es/es/es/products/I9C8L2AX/microbiology-equipment.html

Tener listo los implementos.

Colocar en la bolsa el generador e indicador

Sellar bien la bolsa de anaerobiosis

Colocar los medios sembrados en la bolsa de anaerobiosis

Sembrar la muestra en los medios

LLevar la bolsa a la estufa a 35C y revisar que el indicador este blanco.

http://www.analisisavanzados.com/index.php/anaerobiosis

Genbag Biomerieux

Sellado 2

Sellado 1

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Genbag Biomerieux

https://es.slideshare.net/munevarjuan/microorrganismos-anaerobios

Número de Cajas:

Ultimos detalles:

Hay generadores diferentes para anaerobiosis y Microaerofilia

Algunas casas comerciales sugieren 2 para microaerofilia y 5 para anaerobiosis.

Caldos anaerobios:

Tambien deben ser incubados en medio de anaerobiosis

• Tanto los caldos como los medios de cultivo solidos se llevan a la estufa a 35C.
• Tiempo de incubacion de anaerobios de 7 a 10 dias.
• Realizar lecturas periodicamente.
• Algunos anaerobios crecen antes de este tiempo

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http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-99572013000200002

02

Jarra o cajas para Anaerobios:

https://www.turalab.com/products/merck-116387-0001-anaerobic-jar-25-l-volume/

jarra-de-anaerobiosis-con-manometro-35-lt-oxoid1-edcc552b419f26e93915552652745793-480-0

http://asignatura.us.es/mbclinica/docs/recursos/12/tema-11.pdf

Jarra de anaerobiosis con manometro

Importante colocar indicador y generador de anaerobiosis

Otro tipo de generador para jarra de anaerobiosis

Las casas comerciales ofrecen cajas para anaerobiosis

Importante colocar generador, indicador y cerrar hemetica/

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03

Cabina o camara para Anaerobios:

Camara de anaerobiosis

La mejor alternativa para cultivo de anaerobios

En ningun momento la muestra entra en contacto con el oxigeno.

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https://www.labolan.es/es/producto/camara-hipoxia-bactrox.html

Si hay crecimiento se realiza prueba de aerotolerancia

Se realiza identificación para anaerobios

LLega una muestra para anaerobios

Se siembra en cultivos y ambiente para anaerobios

No crece en chocolate en condiciones aerobias es un Anaerobio estricto.

Vitek,Maldi-tof

Prueba de aerotolerancia:

Cada colonia que crece en condiciones de anaerobiosis

• Se siembra en agar sangre o Agar chocolate.
• Se incuba a 35C en ambiente de CO2 .

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Si no hay crecimiento en ambiente de aerobiosis + CO2

Si hay crecimiento en ambiente de aerobiosis + CO2

• No es un microorganismo anerobio.
• Se pasa el resultado como no se obtuvo crecimiento de anaerobios.
• Siempre y cuando se cumpla con el tiempo de incubacion establecido, para anaerobios

• Es un microorganismo anaerobio.
• Se realiza identificación, prueba de betalactamasa
• Pruebas de sensibilidad a solicitud médica.

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Maldi-tof

Vitek

Vitek MS

Equipos para identificación de Anaerobios

Coloración de gram

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/j.1600-0463.2010.02683.x

https://www.pinterest.com.mx/pin/108860515967655456/?amp_client_id=CLIENT_ID(_)&mweb_unauth_id=%7B%7Bdefault.session%7D%7D&simplified=true

https://clustersalud.americaeconomia.com/file/15266-bacteroides-fragilis-subsp-ovatus-bacteria-pvjpg

http://islandclub.over-blog.es/article-los-peligros-alimentarios-bacteria-patogenas-gram-positivas-68819903.html

Bacteroides fragilis

Formacion de esporas como los Clostridium

Actinomyces

Pleomorfismo bacteriano

Gracias